胰蛋白胨大豆肉湯(TSB):通用營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基的廣泛應(yīng)用胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)是一種廣使用的通用營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,適用于多種微生物的增菌培養(yǎng)。它不僅營(yíng)養(yǎng)豐富,還能支持多種細(xì)菌的生長(zhǎng),特別適用于金黃色葡萄球菌的MPN測(cè)定和藥品生產(chǎn)線無(wú)菌灌裝試驗(yàn)。組成與作用TSB的主要成分包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨、氯化鈉、磷酸氫二鉀和葡萄糖。其中,胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖提供碳源;磷酸氫二鉀作為緩沖劑;氯化鈉維持滲透壓平衡。制備時(shí),稱(chēng)取30.0g培養(yǎng)基粉末,加熱攪拌溶解于1000ml蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鐘,冷卻后備用。應(yīng)用領(lǐng)域TSB廣泛應(yīng)用于多個(gè)領(lǐng)域:微生物增菌:適用于多種細(xì)菌的增菌培養(yǎng),如金黃色葡萄球菌、大腸桿菌等。無(wú)菌檢測(cè):用于藥品生產(chǎn)線的無(wú)菌灌裝試驗(yàn)。消毒效果測(cè)試:用于測(cè)試消毒劑的消毒效果。優(yōu)點(diǎn)營(yíng)養(yǎng)豐富:提供充分的營(yíng)養(yǎng)成分,促進(jìn)微生物生長(zhǎng)。通用性強(qiáng):適用于多種微生物的培養(yǎng)。操作簡(jiǎn)便:制備和使用過(guò)程簡(jiǎn)單,適合實(shí)驗(yàn)室常規(guī)操作??傊?,胰蛋白胨大豆肉湯(TSB)因其通用性強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)豐富,已成為微生物學(xué)研究和檢測(cè)中的重要工具。牛膽鹽的添加有效抑制了革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),使得培養(yǎng)基更適合分離和鑒定大腸菌群。營(yíng)養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)皿
霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基:微生物檢測(cè)的“顯色”利器霉菌和酵母菌顯色培養(yǎng)基是一種基于酶底物法的微生物檢測(cè)工具,通過(guò)顯色反應(yīng)來(lái)區(qū)分和鑒定霉菌與酵母菌。這種培養(yǎng)基利用微生物自身代謝產(chǎn)生的特異性酶與顯色底物反應(yīng),使菌落呈現(xiàn)特定顏色。制備時(shí),按4.75g/100ml的比例稱(chēng)取培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或純化水中,加熱煮沸至完全溶解,冷卻至45-50℃后傾注平皿,冷卻凝固備用。操作步驟按標(biāo)準(zhǔn)方法制備樣品液。取適量樣品液涂布或劃線接種于平板上。在25-28℃培養(yǎng)3-5天。觀察菌落顏色:白色念珠菌、熱帶菌、光滑菌、克柔假絲酵母菌、釀酒酵母菌均顯藍(lán)綠色;霉菌顯棉狀藍(lán)綠色菌落;細(xì)菌生長(zhǎng)受抑制。優(yōu)點(diǎn)與應(yīng)用快速檢測(cè):3-5天即可觀察結(jié)果。高特異性:通過(guò)顯色反應(yīng),能有效區(qū)分霉菌和酵母菌。操作簡(jiǎn)便:無(wú)需復(fù)雜設(shè)備。這種培養(yǎng)基廣泛應(yīng)用于食品、環(huán)境樣品中霉菌和酵母菌的檢測(cè),為微生物檢測(cè)提供了一種高效、準(zhǔn)確的方法。支原體瓊脂培養(yǎng)皿腸球菌顯色培養(yǎng)基通過(guò)顯色反應(yīng),使腸球菌在培養(yǎng)基上形成紅色至紫色的菌落,其他菌則顯無(wú)色、黃色或被抑制。
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基:精細(xì)檢測(cè)的高效工具阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基是一種用于快速檢測(cè)食品(尤其是嬰兒配方奶粉)中阪崎腸桿菌(克羅諾桿菌屬)的微生物培養(yǎng)基。阪崎腸桿菌是一種重要的食源性條件致病菌,能夠通過(guò)污染嬰幼兒配方食品導(dǎo)致嚴(yán)重的新生兒腦膜炎、菌血癥和小腸結(jié)腸炎等疾病。原理該培養(yǎng)基利用阪崎腸桿菌自身代謝產(chǎn)生的酶與顯色底物反應(yīng),使菌落顯色。顯色底物由產(chǎn)色因子和微生物部分可代謝物質(zhì)組成,在特異性酶作用下,游離出產(chǎn)色因子使菌落顯示一定顏色。阪崎腸桿菌在培養(yǎng)基上顯藍(lán)-綠色菌落,而其他菌則顯無(wú)色或黃色。操作步驟用接種環(huán)接種mLST-Vm肉湯或EE肉湯增菌液10μL劃線或涂布于阪崎腸桿菌顯色平板上。倒置放入培養(yǎng)箱36℃±1℃培養(yǎng)22-26h,典型的阪崎腸桿菌為藍(lán)-綠色菌落。挑取典型菌落做生化試驗(yàn)。優(yōu)點(diǎn)快速檢測(cè):24-48小時(shí)內(nèi)可出結(jié)果。高特異性:通過(guò)顯色反應(yīng),能有效區(qū)分阪崎腸桿菌與其他非目標(biāo)菌。操作簡(jiǎn)便:無(wú)需復(fù)雜的設(shè)備和步驟。
