免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry）又稱 免疫細(xì)胞化學(xué)。它是 組織化學(xué)的分支，它是用標(biāo)記的 特異性抗體（或抗原）對(duì)組織內(nèi)抗原（或抗體）的分布進(jìn)行組織和細(xì)胞原位檢測(cè)技術(shù)。 中文名 免疫組化技術(shù) 外文名 Immunohistochemistry 又    稱 免疫細(xì)胞化學(xué) 屬    于 組織化學(xué) 目錄 1 前言 ? 發(fā)展介紹 ? 技術(shù)分類 ? 標(biāo)記物 ? 應(yīng)用 2 免疫組織化學(xué) 免疫組化技術(shù)前言 編輯 免疫組化技術(shù)發(fā)展介紹 ——1941年 Coons 首先用 熒光素 標(biāo)記抗體—檢測(cè)肺組織內(nèi)的肺炎雙球菌獲得成功。 —— 60年代 Nakane建立酶標(biāo)抗體技術(shù)——鐵蛋白標(biāo)記Ab技術(shù)。 —— 70年代 Stemberger 改良上述技術(shù)，建立 辣根過(guò)氧化物酶——抗體過(guò)氧化物酶（***）技術(shù)，使免疫細(xì) 胞化學(xué)得到廣泛應(yīng)用。 —— 80年代 Hsu 等建立了抗生物素—生素（ABC）法之后，免疫金—銀染色法、半抗原標(biāo)記法、 免疫電鏡 技術(shù)相繼問(wèn)世。 上海轉(zhuǎn)錄組技術(shù)比較好的公司找融享生物。內(nèi)蒙古動(dòng)物實(shí)驗(yàn)免疫組化機(jī)構(gòu)電話

DAB顯色

背景的深淺和特異性染色的深淺均可以由DAB孵育條件決定。DAB顯色時(shí)間不是固定的，主要由顯微鏡下控制顯色時(shí)間，到出現(xiàn)特異性染色較強(qiáng)而本底著色較淺時(shí)即可沖洗；DAB顯色時(shí)間很短（如幾秒或幾十秒）就出現(xiàn)很深的棕褐色，這很可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)高或抗體孵育時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，需要下調(diào)抗體濃度或縮短你的抗體孵育時(shí)間；此外，若很短時(shí)間就出現(xiàn)背景很深，還有可能你前面的封閉非特異性蛋白不全，需要延長(zhǎng)封閉時(shí)間；DAB顯色時(shí)間很長(zhǎng)（如超過(guò)十幾分鐘）才出現(xiàn)陽(yáng)性染色，一方面可能說(shuō)明你的抗體濃度過(guò)低或孵育時(shí)間過(guò)短（比較好一抗4℃過(guò)夜）；另一方面就是封閉時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。

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意義編輯

近年來(lái)，隨著免疫組織化學(xué)技術(shù)的發(fā)展和各種特異性抗體的出現(xiàn)，使許多疑難得到了明確診斷。在常規(guī)病理診斷中，5%-10%的病例單靠H.E.染色難以作出明確的形態(tài)學(xué)診斷。尤其是免疫組化在診斷和鑒別診斷中的實(shí)用價(jià)值受到了普遍的認(rèn)可，其在低分化或未分化的鑒別診斷時(shí)，準(zhǔn)確率可達(dá)50%-75%。免疫組織化學(xué)的臨床應(yīng)用主要包括以下幾方面：

⑴惡性的診斷與鑒別診斷；

⑵確定轉(zhuǎn)移性惡性的原發(fā)部位；

⑶對(duì)某類進(jìn)行進(jìn)一步的病理分型；

⑷軟組織的一般需根據(jù)正確的組織學(xué)分類，因其種類多、組織形態(tài)相像，有時(shí)難以區(qū)分其組織來(lái)源，應(yīng)用多種標(biāo)志進(jìn)行免疫組化研究對(duì)軟組織的診斷是不可缺少的；

