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來源: 發(fā)布時間:2025-06-14

    無血清培養(yǎng)基中通常需要添加一些額外的組分,才能幫助細胞貼壁生長,包括以下幾大類物質:1)促貼壁物質:一般為細胞外基質,如纖連蛋白、層粘連蛋白等。它們還是重要的分裂素以及維持正常細胞功能的分化因子,對許多細胞的繁殖和分化,起著重要作用。纖連蛋白主要促進來自中胚層細胞的貼壁與分化,這些細胞包括成纖維細胞、肉瘤細胞、粒細胞、腎上皮細胞、腎上腺皮質細胞、CHO細胞、成肌細胞等。2)促生長因子:針對不同細胞添加不同的生長因子。也是刺激細胞生長、維持細胞功能的重要物質,有些是許多細胞必不可少的,如胰島素。3)酶抑制劑:培養(yǎng)貼壁生長的細胞,需要用胰酶消化傳代,在無血清培養(yǎng)基中需含酶抑制劑,以終止酶的消化作用,達到保護細胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制劑。4)結合蛋白和轉運蛋白:常見如轉鐵蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比較大,可增加培養(yǎng)基的粘度,保護細胞免受機械損傷。許多旋轉式培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常見的。DMEM/F12培養(yǎng)基含有多種微量元素,廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養(yǎng)。福建正規(guī)細胞培養(yǎng)基源頭廠家

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    含豐富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡鹽溶液溶解)與合成培養(yǎng)基(如MEM細胞培養(yǎng)基)以1:1的比例混合使用。目前用于細胞培養(yǎng)的血清主要是牛血清,培養(yǎng)某些特殊細胞也用人血清、馬血清等。牛血清對絕大多數(shù)哺乳動物細胞都是適合的,但并不排除在培養(yǎng)某種細胞時使用其他動物血清更合適。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。此外,血清含一些對細胞產生毒性的物質,如多胺氧化酶,能與來自高度繁殖細胞的多胺反應(如精胺、亞精胺)形成有細胞毒性作用的聚精胺。補體、抗體等都會影響細胞生長,甚至造成細胞死亡。目前,血清多作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5~20%,常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份復雜,批間差異大及存在病毒等外源污染風險,對下游生物制品的分離純化和安全性都存在較大的影響,在生物制藥行業(yè)的使用也越來越少。因此,基于對血漿成份的分析,合成細胞培養(yǎng)基應運而生。合成培養(yǎng)基是根據天然培養(yǎng)基的成分,用化學物質模擬合成、人工設計、配制的培養(yǎng)基。開發(fā)的基礎培養(yǎng)基(minimalessentialmedium,MEM)。廣西DMEM細胞培養(yǎng)基全國發(fā)貨Ham’s F-12營養(yǎng)混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)是由Ham以Ham’s F-10營養(yǎng)混合物為基礎設計而成的。

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病毒學研究領域,DMEM 培養(yǎng)基也是不可或缺的重要材料。它可用于培養(yǎng)病毒顆粒,為深入研究病毒的生命周期創(chuàng)造條件。在 DMEM 培養(yǎng)基構建的環(huán)境中,病毒宿主細胞,并完成吸附、侵入、復制、裝配和釋放等一系列生命活動??蒲腥藛T借此觀察病毒復制過程,了解病毒如何利用宿主細胞的物質和能量進行自身繁殖,進而篩選出有效的抗病毒藥物。例如,在流感病毒研究中,利用 DMEM 培養(yǎng)基培養(yǎng)流感病毒,研究其變異規(guī)律及對不同藥物的敏感性,為流感防治提供有力支持。

