對(duì)卵子進(jìn)行評(píng)估:胚胎學(xué)家指出:有紡錘體出現(xiàn)的卵母細(xì)胞有較高的受精率和胚胎發(fā)育率,也就是說紡錘體的存在與否,可以用來評(píng)價(jià)卵母細(xì)胞胞漿的成熟度。因此胚胎學(xué)家有三次通過紡錘體對(duì)我們的卵子進(jìn)行評(píng)估的機(jī)會(huì):(1)胚胎學(xué)家可以利用偏振光顯微鏡對(duì)卵子的紡錘體進(jìn)行觀察,通過定量分析數(shù)據(jù)對(duì)卵子進(jìn)行分級(jí),挑選出正常分裂的卵子,也就是出現(xiàn)紡錘體的卵子,進(jìn)而提高試管嬰兒的受精率。(2)胚胎學(xué)家還可以通過紡錘體來確定體外培養(yǎng)成熟卵子(IVM)的成熟期,進(jìn)而為體外成熟卵子進(jìn)行評(píng)估,***提高試管嬰兒的受精率和胚胎發(fā)育率。(3)由于紡錘體對(duì)環(huán)境溫度的改變非常敏感。溫度降至25℃時(shí),只需要10分鐘的時(shí)間,就會(huì)紡錘體造成不可逆的損傷。所以冷凍復(fù)蘇過程中溫度改變很有可能對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體和染色體造成損傷。因此胚胎學(xué)家可以應(yīng)用紡錘體成像幫助選擇復(fù)蘇后具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,進(jìn)而可以提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率。綜上所述,通過***細(xì)胞的紡錘體成像技術(shù)可以避免輔助生殖技術(shù)對(duì)卵母細(xì)胞紡錘體的損傷,有助于選擇具有正常紡錘體的卵母細(xì)胞,有利于提高受精率、卵裂率和臨床妊娠率,利用更科學(xué)的方式,將讓求子路的終點(diǎn)不再那么遙遠(yuǎn)。紡錘體的異??赡軐?dǎo)致遺傳信息的丟失或重復(fù),進(jìn)而引發(fā)遺傳性疾病。武漢Hamilton Thorne紡錘體觀測(cè)儀
Oosight影像分析系統(tǒng)采用液晶偏光成像技術(shù),無(wú)需對(duì)卵母細(xì)胞進(jìn)行染色,即可實(shí)時(shí)、清晰、高對(duì)比度地進(jìn)行紡錘體結(jié)構(gòu)和透明帶成像,對(duì)ICSI、核移植操作、卵母細(xì)胞質(zhì)量評(píng)價(jià)等有很好的輔助作用。
主要應(yīng)用ICSI:在單精胞漿注射過程中定位初級(jí)卵母細(xì)胞,避免卵的破裂損傷,增強(qiáng)胚胎的發(fā)育潛能。卵評(píng)估:利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí),改善對(duì)胚胎的選擇。體外成熟評(píng)估:在未成熟卵催化(IVM)過程判斷成熟期,判斷依據(jù)采用的是準(zhǔn)確的識(shí)別紡錘體,而非不準(zhǔn)確的極體。質(zhì)量控制:利用定量的分析數(shù)據(jù)對(duì)卵進(jìn)行分級(jí),改善對(duì)胚胎的選擇。
核移植:顯著提高核移植的成功率。由于在核摘除的過程可以清楚的看到核質(zhì),使得核移植的成功率增加了80%,并減少了線粒體DNA的摘除。卵冷凍研究:對(duì)冷凍的初級(jí)卵母細(xì)胞進(jìn)行解凍前和解凍后的定量分析,從而判斷卵的發(fā)育力,改善妊娠率。紡錘體研究:檢測(cè)胚胎中紡錘體的發(fā)育過程,確定正常和非正常分裂率(只可用于搭配有培養(yǎng)箱的顯微鏡)??梢詫?duì)染色體非正常的或非整倍體的胚胎成像,從而選擇***的前體做PGD診斷。透明帶研究:測(cè)量卵母細(xì)胞的透明帶;準(zhǔn)確測(cè)量紡錘體和透明帶中分子排列方向的差別變化,判斷紡錘體和透明帶是否處于正常狀態(tài) 深圳Hamilton Thorne紡錘體揭示卵母細(xì)胞關(guān)鍵結(jié)構(gòu)紡錘體微管網(wǎng)絡(luò)的動(dòng)態(tài)變化揭示了細(xì)胞分裂過程中分子層面的奧秘。
