CASA，即計(jì)算機(jī)輔助精子分析，是一種利用技術(shù)手段對(duì)精子活力、濃度和形態(tài)進(jìn)行精確評(píng)估的方法。WHO第五版指南強(qiáng)調(diào)，相比人工檢測(cè)，CASA提供更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)和精子動(dòng)力學(xué)參數(shù)，如前向運(yùn)動(dòng)和超活化運(yùn)動(dòng)，以及獲能精子特征參數(shù)。研究顯示，CASA檢測(cè)的精子參數(shù)與體內(nèi)外受精成功率和受孕時(shí)間有***關(guān)聯(lián)。使用CASA分析儀，通常通過(guò)相差顯微鏡識(shí)別活動(dòng)精子，適用于精子動(dòng)力學(xué)分析。但要確?？煽拷Y(jié)果，操作者需注意標(biāo)本制備、幀頻率、精子濃度等因素。每份樣本至少需要分析200個(gè)活動(dòng)精子的運(yùn)動(dòng)軌跡，更多精子樣本有助于分類和變異性的分析。國(guó)內(nèi)已有自主研發(fā)的精子分析儀，通常進(jìn)行兩次分析，每次至少200個(gè)精子，結(jié)果通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析得出。CASA在評(píng)估精子濃度時(shí)，需精確測(cè)量精子體積，確保**完全液化并充分混勻。計(jì)數(shù)板的精確性和計(jì)數(shù)一致性是關(guān)鍵，每次檢測(cè)需滿足5個(gè)視野和200條以上精子的比較低要求。對(duì)于高濃度**，可能需要稀釋以減少誤差。形態(tài)分析方面，CASA能夠定量評(píng)估精子頭部、中段和主段，尾部缺陷可通過(guò)活力評(píng)估。對(duì)于碎片過(guò)多或黏稠的**，可能需要洗滌以減少背景干擾。CASA中涉及一系列術(shù)語(yǔ)，如VCL（曲線速度）、VSL（直線速度）等，它們反映了精子運(yùn)動(dòng)的不同特性。所有操作人員都應(yīng)接受規(guī)范的CASA分析儀使用培訓(xùn)，嚴(yán)格按照使用指南進(jìn)行操作?。香港牛精子分析VCL

精子手工計(jì)數(shù)原理及操作方法1.原理：將精液用適當(dāng)?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯?，混勻注入?jì)數(shù)池內(nèi)計(jì)數(shù)，再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法（按照***版第四版《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》）1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準(zhǔn)進(jìn)行計(jì)數(shù)。3.計(jì)算1).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子少于10個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)所有25個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子在10~40個(gè),應(yīng)計(jì)10個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個(gè)**中方格內(nèi)精子多于40個(gè),應(yīng)計(jì)數(shù)5個(gè)中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式：精子數(shù)=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×25×1/計(jì)數(shù)池高度×20×103/ml=計(jì)數(shù)結(jié)果/計(jì)數(shù)中方格×1/計(jì)數(shù)池高度×5×103/ml香港快速運(yùn)動(dòng)精子分析精確溫度控制選擇合適的CASA檢測(cè)原理和設(shè)備，確保幀率要求，避免因設(shè)備問(wèn)題影響檢測(cè)結(jié)果?。

精子分析儀工作原理以灰度識(shí)別CASA為例，采用高分辨率的攝影技術(shù)與顯微鏡結(jié)合，**標(biāo)本液化后吸入計(jì)數(shù)，通過(guò)顯微鏡放大后，用圖像采集系統(tǒng)獲取精子動(dòng)、靜態(tài)圖像后輸入計(jì)算機(jī)。根據(jù)設(shè)定的精子大小和灰度、精子運(yùn)動(dòng)移位及運(yùn)動(dòng)參數(shù)，對(duì)采集圖像進(jìn)行精子密度、活動(dòng)力、活動(dòng)率、運(yùn)動(dòng)特征等幾十項(xiàng)檢驗(yàn)項(xiàng)目動(dòng)態(tài)分析，由計(jì)算機(jī)處理后，打印出“**分析檢查報(bào)告以及精子動(dòng)態(tài)特征分布圖”。一次能對(duì)1000個(gè)精子進(jìn)行動(dòng)態(tài)檢測(cè)分析，2-3分鐘即可完成檢測(cè)[1]。優(yōu)點(diǎn)：操作簡(jiǎn)便，用量少，檢測(cè)速度快，重復(fù)性優(yōu)于人工檢測(cè)，并且能夠快速、準(zhǔn)確的測(cè)定精子密度、活力、精子分級(jí)等，還可提供精子運(yùn)動(dòng)狀態(tài)的多種參數(shù)等。缺點(diǎn)：影響分析結(jié)果的因素較多，除**本身性質(zhì)所含的固有誤差外，不同的精子計(jì)數(shù)池的相對(duì)準(zhǔn)確性和精確性可產(chǎn)生明顯不一致的效果。

