把膜先用TBST泡洗兩遍再用5%脫脂奶粉或者BSA室溫封閉1-2小時(shí)。注意一定要讓蛋白面充分接觸封閉液。2、孵一抗脫脂奶粉封閉的話，要用TBST泡洗三遍再轉(zhuǎn)移至一抗溶液中，BSA封閉的可以直接轉(zhuǎn)移至一抗中。如果膜的寬(膜是一個(gè)長(zhǎng)方形，這里的寬與長(zhǎng)相對(duì)應(yīng))不大于8毫米，我習(xí)慣置于15毫升離心管中孵育，兩條膜"背對(duì)背"式放置于一個(gè)管子里(3毫升液體即可)。如果大于8毫米，就用普通的5格的一抗孵育盒(4毫升即可)。4度過(guò)夜，一般是12-18個(gè)小時(shí)，注意放置水平，用搖床。內(nèi)參等蛋白豐度很高的如果孵久了可能出現(xiàn)條帶連在一起的情況，這時(shí)可以縮短孵育時(shí)間或者降低一抗的濃度。六、孵二抗顯影1、孵二抗室溫一個(gè)小時(shí)足矣。這步要注意的是建議用5%BSA或者脫脂奶粉稀釋二抗，這樣背景會(huì)干凈許多。也要注意膜的蛋白面要充分接觸二抗溶液，我們一般一條膜一個(gè)槽地孵。2、顯影這一步有個(gè)細(xì)節(jié)可能有些同學(xué)沒(méi)注意到，就是ECL發(fā)光液要與HRP反應(yīng)一分鐘后顯影效果才會(huì)更好，還有要注意的是顯影液要均勻覆蓋，一般第二次顯影(加新的顯影液)比一次好看。人類疾病的動(dòng)物模型是指各種醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中建立的具有人類疾病模擬表現(xiàn)的動(dòng)物。江蘇腦定位動(dòng)物模型培養(yǎng)

    橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱：橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：SD大鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雄性4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：5周5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：150g-180g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2016橄欖油聯(lián)合酒精致肝硬化門脈高壓大鼠模型20周詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法：橄欖油聯(lián)合酒精誘導(dǎo)。按，背頸部皮下注射50％CCl4的橄欖油溶液，**注射量加倍（6mL/kg體重），2次/周，皮下注射共13周；造模前4周為10%酒精溶液喂養(yǎng)代替飲水，4周后改為30%酒精溶液灌胃（30%酒精溶液灌胃1mL/100g體重，3次/周）。繼續(xù)正常飼養(yǎng)1個(gè)月。實(shí)驗(yàn)結(jié)束測(cè)量門靜脈血流量(PBF)和腸系膜上動(dòng)脈血流量(SMABF)。處死，取肝臟進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：門靜脈及腸系膜上動(dòng)脈血流量情況與正常對(duì)照組比較均增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義肝組織病理可見(jiàn)肝硬化病理改變。三、交付標(biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明：1、如有特殊要求，請(qǐng)另詢價(jià)。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)。云南小鼠動(dòng)物模型構(gòu)建LPS脂多糖致膿毒血癥肝損傷小鼠模型。

    其也是可以作為視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的。以上所述為本發(fā)明的實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，本發(fā)明可以有各種更改和變化。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。sequencelisting四川省人民醫(yī)院利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用111406dna人工序列1gaatgcagtgacctatgatgatgtgtgtgtgaacttcactctggaagaatggactttact60ggatccttcacagaagagtctctacagagatgtgatgcaggaaacctacaggaatctcac120tgctataggctacaattgggaagatgacaatattgaagactattttcaaagttctagaag180acatggaaggcatgaaagaaatcatagtggagagaaaccttatgcttgtaaccaatgtga240taaagccttttcatgtcatcatagtctccaaatacataaaagaagacatactggagagaa300actctatgaatgtaaccgttgtaataaaggctttccatatcccagtgctctacaaataca360taaaaggatacacagtggagagaaaccctatgaatgtaaacaatgtggtaaagcctttgc420atgtcacagttctcttcaaaggcatgaaagaatacatactggtgagaaaccttatgaatg480tagccaatgtggtaaagcctttacacatcaaaagagtctccaaatacataaaagaactca540cagtggagaaaaaccatatgggtgtagtcagtgtggaaaagactttgtaagtcagagtcg600tcttctagaacataaaaggacacatactgga。

