激光掃描共聚焦顯微鏡(confocallaserscanningmi-croscopy,CLSM)是一種新型高精度的激光源加共聚焦顯微鏡,是利用激光作為光源,在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置,并利用計(jì)算機(jī)對(duì)所觀察分析對(duì)象進(jìn)行數(shù)字圖像處理的一套觀察和分析系統(tǒng)其比較大特點(diǎn)是對(duì)標(biāo)本進(jìn)行無(wú)損傷性的實(shí)時(shí)觀察分析,得到細(xì)胞或結(jié)構(gòu)內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖像,以及在亞細(xì)胞水平上觀察諸如Ca2+、pH值、膜電位等生理信號(hào)以及細(xì)胞形態(tài)的變化,對(duì)生物標(biāo)本進(jìn)行定性、定量、定時(shí)和定位研究,具有極大的優(yōu)越性[1]。主要構(gòu)件一個(gè)完整的CLSM系統(tǒng)由幾個(gè)主要的硬件和一些成像分析軟件組成。硬件包括表面熒光顯微鏡、激光光源及冷卻系統(tǒng)、定位掃描裝置、分辨系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng)、顯示器和圖像輸出打印設(shè)備。 雙光子顯微鏡使用時(shí),需要注意哪些問題呢?甘肅官方顯微鏡貨源推薦
激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面
上的每一點(diǎn)掃描 標(biāo)本上的被照射點(diǎn)發(fā)射的熒光在探測(cè)處成像
而來(lái)自該點(diǎn)以外的任何發(fā)射熒光均被探測(cè)阻擋 由探測(cè)后的
光電倍增管逐點(diǎn)接受 在計(jì)算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。所以照
明與探測(cè)相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的 也就是說(shuō)照明與
探測(cè)具有共同的焦平面。在載物臺(tái)上加一個(gè)微量步進(jìn)馬達(dá) 使載
物臺(tái)沿垂直方向(Z 軸) 上下步進(jìn)移動(dòng) 將樣品新的一個(gè)層面移到焦平
面上 這個(gè)層面又成像在顯示器上 隨著Z 軸的不斷移動(dòng) 就可得到
樣品不同層面連續(xù)的光學(xué)圖像 實(shí)現(xiàn)“光學(xué)切片” 的目的, 被形象地
稱為“顯微CT”, 在此基礎(chǔ)上計(jì)算機(jī)系統(tǒng)自動(dòng)進(jìn)行三維重建。 吉林光學(xué)顯微鏡使用雙光子顯微鏡時(shí)要注意些什么呢?
超分辨率熒光顯微成像作為一類很新的技術(shù),突破了光學(xué)成像中的衍射極限,把傳統(tǒng)成像分辨率提高了10~20倍,達(dá)到了幾十納米,把我們從顯“微”鏡時(shí)代帶入到顯“納”鏡時(shí)代。對(duì)生物學(xué)家而言,好比一個(gè)近視眼的人突然戴上了合適的眼鏡,從而可以用前所未有的視角觀察奇妙的生物微觀世界,揭示前所未見的生物微觀結(jié)構(gòu)和現(xiàn)象。這些超分辨技術(shù)在過去的七八年間不斷進(jìn)步,同時(shí)也已經(jīng)在生物學(xué)研究中應(yīng)用,包括細(xì)胞膜蛋白分布、細(xì)胞骨架、線粒體、染色質(zhì)、神經(jīng)元突觸以及原核生物的研究等。超分辨率技術(shù)一出現(xiàn)就引起關(guān)注,先是在2006年被世界期刊Science評(píng)為年度**技術(shù)突破,接著被生物醫(yī)學(xué)方法學(xué)比較好的期刊NatureMethods評(píng)為2008年年度方法。在2014年10月的NatureMethods10周年特刊評(píng)出的10年**技術(shù)中,超分辨率熒光顯微成像和單分子技術(shù)都出現(xiàn)在榜中,并幾乎在同時(shí)獲得2014年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)。
SPM(Scanning Probe Microscope) 是掃描隧道顯微鏡
STM及原子力顯微鏡AFM, 激光力顯微鏡LFM, 磁力
顯微鏡MFM等的統(tǒng)稱, 國(guó)際上近年發(fā)展起來(lái)的表面分析
儀器。
控制探針在被檢測(cè)樣品的表面進(jìn)行掃描, 同時(shí)記錄下
掃描過程中探針前列和樣品表面的相互作用, 就能得到
樣品表面的相關(guān)信息。
利用這種方法得到被測(cè)樣品表面信息的分辨率取決于
控制掃描的定位精度和探針作用前列的大小(即探針的
尖銳度) 。
原子級(jí)**辨率 ;
實(shí)空間中表面的三維圖像 ;
觀察單個(gè)原子層的局部表面結(jié)構(gòu) ;
可在真空、 大氣、 常溫等不同環(huán)境下工作;
可以得到有關(guān)表面結(jié)構(gòu)的信息, 例如表面不同
層次的態(tài)密度、 表面電子阱、 電荷密度波、 表
面勢(shì)壘的變化和能隙結(jié)構(gòu)等 。
激光掃描共聚焦顯微鏡哪里買到?
