標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號營養(yǎng)瓊脂:多功能微生物培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號營養(yǎng)瓊脂是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究和檢測的培養(yǎng)基,適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng)、分離和計數(shù)。配方與制備標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號營養(yǎng)瓊脂的典型配方為:蛋白胨:15g/L酵母提取物:3g/LD-葡萄糖:1g/L氯化鈉:6g/L瓊脂粉:15g/L制備方法如下:稱取40g培養(yǎng)基干粉,加入1L去離子水中。加熱煮沸至完全溶解。121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻至55℃以下后,倒入無菌平皿,每個90mm培養(yǎng)皿中倒入15-20mL培養(yǎng)基。應(yīng)用領(lǐng)域標(biāo)準(zhǔn)Ⅱ號營養(yǎng)瓊脂適用于多種細(xì)菌的培養(yǎng),包括但不限于:計數(shù)與分離:用于細(xì)菌總數(shù)的測定和分離。增菌:為細(xì)菌提供豐富的營養(yǎng),促進(jìn)其生長。特殊培養(yǎng)基的制備:可作為基礎(chǔ)培養(yǎng)基,添加血液、腹水或血清后用于培養(yǎng)鏈球菌、肺炎球菌等苛養(yǎng)菌。無菌檢測:推薦用于好氧菌的無菌檢測。注意事項稱量與溶解:稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道不適。溶解時建議水溫在40℃以下,避免瓊脂結(jié)塊。滅菌:滅菌后需充分搖勻,以防瓊脂沉積于器皿底部而凝固。保存:干粉培養(yǎng)基使用后立即旋緊瓶蓋,避免吸潮結(jié)塊。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)在20-30℃的環(huán)境中儲存。使用:已凝固的培養(yǎng)基不可反復(fù)多次加熱溶化使用。牛膽鹽和去氧膽酸鈉作為選擇性抑菌劑,可有效抑制革蘭氏陽性菌的生長,同時促進(jìn)革蘭氏陰性菌的生長。25%甘油硝酸鹽瓊脂培養(yǎng)皿
腦心浸出液肉湯(BHI):營養(yǎng)豐富的微生物培養(yǎng)基腦心浸出液肉湯(Brain Heart Infusion Broth,簡稱BHI)是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)研究和檢測的培養(yǎng)基,特別適用于培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌、酵母和霉菌。制備方法:稱取37.0g培養(yǎng)基干粉,加入1L蒸餾水或去離子水中。加熱煮沸至完全溶解。分裝至試管或三角瓶,121℃高壓滅菌15分鐘。冷卻后備用。檢驗原理BHI培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分主要來源于胰蛋白胨、牛心浸粉和葡萄糖。胰蛋白胨和牛心浸粉提供氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為多種細(xì)菌提供能源;氯化鈉維持滲透壓平衡;磷酸氫二鈉作為緩沖劑。應(yīng)用BHI培養(yǎng)基用途廣,包括:培養(yǎng)營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌,如鏈球菌、腦膜炎球菌、肺炎球菌等。用于培養(yǎng)單增李斯特菌,可顯著提高培養(yǎng)時的OD值。作為藥敏實驗的接種用培養(yǎng)基。配制血液培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)致病性菌。質(zhì)量控制質(zhì)控菌株接種待測試培養(yǎng)基,35~37℃,需氧培養(yǎng)18~24小時,結(jié)果如下:金黃色葡萄球菌(ATCC 6538):肉湯混濁,生長良好。注意事項儲存條件:陰涼干燥、通風(fēng)處保存,保質(zhì)期三年。使用時需注意無菌操作,避免污染。BHI培養(yǎng)基因其營養(yǎng)豐富、制備方便和應(yīng)用廣,已成為微生物培養(yǎng)中的重要工具。VRE瓊脂平板腸球菌顯色培養(yǎng)基通過顯色反應(yīng),使腸球菌在培養(yǎng)基上形成紅色至紫色的菌落,其他菌則顯無色、黃色或被抑制。
