酶消化法 常用的消化酶有胰蛋白酶、胃蛋白酶，應(yīng)嚴(yán)格掌握好消化時(shí)間、溫度和濃度。胰蛋白酶使用濃度為0.05%～0.1%，消化溫度為37℃，消化時(shí)間為10～40**要用于細(xì)胞內(nèi)抗原的顯示:胃蛋白酶使用濃度為0.4%，消化溫度為37℃，消化時(shí)間為30～180要用于細(xì)胞間質(zhì)抗原的顯示，如:Laminin（層粘蛋白），Collagen IV（IV型膠原蛋白）等。熱修復(fù)法 現(xiàn)常用微波修復(fù)、高溫高壓修復(fù)、水浴加熱修復(fù)法。較常用的修復(fù)法是pH6.0枸櫞酸緩沖液。修復(fù)過(guò)程中的注意要點(diǎn)是:（1）達(dá)到規(guī)定的溫度（92℃～95℃以上）;（2）維持一定的時(shí)間，微波修復(fù)、水浴加熱須控制在10～15min，高溫高壓修復(fù)須控制在2min左右;（3）避免切片干涸，如果切片干涸，抗原則可能完全丟失;（4）加熱后必須經(jīng)過(guò)室溫自然冷卻20～30min，使未折疊的蛋白分子鏈恢復(fù)天然構(gòu)型。免疫組化服務(wù)優(yōu) 周期短，效率高。山西特殊染色免疫組化檢測(cè)哪里有

根據(jù)標(biāo)記物的不同，免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)可分為免疫熒光細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，免疫酶細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，免疫鐵蛋白技術(shù)，免疫金-銀細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，親和免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，免疫電子顯微鏡技術(shù)等。近些年來(lái)，核酸分子原位雜交技術(shù)采用生物素、地高辛等非放射性物質(zhì)標(biāo)記探針，和免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)密切結(jié)合，發(fā)展為雜交免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)。不同的免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，各具有獨(dú)特的試劑和方法，但其基本技術(shù)方法是相似的，都包括抗休的制備，組織材料的處理、免疫染色、對(duì)照試驗(yàn)、顯微鏡觀察等步驟。還有雙重和多重標(biāo)記技術(shù)也有重要的用途。山西特殊染色免疫組化檢測(cè)哪里有免疫組化切片 不掉片，厚薄均勻哪里好找上海融享生物。

復(fù)染

目的是形成細(xì)胞輪廓，從而更好地對(duì)目標(biāo)蛋白進(jìn)行定位，經(jīng)常用蘇木素復(fù)染（胞核染料）。注意蘇木素復(fù)染時(shí)間要看當(dāng)時(shí)的室溫、溶液的新舊、目標(biāo)抗原的定位等情況，一般數(shù)秒-數(shù)分鐘，胞漿蛋白可以適當(dāng)時(shí)間長(zhǎng)一點(diǎn)，而胞核算白則要短。不過(guò)這個(gè)如果染色不理想可以補(bǔ)救的。方法是：染色深則分化時(shí)間稍長(zhǎng)些即可；染色淺則再置于蘇木素中染色即可。鹽酸酒精是分化，氨水是返蘭。作用不同。片子復(fù)染完后流水振洗，然后置于鹽酸酒精中數(shù)秒（一定動(dòng)作要快）后拿出流水振洗，在放入氨水中返蘭即可。

它的原理

根據(jù)抗原抗體反應(yīng)和化學(xué)顯色原理情況，組織切片或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原先和一抗結(jié)合，再利用一抗與標(biāo)記生物素、熒光素等的二抗進(jìn)行反應(yīng)，前者再用標(biāo)記辣根過(guò)氧化物酶（HRP）或堿性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如鏈霉親和素等）結(jié)合，較終通過(guò)呈色反應(yīng)或熒光來(lái)顯示細(xì)胞或組織中化學(xué)成分，在光學(xué)顯微鏡或熒光顯微鏡下可清晰看見(jiàn)細(xì)胞內(nèi)發(fā)生的抗原抗體反應(yīng)產(chǎn)物，從而能夠在細(xì)胞爬片或組織切片上原位確定某些化學(xué)成分的分布和含量。

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免疫組織化學(xué)（Immunohisochemistry）檢測(cè)技術(shù)曾被公認(rèn)為病理學(xué)發(fā)展史上的第二個(gè)里程碑，此項(xiàng)技術(shù)發(fā)展到現(xiàn)在，較好充實(shí)了病理學(xué)的內(nèi)容，使病理診斷結(jié)果更精確，將病理學(xué)提高到了形態(tài)和功能相結(jié)合的水平。免疫組織化學(xué)方法的敏感性和特異性直接影響診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性。近兩年來(lái)，在本科同志的配合下，筆者已做免疫組化420例，取得了很好的效果，并且明顯的提高了診斷結(jié)果的準(zhǔn)確性，支持了對(duì)臨床病人的診療?，F(xiàn)提出以下五點(diǎn)供同道借鑒如果要做免疫組化找融享生物。山西特殊染色免疫組化檢測(cè)哪里有

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拍照

有條件的話比較好立即拍照，若不能及時(shí)拍照，也要封好片和用指甲油封固，保持避光和濕度。使用熒光顯微鏡注意嚴(yán)格按照熒光顯微鏡出廠說(shuō)明書要求進(jìn)行操作，不要隨意改變程序;應(yīng)在暗室中進(jìn)行檢查;防止紫外線對(duì)眼睛的損害，在調(diào)整光源時(shí)應(yīng)戴上防護(hù)眼鏡;檢查時(shí)間每次以1~2h為宜，超過(guò)90min，超高壓汞燈發(fā)光強(qiáng)度逐漸下降，熒光減弱;標(biāo)本受紫外線照射3~5min后，熒光也明顯減弱或褪色;激發(fā)光長(zhǎng)時(shí)間的照射，會(huì)發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象;所以較多不得超過(guò)2~3h;熒光顯微鏡光源壽命有限，標(biāo)本應(yīng)集中檢查，以節(jié)省時(shí)間，保護(hù)光源。天熱時(shí)，應(yīng)加電扇散熱降溫，新?lián)Q燈泡應(yīng)從開(kāi)始就記錄使用時(shí)間。燈熄滅后欲再啟用時(shí)，須待燈光充分冷卻后才能點(diǎn)燃。天中應(yīng)避免數(shù)次點(diǎn)燃光源。關(guān)閉汞燈至少在開(kāi)啟15-30分鐘后;標(biāo)本染色后立即觀察，因時(shí)間久了熒光會(huì)逐漸減弱。若將標(biāo)本放在聚乙烯塑料袋中4℃保存，可延緩熒光減弱時(shí)間，防止封裱劑蒸發(fā);使用的玻片等載體，都必須厚度均勻，無(wú)明顯的自發(fā)熒光，如果使用油鏡，還必須保證鏡油為無(wú)熒光鏡油;電源比較好裝穩(wěn)壓器，否則電壓不穩(wěn)不只會(huì)降低汞燈的壽命，也會(huì)影響鏡檢的效果。

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