實(shí)際上,衍射極限是一種遠(yuǎn)場(chǎng)(far-field)效應(yīng),在近場(chǎng)(near-field)條件下無(wú)效。因此早期的一些嘗試突破光學(xué)衍射極限的努力都是基于近場(chǎng)光學(xué)成像的。像這次諾貝爾獎(jiǎng)得主EricBetzig就早在1993年發(fā)展了掃描近場(chǎng)光學(xué)顯微鏡,實(shí)現(xiàn)了室溫下的單分子超分辨率成像。然而,近場(chǎng)光學(xué)顯微鏡無(wú)法用于細(xì)胞內(nèi)部的成像,因此在生物領(lǐng)域的應(yīng)用一直沒有發(fā)展起來(lái)。后期的各種“突破”光學(xué)衍射極限的努力都是在遠(yuǎn)場(chǎng)條件下發(fā)展起來(lái)的。超分辨率顯微成像一般指在遠(yuǎn)場(chǎng)條件下基于熒光的、“突破”衍射極限的光學(xué)顯微成像技術(shù)。熒光是物質(zhì)吸收光照后發(fā)出的一類光。物質(zhì)分子中的電子分布在不同的能級(jí)上。當(dāng)一束光打到分子,分子具有一定的概率吸收光子,同時(shí)其處在基態(tài)的電子會(huì)躍遷到更高能量的激發(fā)態(tài)能級(jí)。處在激發(fā)態(tài)的電子有多種途徑回到基態(tài),其中一條途徑就是發(fā)出一個(gè)光子(熒光),釋放能量回到基態(tài)。 激光掃描共聚焦顯微鏡維修保養(yǎng)。廣東雙光子顯微鏡推薦貨源
激光掃描共聚焦顯微鏡故障維修技巧有哪些,有人知道嗎?甘肅官方顯微鏡貨源推薦
STM所具有的獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)
(l) 具有原子級(jí)的**辨率。 STM在平行和
垂直樣品表面方向的分辨率分別可達(dá)0.1nm
和0.01nm, 即可以分辨出單個(gè)原子。
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(2) 可實(shí)時(shí)地得到在實(shí)空間中表面的準(zhǔn)三維
圖象, 可用于具有周期性或不具備周期性的
表面結(jié)構(gòu)研究。
(3) 可以觀察單個(gè)原子層的局部表面結(jié)構(gòu),
而不是體相或整個(gè)表面的平均性質(zhì)。
4) 可在真空、 大氣、 常溫等不同環(huán)境下工作,
甚至可將樣品浸在水和其它溶液中, 不需要特別
的制樣技術(shù), 且探測(cè)過程對(duì)樣品無(wú)損傷。
( 5) 配合掃描隧道譜 STS( Scanning Tunneling
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( 5) 配合掃描隧道譜 STS( Scanning Tunneling
Spectroscopy) 可以得到有關(guān)表面電子結(jié)構(gòu)的信息,
例如表面不同層次的態(tài)密度、 表面電子阱、 電荷
密度波、 表面勢(shì)壘的變化和能隙結(jié)構(gòu)等。
(6) 在納米鑷子幫助下可實(shí)現(xiàn)原子的操縱和加工,
所以被認(rèn)為開始了納米科技的新時(shí)代。
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