腦心浸出液肉湯(BHI):營(yíng)養(yǎng)豐富的微生物培養(yǎng)基腦心浸出液肉湯(Brain Heart Infusion Broth,簡(jiǎn)稱(chēng)BHI)是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究和檢測(cè)的培養(yǎng)基,特別適用于培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌、酵母和霉菌。制備方法:稱(chēng)取37.0g培養(yǎng)基干粉,加入1L蒸餾水或去離子水中。加熱煮沸至完全溶解。分裝至試管或三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻后備用。檢驗(yàn)原理BHI培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分主要來(lái)源于胰蛋白胨、牛心浸粉和葡萄糖。胰蛋白胨和牛心浸粉提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子;葡萄糖為多種細(xì)菌提供能源;氯化鈉維持滲透壓平衡;磷酸氫二鈉作為緩沖劑。應(yīng)用BHI培養(yǎng)基用途廣,包括:培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等。用于培養(yǎng)單增李斯特菌,可顯著提高培養(yǎng)時(shí)的OD值。作為藥敏實(shí)驗(yàn)的接種用培養(yǎng)基。配制血液培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)致病性菌。質(zhì)量控制質(zhì)控菌株接種待測(cè)試培養(yǎng)基,35~37℃,需氧培養(yǎng)18~24小時(shí),結(jié)果如下:金黃色葡萄球菌(ATCC 6538):肉湯混濁,生長(zhǎng)良好。注意事項(xiàng)儲(chǔ)存條件:陰涼干燥、通風(fēng)處保存,保質(zhì)期三年。使用時(shí)需注意無(wú)菌操作,避免污染。BHI培養(yǎng)基因其營(yíng)養(yǎng)豐富、制備方便和應(yīng)用廣,已成為微生物培養(yǎng)中的重要工具。總之,弧菌顯色培養(yǎng)基憑借其快速、準(zhǔn)確、特異性高的特點(diǎn),已成為檢測(cè)弧菌的重要工具。
TTC營(yíng)養(yǎng)瓊脂:助力細(xì)菌總數(shù)測(cè)定的高效培養(yǎng)基TTC營(yíng)養(yǎng)瓊脂是一種廣應(yīng)用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定的微生物培養(yǎng)基。其關(guān)鍵成分包括蛋白胨、牛肉浸粉、氯化鈉、瓊脂和TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)。這種培養(yǎng)基通過(guò)TTC的作用,使大多數(shù)細(xì)菌在生長(zhǎng)過(guò)程中還原TTC,形成易于辨別的紅色菌落。制備方法TTC營(yíng)養(yǎng)瓊脂的制備相對(duì)簡(jiǎn)單。稱(chēng)取33.0g培養(yǎng)基干粉,加入1L蒸餾水或去離子水中,攪拌加熱煮沸至完全溶解。然后分裝到適當(dāng)?shù)娜萜髦校?21℃高壓滅菌15分鐘。滅菌結(jié)束后,搖勻以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。檢驗(yàn)原理蛋白胨和牛肉浸粉為細(xì)菌提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉維持培養(yǎng)基的滲透壓;瓊脂作為凝固劑使培養(yǎng)基形成固體狀態(tài);TTC則用于指示細(xì)菌的生長(zhǎng),大多數(shù)細(xì)菌能還原TTC,使其形成紅色菌落,同時(shí)TTC還能減緩某些細(xì)菌的蔓延生長(zhǎng)。應(yīng)用領(lǐng)域TTC營(yíng)養(yǎng)瓊脂主要用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定,符合GB/T4789.9-2003和GB/T4789.28-2003標(biāo)準(zhǔn)。它廣泛應(yīng)用于食品、水質(zhì)、藥品等領(lǐng)域的微生物檢測(cè),能夠有效防止菌落蔓延,使菌落變紅,便于計(jì)數(shù)。質(zhì)量控制在質(zhì)量控制方面,TTC營(yíng)養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基的性能可通過(guò)接種特定的質(zhì)控菌株進(jìn)行驗(yàn)證。改良馬丁培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、酵母浸出粉、葡萄糖、磷酸氫二鉀和硫酸鎂。營(yíng)養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)皿
胰酪胨和大豆蛋白胨提供豐富的氮源和生長(zhǎng)因子,葡萄糖作為碳源支持微生物生長(zhǎng),磷酸氫二鉀則起到緩沖作用。營(yíng)養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)皿
10. SH培養(yǎng)基(不含蔗糖和瓊脂)在植物基因組編輯研究中的應(yīng)用植物基因組編輯技術(shù)(如CRISPR-Cas9)需要高效的培養(yǎng)系統(tǒng)以支持編輯細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。SH培養(yǎng)基(不含蔗糖和瓊脂)因其高效的營(yíng)養(yǎng)成分和靈活的配方,成為植物基因組編輯研究的理想工具。不含蔗糖的特性使得研究人員能夠優(yōu)化碳源的種類(lèi)和濃度,從而支持編輯細(xì)胞的高效生長(zhǎng)。液體培養(yǎng)基的特性則有利于編輯細(xì)胞的均勻分布和高效篩選。例如,在作物改良中,SH培養(yǎng)基被用于優(yōu)化基因組編輯細(xì)胞的培養(yǎng)條件,從而提高編輯效率。營(yíng)養(yǎng)鹽瓊脂培養(yǎng)皿