精子手工計數(shù)原理及操作方法1.原理：將精液用適當?shù)南♂屢鹤饕欢肯♂尯螅靹蜃⑷胗嫈?shù)池內(nèi)計數(shù)，再算出每毫升精液中精子數(shù)。2.方法（按照***版第四版《全國臨床檢驗操作規(guī)程》）1).于小試管內(nèi)加精子稀釋液0.38ml,取液化精液20μl,加入稀釋液內(nèi)混勻。2).充分搖勻后,滴入改良Neubauer計數(shù)板的計數(shù)池內(nèi),靜置1~2分鐘,待精子下沉后,以精子頭部作為基準進行計數(shù)。3.計算1).如每個**中方格內(nèi)精子少于10個,應計數(shù)所有25個中方格內(nèi)的精子數(shù)。2).如每個**中方格內(nèi)精子在10~40個,應計10個中方格內(nèi)的精子數(shù)。3).如每個**中方格內(nèi)精子多于40個,應計數(shù)5個中方格內(nèi)的精子數(shù)。公式：精子數(shù)=計數(shù)結果/計數(shù)中方格×25×1/計數(shù)池高度×20×103/ml=計數(shù)結果/計數(shù)中方格×1/計數(shù)池高度×5×103/mlCASA系統(tǒng)主要用于精子動力學的分析，可以評估精子的濃度、活力等參數(shù)。南京計算機輔助精子分析重復性高

二、生化及免疫學檢驗：1、精漿果糖測定【正常參考值】9.11-17.67mmol/L?！九R床意義】（1）精液果糖為0，可見于先天性兩側輸精管及精囊腺缺如、兩側輸精管完全阻塞或逆行**。（2）精液果糖降低，常見于精囊炎和雄***分泌不足，果糖不足可導致精子運動能量缺乏，甚至不易受孕。2、精漿酸性磷酸酶測定【正常參考值】金氏法：＞255nmol·s-1/L【臨床意義】（1）精漿酸性磷酸酶含量增高，常見于前列腺肥大或早期前列腺惡性**患者。（2）精漿酸性磷酸酶含量降低，常見于前列腺炎患者。（3）精漿酸性磷酸酶檢測是法醫(yī)鑒定有無精液**敏感的方法。3、精漿頂體酶活性測定【正常參考值】36.72±21.43U/L?！九R床意義】精子頂體酶活力與精子密度及精子頂體完整率呈正相關，其活力不足，可導致男性不育。4、精漿乳酸脫氫酶-X同功酶(LDH-X)測定【正常參考值】LDH-X***活性：2620±1340U/L；LDH-X相對活性：≥0.426?！九R床意義】LDH-X具有睪丸及精子的組織特異性，是精于運動獲能的關鍵酶，該酶檢測可作為診斷男性不育有價值的指標。睪丸萎縮患者LDH-X降低或消失，精子發(fā)生缺陷時無LDH-X形成，少精或無精者可致LDH-X活性降低。服用棉酚也可抑制此酶活性。廣州快速運動精子分析DSL精子分析，平均角位移（MAD）?：精子頭沿其曲線軌跡瞬時轉(zhuǎn)折角度的時均J對值?。

精液檢查前有什么注意事項？一、留精液前，病人應停止**4～7天。檢查前1周不能用丙酸睪丸酮、**睪丸酮、苯丙酸諾龍。采取精液時，可用軟皂或石蠟油做**按摩，將標本收集在無菌的試管中；也可用避孕套（沖洗干凈，不含殺精子藥物）或采用**中斷法收集精液，但這樣收集的量往往不多。如用上述方法采不到精液，可經(jīng)直腸內(nèi)按摩精囊及輸精管末端、壓迫采尿，檢查沉渣中有無精子。不要將精液暴露在過熱和過冷的環(huán)境中。及時交給醫(yī)生備查，不得超過30分鐘。冷天要注意保暖，送檢時可放在內(nèi)衣口袋里保溫。二、如果要進行細菌培養(yǎng)，應先沖洗、消毒尿道口，再將精液收集在無菌試管中。夫妻同居3年以上，沒有采取任何避孕措施而未能受孕的稱不孕癥。如果是不孕癥，在雙方未進行檢查前，不能盲目懷疑某一方，更不能認為不孕的原因是女方。妊娠是夫妻雙方的事。實現(xiàn)受孕，男方的精液含量應正常，形態(tài)和動力也應正常。女方能正常排卵，精子和卵子能結合成受精卵，這種受精卵能在子宮內(nèi)膜種植。上述的幾個環(huán)節(jié)中的某一個環(huán)節(jié)發(fā)生障礙，都可引起不孕。三、如果上述檢查結果精液是正常的，女方也應去醫(yī)院檢查，包括全身情況、生殖***、卵巢排卵功能、輸卵管通暢否、免疫檢查。