    放血致失血性貧血小鼠模型一、服務(wù)信息1、動(dòng)物模型名稱：放血致失血性貧血小鼠模型2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬：KM小鼠3、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物性別：雌雄不限4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物年齡：約4周齡5、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體重：18~22g6、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物環(huán)境：SPF級(jí)二、服務(wù)項(xiàng)目服務(wù)編號(hào)服務(wù)內(nèi)容服務(wù)周期價(jià)錢DH2014放血致失血性貧血小鼠模型3個(gè)工作日詢價(jià)1、實(shí)驗(yàn)方法：眼眶靜脈叢放血法。小鼠通過(guò)眼眶靜脈叢放血，，并測(cè)外周血紅細(xì)胞總數(shù)（RBC）及血紅蛋白含量（Hb）。24h后所有小鼠眼眶靜脈叢檢測(cè)外周血RBC總數(shù)及Hb含量。2、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)：模型組小鼠放血后24小時(shí)的外周血RBC總數(shù)及Hb含量較放血前明顯下降，低于正常值參考值，且與正常對(duì)照組比較具**性差異（P<），表明成功構(gòu)建了失血性貧血?jiǎng)游锬Ｐ驮炷！Ｈ?、交付?biāo)準(zhǔn):1.提供動(dòng)物模型構(gòu)建過(guò)程中的原始實(shí)驗(yàn)記錄及數(shù)據(jù)圖片。2.根據(jù)要求提供構(gòu)建成功的模型動(dòng)物或相關(guān)組織材料。四、服務(wù)項(xiàng)目說(shuō)明：1、如有特殊要求，請(qǐng)另詢價(jià)。2、雙方簽訂合同后，收取70%首付后啟動(dòng)實(shí)驗(yàn)?？梢院?jiǎn)化實(shí)驗(yàn)操作和樣品收集。

    IgA腎病小鼠模型【目的】建立IgA腎病小鼠模型，并觀察模型的生化及病理指標(biāo)特點(diǎn)?！静牧稀?、酸化水：鹽酸調(diào)滅菌水；2、蓖麻油+CCl4：5:1配制；3、LPS：；4、血清白蛋白BSA：800mg/kg用量，滅菌水配制；【方法】小鼠BSA+CCl4+脂多糖LPS誘導(dǎo)法1、20g小鼠牛血清白蛋白BSA(800mg/kg)隔天灌胃1次，配制160mg/ml，灌胃100ul/只，持續(xù)8周；2、同時(shí)皮下注射蓖麻油和CCl4（5:1），1次/周，持續(xù)8周；3、分別于第6、8周以（）尾靜脈注射LPS，1次/周；4、每?jī)芍苋?4h尿液一次觀察尿蛋白及紅細(xì)胞；5、每日觀察精神、飲食、大小便，第9周處死，取血和腎、肝做相應(yīng)檢查；6、取尿液后2000r/min離心10min，取上清用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)尿蛋白肌酐比值，鏡下觀察尿沉渣中有無(wú)紅細(xì)胞。鹽酸阿霉素誘導(dǎo)心衰小鼠模型。湖北豚鼠動(dòng)物模型手術(shù)

小鼠卵巢早衰POF模型。江蘇腦定位動(dòng)物模型培養(yǎng)

    本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)工程技術(shù)領(lǐng)域，具體而言，涉及一種利用gm20541基因構(gòu)建視網(wǎng)膜色素變性疾病模型的方法和應(yīng)用。背景技術(shù)：視網(wǎng)膜色素變性(retinitispigmentosa，rp)是一組視網(wǎng)膜光感受器異常導(dǎo)致的遺傳性致盲眼底病，在全世界的發(fā)病率約為1/3000～1/4000，而在中國(guó)人群的發(fā)病率可達(dá)1/3500，由于我國(guó)人口眾多，rp患者可達(dá)三十萬(wàn)之眾，給家庭和社會(huì)帶來(lái)了沉重的負(fù)擔(dān)。目前針對(duì)rp的診斷和面臨許多困難，尚無(wú)有效的手段，這主要?dú)w因于其在臨床表型和遺傳上具有高度的異質(zhì)性，針對(duì)其病理機(jī)制系統(tǒng)研究不足。典型的rp患者早由于視桿細(xì)胞功能缺陷而出現(xiàn)夜盲和視野狹窄，逐步發(fā)展為管狀視野，直至失明；眼底檢查可見(jiàn)視網(wǎng)膜色素沉著。在病理學(xué)方面，典型的rp主要影響視桿細(xì)胞，造成視桿細(xì)胞死亡并繼發(fā)視錐細(xì)胞死亡，主要表現(xiàn)為光感受器受損、變性，視網(wǎng)膜外核層逐漸變薄直至消失，視網(wǎng)膜外網(wǎng)層及其他相關(guān)細(xì)胞層出現(xiàn)相應(yīng)病理改變。此外，由于rp在臨床表型和遺傳模式上均具有高度的異質(zhì)性，導(dǎo)致許多的rp致病機(jī)制尚不清楚，這為rp疾病的臨床診斷帶來(lái)極大困難，因此針對(duì)rp疾病的致病機(jī)制研究迫在眉睫。而目前，缺乏相應(yīng)的rp疾病模型。江蘇腦定位動(dòng)物模型培養(yǎng)