植入前遺傳學診斷(英文:preimplantation genetic diagnosis,PGD [2]),是在進行胚胎移植前,從卵母細胞或受精卵中取出極體或從植入前階段的胚胎中取1~2個卵裂球或多個滋養(yǎng)層細胞進行特定的遺傳學性狀檢測,然后據(jù)此選擇合適的胚胎進行移植的技術(shù) [2-3]。為2019年公布的計劃生育名詞。
應用情況近年來,我國每年通過輔助生殖技術(shù)出生的嬰兒有數(shù)十萬。胚胎植入前遺傳學診斷技術(shù)發(fā)展十分迅速。這項技術(shù)的廣泛應用,也為將來把基因組編輯技術(shù)用于人類受精卵打下了基礎(chǔ)?;蚪M編輯存在出現(xiàn)差錯的可能性,有可能會發(fā)生脫靶或造成胚胎嵌合等現(xiàn)象。將來如果用于臨床,對基因組編輯后的受精卵進行植入前遺傳學診斷是十分必要的 [2]。從卵母細胞或受精卵取出極體或從植入前階段的胚胎取1~2個卵裂球或多個滋養(yǎng)層細胞進行的特定遺傳學性狀檢測,然后據(jù)此選擇合適的胚胎進行移植的技術(shù)。 操作模式具備 “臨床模式” 及 “研究模式” 兩種,均為可調(diào)式,拓展了儀器在不同應用場景下的適用性。香港連續(xù)多脈沖激光破膜體細胞核移植
產(chǎn)生激光的三個條件是:實現(xiàn)粒子數(shù)反轉(zhuǎn)、滿足閾值條件和諧振條件。產(chǎn)生光的受激發(fā)射的首要條件是粒子數(shù)反轉(zhuǎn),在半導體中就是要把價帶內(nèi)的電子抽運到導帶。為了獲得粒子數(shù)反轉(zhuǎn),通常采用重摻雜的P型和N型材料構(gòu)成PN結(jié),這樣,在外加電壓作用下,在結(jié)區(qū)附近就出現(xiàn)了粒子數(shù)反轉(zhuǎn)—在高費米能級EFC以下導帶中貯存著電子,而在低費米能級EFV以上的價帶中貯存著空穴。實現(xiàn)粒子數(shù)反轉(zhuǎn)是產(chǎn)生激光的必要條件,但不是充分條件。要產(chǎn)生激光,還要有損耗極小的諧振腔,諧振腔的主要部分是兩個互相平行的反射鏡,***物質(zhì)所發(fā)出的受激輻射光在兩個反射鏡之間來回反射,不斷引起新的受激輻射,使其不斷被放大。只有受激輻射放大的增益大于激光器內(nèi)的各種損耗,即滿足一定的閾值條件:P1P2exp(2G - 2A) ≥ 1(P1、P2是兩個反射鏡的反射率,G是***介質(zhì)的增益系數(shù),A是介質(zhì)的損耗系數(shù),exp為常數(shù)),才能輸出穩(wěn)定的激光。1460 nm激光破膜8細胞注射借助電腦控制實現(xiàn)精確的激光定位,無需移動培養(yǎng)皿,點擊鼠標即可移動激光打靶位置。
試管嬰兒技術(shù)給不孕夫婦帶來了希望,越來越多無法自然受孕的夫婦選擇試管嬰兒技術(shù)成功迎來自己的寶寶??茖W研究表明,健康的胚胎是成功懷孕的關(guān)鍵。然而,通過試管嬰兒獲得的胚胎中有40-60%存在染色體異常,胚胎染色體異常的風險隨著孕婦年齡的增長而增加。染色體異常是妊娠失敗和自然流產(chǎn)的主要原因。
健康的胚胎是試管嬰兒成功的第一步。因此,植入前遺傳學篩查越來越受到重視,PGD/PGS應運而生。那么,染色體異常會導致哪些遺傳病,基因檢測是如何進行的呢?染色體問題有多嚴重?首先需要注意的是,能夠順利出生的健康寶寶,其實只是冰山一角。大部分染色體異常的胚胎無法植入、流產(chǎn)或停止,導致自然淘汰。99%的流產(chǎn)是由胎兒引起的,而不是母親。在卵子受精階段,染色體異常的百分比為45%。成功植入胚胎的染色體異常率為25%。在妊娠早期,染色體異常率為15%。研究表明,40歲以上染色體異常的百分比為60%,43歲以上則高達85%。這就證明了即使43歲以上的卵子發(fā)育成囊胚,染色體異常的比例其實很高,這是不可避免的,這也是高齡產(chǎn)婦流產(chǎn)率高的原因。