精子計(jì)數(shù)是在顯微鏡下計(jì)算一次排出的精液中精子的數(shù)量將精子計(jì)數(shù)值乘以精液量就可得出一次**的量。精液液化后將樣本按一定比例稀釋和固定后，滴于血細(xì)胞計(jì)數(shù)板上，在顯微鏡下計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)區(qū)內(nèi)的所有精子數(shù)并換算為每m1內(nèi)所含精子數(shù)。此外還可用電子細(xì)胞計(jì)數(shù)儀經(jīng)調(diào)整閾值設(shè)置后計(jì)數(shù)精子數(shù)量。將已經(jīng)液化的精液標(biāo)本均勻混合，用白細(xì)胞計(jì)數(shù)吸管吸精液至0.5刻度，再吸稀釋液至11刻度，振蕩三分鐘，然后置于血球計(jì)數(shù)板內(nèi)，計(jì)數(shù)二大格（每格面積1平方毫米）之精子數(shù)，在尾數(shù)后加5個(gè)“0”即得每毫升精液內(nèi)精子數(shù)。例如計(jì)數(shù)為1280個(gè)，則每毫升精子應(yīng)為128,000,000。精液稀釋液之配制：重碳酸鈉5克、福爾馬林1毫升、蒸餾水加至100毫升。稀釋液內(nèi)重碳酸鈉有消化粘液的作用，福爾馬林有使精子制動(dòng)的作用。如精液之稠度過(guò)高而不易吸取時(shí)，可以精液1毫升混勻于稀釋液19毫升內(nèi)，稀釋后進(jìn)行計(jì)數(shù)。如精子的數(shù)目極少，亦可改為稀釋10倍計(jì)數(shù)。每次排精75%的精子是從附睪尾部所貯存的，還有25%是由輸精管道的其他部分來(lái)的，因此單憑一次排精的精子計(jì)數(shù)來(lái)衡量睪丸生精機(jī)能是不***的。只有在排精后間隔4-5天以后多次精液檢查，才能比較正確地從這些精子計(jì)數(shù)來(lái)反映睪丸的生精機(jī)能。全自動(dòng)精子分析儀在臨床Z療中展現(xiàn)了明顯的優(yōu)勢(shì)。

HamiltonThorneIVOS是一套整合了光學(xué)觀察系統(tǒng)的精子動(dòng)力分析儀。如今，IVOS已成為快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定可靠的進(jìn)行精子分析的代名詞。儀器特點(diǎn)：新款內(nèi)建CDWriter!內(nèi)部整合光學(xué)系統(tǒng)自動(dòng)化，內(nèi)置樣品臺(tái)可用于多種樣品分析儀器操作簡(jiǎn)單提供滿足需求的分析結(jié)果實(shí)時(shí)質(zhì)量控制分析結(jié)果列表內(nèi)部整合的光學(xué)系統(tǒng)IVOS是***一套內(nèi)置光學(xué)系統(tǒng)的精子動(dòng)力分析儀。與其它同類產(chǎn)品相比，IVOS并不采用顯微鏡持續(xù)照明方式，而是采用閃光拍攝方法。這種拍攝方法能夠消除由于精子運(yùn)動(dòng)而造成的位置模糊。通過(guò)60禎/秒的拍攝速度，能夠得到準(zhǔn)確可靠的精子速度和運(yùn)動(dòng)參數(shù)分析結(jié)果。IVOS可在以下三種模式下分析精子樣品：相差，明場(chǎng)和多波長(zhǎng)熒光模式。自動(dòng)化內(nèi)置加熱平臺(tái)作為整合光學(xué)系統(tǒng)的一部分，由計(jì)算機(jī)控制的IVOS樣品平臺(tái)可在分析時(shí)提供準(zhǔn)確的溫度控制和位置定位。樣品臺(tái)的溫度可在室溫到40°C范圍內(nèi)調(diào)節(jié)，穩(wěn)定度為0.5°C。分析區(qū)域的選擇可選用自動(dòng)或手動(dòng)方式。樣品臺(tái)的溫度和位置可實(shí)時(shí)顯示在視頻窗口中。IVOS還允許用戶自己進(jìn)行分析室設(shè)定，控制分析樣品量。該設(shè)備的設(shè)計(jì)緊湊，占用空間小，適合不同規(guī)模的實(shí)驗(yàn)室使用。南京Hamilton Thorne精子分析W.H.O 5

精子分析儀參數(shù)，精子頭側(cè)擺幅度（ALH）?：精子頭關(guān)于其平均路徑的側(cè)向位移幅度。香港牛精子分析VCL

精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號(hào)、廠家差異不盡相同，操作人員上崗前必須經(jīng)過(guò)嚴(yán)格培訓(xùn)，了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等，使用前必須仔細(xì)閱讀說(shuō)明書。一般儀器都會(huì)經(jīng)歷如下操作步驟[1]：開機(jī)接通電源，打開計(jì)算機(jī)輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學(xué)檢查結(jié)果。2.加樣取液化的**1滴，滴入精子計(jì)數(shù)板的計(jì)數(shù)池中，置顯微鏡操作平臺(tái)上，點(diǎn)擊“活動(dòng)顯示”菜單，調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距，顯示器上即可顯示待測(cè)標(biāo)本的精子運(yùn)動(dòng)圖像。3.分析點(diǎn)擊“計(jì)算分析”菜單，系統(tǒng)進(jìn)入自動(dòng)分析狀態(tài)，圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進(jìn)行分析。4.打印報(bào)告分析結(jié)束后，可根據(jù)需要打印出分析結(jié)果。香港牛精子分析VCL