⑸發(fā)現(xiàn)微小轉(zhuǎn)移灶，有助于臨床方案的確定，包括手術(shù)范圍的確定。

⑹為臨床提供方案的選擇。

物質(zhì)所具有的抗原性主要由分布在抗原表面的抗原決定簇決定。固定液的固定對(duì)免疫組化的正確結(jié)果極其重要，此液能使抗原保存良好?？乖迯?fù)的好壞直接影響著免疫組化檢測(cè)結(jié)果的可靠性。在進(jìn)行免疫組化時(shí)并非所有的抗原都要進(jìn)行抗原修復(fù)，抗原性保存良好或基本保存者不需要修復(fù)。目前抗原修復(fù)的方法主要有蛋白酶消化法、硼氫化鈉（NaBH4）修復(fù)法和熱修復(fù)法。較常用的是熱修復(fù)法，尤其是細(xì)胞核抗原經(jīng)熱修復(fù)后，其染色效果特別好。所以我們必須清楚影響抗原性的因素及各種抗原修復(fù)的方法，嚴(yán)格按照抗體說(shuō)明書(shū)進(jìn)行抗原修復(fù)。鑒于抗原修復(fù)時(shí)間的方法較多，在實(shí)際工作中，究竟選用何種抗原修復(fù)法，應(yīng)根據(jù)抗原抗體種類予以選擇，必要時(shí)可以多種方法同時(shí)使用，這樣使其更具有針對(duì)性，標(biāo)記結(jié)果更理想。上海融享生物科技有限公司整體實(shí)驗(yàn)外包免疫組化等病理實(shí)驗(yàn)。

免疫組化。染色 免疫組化可以輔助病理診斷、指導(dǎo)診斷、評(píng)估預(yù)后，所以在做免疫組化過(guò)程中的質(zhì)控問(wèn)題處理尤其重要［1］。隨著免疫組化試劑新種類不斷出現(xiàn)及方法的改進(jìn)，特別是即用型試劑盒的出現(xiàn)，使抗體的標(biāo)記更加簡(jiǎn)便、快捷，更加規(guī)范化。免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化染色技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的技術(shù)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)......免疫組化可以輔助病理診斷、指導(dǎo)診斷、評(píng)估預(yù)后，所以在做免疫組化過(guò)程中的質(zhì)控問(wèn)題處理尤其重要，隨著免疫組化試劑新種類不斷出現(xiàn)及方法的改進(jìn)，特別是即用型試劑盒的出現(xiàn)，使抗體的標(biāo)記更加簡(jiǎn)便、快捷，更加規(guī)范化。免疫組化標(biāo)準(zhǔn)化染色技術(shù)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)性很強(qiáng)的技術(shù)，任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題，都可以直接影響免疫組化結(jié)果。免疫組化服務(wù)性價(jià)比高周期短。吉林免疫組化機(jī)構(gòu)哪里有

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減少或消除非特異性染色的方法  組織中非抗原抗體反應(yīng)出現(xiàn)的陽(yáng)性染色稱為非特異性背景染色，較好常見(jiàn)的原因是蛋白吸附于高電荷的膠元和結(jié)締組織成分上。有效方法是在用首先抗體前加制備第二抗體動(dòng)物之非免疫血清（1：5-1：20）封閉組織上帶電荷基團(tuán)而除去與首先抗體非特異性結(jié)合。必要時(shí)可加入2%-5%牛血清白蛋白，可進(jìn)一步減少非特異性染色。作用時(shí)間為10-20min。也可用除制備首先抗體以外的其它動(dòng)物血清（非免疫的）。有明顯溶血的血清不能用，以免產(chǎn)生非特異性染色。免疫熒光染色時(shí)，可用0.01%伊文氏蘭(PBS溶液)稀釋熒光抗體,對(duì)消除背景的非特異性熒光染色有很好的效果。當(dāng)然使用特異性高、效價(jià)高的首先抗體是較好重要的條件。洗滌用的緩沖液中加入0.85%~1%NaCl成為高鹽溶液,充分洗滌切片,能有效的減少非特異性結(jié)合而減少背景染色。內(nèi)蒙古動(dòng)物實(shí)驗(yàn)免疫組化機(jī)構(gòu)電話