在有絲分裂中,紡錘體負(fù)責(zé)將姐妹染色單體分離并牽引至細(xì)胞兩極,形成兩個(gè)遺傳物質(zhì)完全相同的子細(xì)胞。而在減數(shù)分裂中,紡錘體則負(fù)責(zé)將同源染色體分離并牽引至細(xì)胞兩極,形成四個(gè)遺傳物質(zhì)相似的子細(xì)胞。這一過程實(shí)現(xiàn)了遺傳信息的重組和配子的形成。其次,在有絲分裂中,紡錘體的形成和分裂過程相對(duì)簡(jiǎn)單,主要依賴于中心體的復(fù)制和分離以及微管的動(dòng)態(tài)生長(zhǎng)和縮短。而在減數(shù)分裂中,紡錘體的形成和分裂過程則更加復(fù)雜。在減數(shù)分裂Ⅰ的前期,同源染色體需要發(fā)生配對(duì)、聯(lián)會(huì)、交換和交叉等過程,這些過程都依賴于紡錘體的微管網(wǎng)絡(luò)。此外,在減數(shù)分裂Ⅱ中,姐妹染色單體的分離也需要紡錘體的牽引和定位。此外紡錘體在有絲分裂和減數(shù)分裂中的形態(tài)和大小也存在差異。在有絲分裂中,紡錘體通常呈現(xiàn)出較為規(guī)則的紡錘形狀,而在減數(shù)分裂中,紡錘體的形態(tài)則更加多樣化,可能呈現(xiàn)出不規(guī)則的形狀或分叉的形態(tài)。
為了減少冷凍過程中紡錘體的損傷,研究者們嘗試在冷凍液及解凍液中添加細(xì)胞骨架保護(hù)劑,如紫杉醇(Taxol)。紫杉醇能夠穩(wěn)定微管結(jié)構(gòu),防止其在低溫下解聚。通過偏光成像技術(shù),研究者可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)紫杉醇對(duì)紡錘體的保護(hù)效果,評(píng)估其在冷凍保存過程中的作用機(jī)制。此外,還可以進(jìn)一步觀察解凍后卵母細(xì)胞的發(fā)育潛能,為臨床應(yīng)用提供可靠依據(jù)。無(wú)需對(duì)細(xì)胞進(jìn)行固定和染色,保持細(xì)胞的活性與完整性。能夠?qū)崟r(shí)監(jiān)測(cè)紡錘體的形態(tài)變化,評(píng)估冷凍效果。能夠捕捉到細(xì)微的紡錘體形態(tài)變化,提高評(píng)估的準(zhǔn)確性。紡錘體,作為細(xì)胞分裂的“引擎”,驅(qū)動(dòng)著生命的延續(xù)與多樣性。
選擇合適的冷凍保護(hù)劑是減少冷凍損傷的關(guān)鍵。然而,不同濃度的冷凍保護(hù)劑對(duì)MI期卵母細(xì)胞紡錘體的影響各異,需要通過大量實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)化。此外,冷凍保護(hù)劑的滲透性和毒性也是需要考慮的因素。冷凍和解凍過程中的溫度控制、時(shí)間控制以及操作手法等都會(huì)對(duì)MI期卵母細(xì)胞的紡錘體造成影響。因此,需要不斷優(yōu)化冷凍和解凍程序,以減少對(duì)紡錘體的損傷。近年來,研究者們通過不斷嘗試和優(yōu)化冷凍保護(hù)劑的配方,取得了進(jìn)展。例如,一些研究表明,使用高濃度的蔗糖作為冷凍保護(hù)劑可以提高M(jìn)I期卵母細(xì)胞的存活率和紡錘體穩(wěn)定性。此外,還有一些新型冷凍保護(hù)劑如乙二醇、丙二醇等也被應(yīng)用于MI期卵母細(xì)胞的冷凍保存中。顯微鏡下的紡錘體,如同精密的分子機(jī)器,引導(dǎo)染色體分離。香港紡錘體實(shí)時(shí)成像紡錘體胚胎植入
紡錘體的形成和功能與細(xì)胞的周期調(diào)控密切相關(guān)。武漢Hamilton Thorne紡錘體觀測(cè)儀
染色體當(dāng)細(xì)胞從間期進(jìn)入有絲分裂期,間期細(xì)胞微管網(wǎng)絡(luò)解聚為游離的αβ-微管蛋白二聚體,再重組成紡錘體,介導(dǎo)染色體的運(yùn)動(dòng);分裂末期紡錘體微管解聚,又重組形成細(xì)胞質(zhì)微管網(wǎng)絡(luò)??煞譃椋簞?dòng)粒微管:連接染色體動(dòng)粒于兩極的微管。極間微管:從兩極發(fā)出,在紡錘體中部赤道區(qū)相互交錯(cuò)的微管。星體微管:中心體周圍呈輻射分布的微管。染色體的運(yùn)動(dòng)依賴紡錘體微管的組裝和去組裝。在這一過程中動(dòng)粒微管與動(dòng)粒之間的滑動(dòng)主要是依靠結(jié)合在動(dòng)粒部位的驅(qū)動(dòng)蛋白和動(dòng)力蛋白沿微管的運(yùn)動(dòng)來完成。極微管在紡錘體中部交錯(cuò),有些分布在極微管之間特殊的雙極馬達(dá)蛋白,其中2個(gè)馬達(dá)蛋白沿一條微管運(yùn)動(dòng),另2個(gè)馬達(dá)結(jié)構(gòu)域沿另一條微管運(yùn)動(dòng)。由于2條微管分別來自二極,故極性相反。當(dāng)雙極驅(qū)動(dòng)蛋白四聚體沿微管向正極運(yùn)動(dòng)時(shí),紡錘體二極間距離延長(zhǎng)。反之紡錘體距離縮短。武漢Hamilton Thorne紡錘體觀測(cè)儀