    Ham’sF-12K培養(yǎng)基是Ham’sF-12營養(yǎng)混合物的Kaighn’s改進型,在Ham’sF-12的基礎上提高了氨基酸和**酸的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培養(yǎng)基**初設計用于培養(yǎng)原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。針對***的細胞培養(yǎng)應用,我們提供多種組分的Ham’sF-12K改良培養(yǎng)基。葡萄糖可以根據研究需要,隨意調節(jié)葡萄糖的濃度,方便快捷。高糖型培養(yǎng)基普遍應用于生長快、粘附性低的細胞、雜交瘤的骨髓瘤細胞、克隆細胞、DNA轉染的轉化細胞、各種原代病毒宿主細胞、單一細胞的培養(yǎng)以及疫苗的生產,例如利用CHO細胞表達EPO和生產乙肝疫苗。低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細胞的培養(yǎng)。HEPES是一種優(yōu)良的生物緩沖劑,對細胞無毒性作用,添加HEPES的培養(yǎng)基能夠較長時間保持恒定的PH范圍,可以有效的防止培養(yǎng)液PH波動較大對細胞生長產生不利的影響。可用于無CO2培養(yǎng)箱。 RPMI-1640是改進型的McCoy ‘s 5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng)。

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RPMI-1640細胞培養(yǎng)基是改進型的McCoy‘s5A培養(yǎng)基,使用碳酸氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基常初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現(xiàn)在已廣泛應用于各種正常細胞和ai細胞的培養(yǎng),包括HeLa細胞、Jurkat細胞、MCF-7細胞、PC12細胞、PBMC細胞、星形膠質細胞和ai細胞,是使用常為廣的培養(yǎng)基之一。

RPMI-1640細胞培養(yǎng)基L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)元素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解,不含L-谷氨酰胺的培養(yǎng)基,可以根據研究需要任意調整L-谷氨酰胺的用量,在使用時添加新鮮的L-谷氨酰胺或其替代物更利于細胞的生長。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺。Alanyl-glutamine,Ala-Glu),又名丙氨酰谷氨酰胺、丙谷二肽,是一種高級細胞培養(yǎng)添加劑,可直接替代細胞培養(yǎng)基中的L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺(Glutamine)是細胞培養(yǎng)中所必需的一種營養(yǎng)素,但其在溶液中不穩(wěn)定,會自發(fā)降解生成氨和焦谷氨酸,其中氨對細胞有害;而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分的穩(wěn)定,不會自發(fā)的降解。 MCDB131是MCDB培養(yǎng)基的一種,是由Knedler和Ham設計開發(fā)出來的,初用于培養(yǎng)人微血管內皮細胞(HMVEC)。安徽實驗細胞培養(yǎng)基批發(fā)

DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎,也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。福建正規(guī)細胞培養(yǎng)基源頭廠家

    MEMα是一種改良的MEM培養(yǎng)基,與MEM培養(yǎng)基相比MEMα培養(yǎng)基營養(yǎng)更為豐富,在MEM的基礎上又添加了NEAA、**酸鈉、硫酸鋅、VB12、生物素、抗壞血酸等成分,廣泛應用于各種哺乳動物懸浮和貼壁細胞的培養(yǎng)。不含核苷和脫氧核苷的MEMα培養(yǎng)基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型細胞的篩選培養(yǎng)基。酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑,用以持續(xù)監(jiān)測培養(yǎng)液的酸堿度,在低PH值時酚紅使培養(yǎng)液呈黃色,而較高的PH值時使培養(yǎng)液呈紫色,PH值~,**適合細胞培養(yǎng)。但酚紅也有一些缺點,研究表明酚紅可以模擬固醇類***(特別是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的細胞時(如乳腺組織),比較好使用不含酚紅的培養(yǎng)基。酚紅會干擾流式細胞分析時候的檢測。此外,一些無血清培養(yǎng)基的配方中若存在酚紅會干擾鈉-鉀平衡。青霉素-鏈霉素混合液通常也被稱為“雙抗”,是體外培養(yǎng)中為預防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能夠干擾細菌細胞壁的合成,對革蘭陽性菌特別有效;而鏈霉素能夠與細菌核糖體30S亞單位結合,抑制細菌蛋白質的合成,對革蘭氏陰性菌和革蘭氏陽性菌均有效,但對革蘭氏陰性菌特別有效。青霉素和鏈霉素聯(lián)合使用可以預防絕大部分的細菌污染。 福建正規(guī)細胞培養(yǎng)基源頭廠家

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