美國HamiltonThorne的TOXIVOS精子分析儀已經(jīng)被FDA和國內(nèi)外毒理學實驗室所使用。本試驗研究目的對精子分析儀和血細胞計數(shù)板在大鼠附睪精子計數(shù)結果的比較驗證。方法選取三批次雄性SD大鼠60只,每批20只,對三批次雄鼠的精子計數(shù)進行比較。健康雄鼠通過戊巴比妥鈉麻醉實施安樂死后,取左側附睪尾稱重,將附睪尾部放入37℃預熱的含有M199培養(yǎng)液平皿中,剪碎附睪尾,放入培養(yǎng)箱中37℃孵育5min,然后吸取1份精子懸液,用M199培養(yǎng)液進行一定倍數(shù)的稀釋,混勻后,取1滴稀釋液,滴入精子分析儀**載玻片上,將載玻片放入TOXIVOS精子分析儀載物臺,進行精子計數(shù),同時吸取稀釋后的精子懸液滴入血細胞計數(shù)板內(nèi),通過光學顯微鏡進行計數(shù),比較兩種計數(shù)方法的差異性。結果***批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為70.2±33.2,61.0±27.1;第二批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為128.8±116.8,114.6±86.9;第三批次雄鼠精子分析儀和血細胞計數(shù)器的精子計數(shù)結果分別為165.9±91.7,140.0±59.6。三個批次的精子分析儀和血細胞計數(shù)板的精子計數(shù)結果無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。結論精子分析儀是一種方便、可靠、快速、高效的研究工具,在生殖毒理學研究中具有重要的應用價值。精子分析儀節(jié)省時間，提高實驗室的工作效率，讓醫(yī)生和科研人員更快速地獲取實驗分析結果。

精子分析儀使用方法儀器的使用方法因型號、廠家差異不盡相同，操作人員上崗前必須經(jīng)過嚴格培訓，了解工作原理、操作規(guī)程、校正方法等，使用前必須仔細閱讀說明書。一般儀器都會經(jīng)歷如下操作步驟[1]：開機接通電源，打開計算機輔助**分析系統(tǒng)。1.輸入患者信息及**理學檢查結果。2.加樣取液化的**1滴，滴入精子計數(shù)板的計數(shù)池中，置顯微鏡操作平臺上，點擊“活動顯示”菜單，調(diào)節(jié)好顯微鏡焦距，顯示器上即可顯示待測標本的精子運動圖像。3.分析點擊“計算分析”菜單，系統(tǒng)進入自動分析狀態(tài)，圖像顯示區(qū)出現(xiàn)精子分割圖像并進行分析。4.打印報告分析結束后，可根據(jù)需要打印出分析結果。Hamilton Thorne自動精子分析儀具有高精度、高效率和自動化的優(yōu)點。美國狗精子分析WOB

精子分析儀參數(shù)，平均路徑速率（VAP）?：精子頭沿其平均路徑移動時的時均速率。南京計算機輔助精子分析重復性高

測定精子密度和精子總數(shù)的方法主要包括顯微鏡計數(shù)和全自動分析。1.顯微鏡計數(shù)：這是傳統(tǒng)的測定方法，需要收集精液，通常是使用量杯。收集后，應在實驗室中盡快進行計數(shù)。應在光學顯微鏡下將精子進行分類，這一步非常重要，因為完整的精子才能被計數(shù)。然后，將剩余的精液樣本通過自然沉降或離心的方法讓精子下沉，通過顯微鏡觀察并計數(shù)。這種方法需要一定的經(jīng)驗和技巧，而且受到許多因素的影響，如精子的活動性、濃度、形態(tài)等。2.全自動分析：隨著科技的發(fā)展，現(xiàn)在有全自動的精子分析儀，可以快速準確地測定精子密度和總數(shù)。這種方法通過激光技術進行，可以測量大量精子，包括前向運動的精子。這些儀器通常可以提供更精確的結果，并且減少了人為錯誤。在進行精子計數(shù)前，男性應避免長時間禁欲，因為這可能會影響精子的數(shù)量和質(zhì)量。同時，健康的飲食和生活方式也有助于提高精子的數(shù)量和質(zhì)量。南京計算機輔助精子分析重復性高