注意事項播報編輯1.激光二極管發(fā)射的激光有可能對人眼造成傷害。二極管工作時,嚴禁直接注視其端面,不能透過鏡片直視激光,也不能透過反視鏡觀察激光。2.器件需要合適的驅(qū)動電源,瞬時反向電流不能超過2uA,反向電壓不得超過3V,否則會損壞器件。驅(qū)動電源子在電源通斷時,要防止浪涌電流的措施。用示波器測試驅(qū)動電路時,要先斷開電源再連接示波器探頭,若在通電情況下測試探頭,可能引用浪涌電流損壞器件。3.器件應存放或工作于干凈的環(huán)境中。4.在較高溫度下工作,會增大閥值電流,較低轉(zhuǎn)化頻率,加速器件的老化。在調(diào)整光輸入量時,要用光功率表檢測,防止超過大額定輸出。5.輸出功率高于指定參數(shù)工作,會加速元件老化。6.機器需要充分散熱或在制冷條件下使用,激光二極管的溫度嚴格控制在20度以下,保證壽命。7.二極管屬于靜電敏感器件,在人體有良好的情況下才可以拿取,防靜電可以采用防靜電手鐲的方法。8.激光器的輸出波長受工作電流與散熱的影響,要保持良好的散熱條件,降低工作時管芯的溫度。加散熱器防止激光二極管在工作中溫升過高。熱效應環(huán)顯示功能能夠清晰標示出激光熱效應范圍,讓操作人員對激光作用范圍一目了然。
簡介播報編輯體細胞核移植(Somatic Cell nuclear transfer):又稱體細胞克隆,作為動物細胞工程技術(shù)的常用技術(shù)手段,即把體細胞核移入去核卵母細胞中,使其發(fā)生再程序化并發(fā)育為新的胚胎,這個胚胎**終發(fā)育為動物個體。用核移植方法獲得的動物稱為克隆動物。由于體細胞高度分化,恢復全能性困難,體細胞核移植的原理即是細胞核的全能性。操作過程播報編輯細胞核的采集和卵母細胞的準備從供體身體的某一部位上取體細胞,并通過體細胞培養(yǎng)技術(shù)對該體細胞進行增殖。采集卵母細胞,體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期,通過顯微操作去除卵母細胞中的核,由于減二中期細胞核的位置靠近***極體,用微型吸管可以一并吸出細胞核和***極體。細胞促融將供體細胞注入去核卵母細胞通過電刺激使兩細胞融合,供體細胞進入受體卵母細胞內(nèi)構(gòu)建重組胚胎,通過物理或化學方法(如電脈沖、鈣離子載體、乙醇、蛋白酶合成抑制劑等)***受體細胞,使其完成細胞分裂和發(fā)育進程。植入**母體體外完成早期胚胎培養(yǎng)后,將胚胎移植入**母體內(nèi),使其繼續(xù)發(fā)育為新個體。激光破膜儀在IVF領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用,為相關(guān)實驗提供了精確、實效的操作工具。歐洲自動打孔激光破膜8細胞注射
干細胞研究里,通過激光破膜對干細胞進行定向分化誘導等操作,推動再生醫(yī)學發(fā)展。香港連續(xù)多脈沖激光破膜體細胞核移植
在動物體細胞核移植技術(shù)中,注入去核卵母細胞的是供體細胞核,而非整個供體細胞。這一過程通常涉及顯微注射技術(shù),該技術(shù)能夠精細地將細胞核移入卵細胞的透明帶區(qū)域,即卵細胞膜的周邊,貼緊在膜表面。這一步驟避免了直接破壞細胞膜,從而減少了對卵細胞的傷害。注入細胞核后,接下來的一個關(guān)鍵步驟是通過電脈沖刺激,促使卵母細胞與供體細胞核進行融合。電脈沖能夠有效地打破細胞膜和透明帶之間的連接,使得供體細胞核能夠順利進入卵母細胞內(nèi)部,為后續(xù)的發(fā)育提供必要的遺傳信息。這種方法的優(yōu)勢在于,通過只注入細胞核,能夠比較大限度地保留卵母細胞的細胞質(zhì),這些細胞質(zhì)在早期胚胎發(fā)育過程中扮演著重要角色。此外,使用這種方法還可以避免一些可能由直接注入整個細胞引起的復雜問題,如細胞膜融合不完全或細胞質(zhì)不相容等。總的來說,體細胞核移植技術(shù)的**在于精細地選擇和注入供體細胞核,而非整個細胞,這不僅能夠減少對卵母細胞的損傷,還能確保胚胎發(fā)育的順利進行。香港連續(xù)多脈沖激光破膜體細胞核移植