霉菌培養(yǎng)基具有出色的抑制雜菌能力,宛如為霉菌培育打造的 “純凈衛(wèi)士”。在霉菌培養(yǎng)過程中,雜菌的污染可能會與霉菌競爭營養(yǎng)物質(zhì)、改變培養(yǎng)基的理化性質(zhì),甚至產(chǎn)生抑制霉菌生長的物質(zhì),從而嚴(yán)重影響霉菌的培養(yǎng)效果。為了避免這種情況,該培養(yǎng)基添加了一些具有選擇性抑制作用的成分。例如,某些抗生物質(zhì)或抑菌劑能夠特異性地抑制細(xì)菌、酵母菌等常見雜菌的生長,而對霉菌的生長影響較小。同時,通過調(diào)整培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分和培養(yǎng)條件,如降低易被雜菌利用的碳源或氮源的濃度、控制培養(yǎng)溫度和 pH 值等,也可以進(jìn)一步抑制雜菌的生長繁殖,為霉菌創(chuàng)造一個相對純凈的生長環(huán)境。在霉菌的工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)中,有效抑制雜菌污染能夠提高發(fā)酵效率和產(chǎn)品質(zhì)量,減少生產(chǎn)成本和損失,保障霉菌發(fā)酵產(chǎn)業(yè)的穩(wěn)定發(fā)展,凸顯了該培養(yǎng)基抑制雜菌特性的重要性和實用性。
酸性肉湯(GB):微生物檢測中的重要工具酸性肉湯是一種專門用于酸性罐頭食品商業(yè)無菌檢驗的培養(yǎng)基。其成分包括多價蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖和磷酸二氫鉀,這些成分共同為微生物提供了適宜的生長環(huán)境。配方與制備酸性肉湯的典型配方如下(每升):多價蛋白胨:5.0g酵母浸粉:5.0g葡萄糖:5.0g磷酸二氫鉀:5.0gpH值:5.0±0.2(25℃)制備方法為:稱取20.0g培養(yǎng)基干粉,加入1000ml蒸餾水中,加熱煮沸溶解,121℃高壓滅菌15分鐘,備用。注意勿過分加熱。檢驗原理多價蛋白胨和酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發(fā)酵的糖類;磷酸二氫鉀為緩沖劑;較低的pH適合在酸性中生存的微生物生長。應(yīng)用酸性肉湯主要用于酸性罐頭食品的商業(yè)無菌檢驗。在檢驗過程中,酸性肉湯可以幫助檢測食品中是否存在微生物生長,從而判斷食品是否達(dá)到商業(yè)無菌的要求。質(zhì)量控制按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置30±1℃需氧培養(yǎng)96小時:蠟樣芽孢桿菌(CMCC(B)63303):生長良好,濁度2。大腸埃希氏菌(ATCC 25922):生長良好,濁度2。枯草芽孢桿菌(ATCC 6633):生長良好,濁度2。注意事項稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統(tǒng)不適。李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基具有高靈敏度和特異性,能夠有效抑制其他非目標(biāo)菌的生長,減少誤判的可能性。
在微生物培養(yǎng)過程中,培養(yǎng)基的物理性質(zhì)直接影響實驗的操作和觀察效果。改良CCD瓊脂基礎(chǔ)在物理性質(zhì)上進(jìn)行了好的改進(jìn),使其更加適合實驗室操作和微生物生長。例如,改良后的瓊脂基礎(chǔ)具有更好的凝固性和穩(wěn)定性,能夠在較寬的溫度范圍內(nèi)保持固體狀態(tài),從而為微生物提供穩(wěn)定的生長平臺。同時,其透明度的提高使得觀察微生物的生長情況變得更加直觀和方便。此外,改良CCD瓊脂基礎(chǔ)還具有良好的可操作性,易于分裝和滅菌,減少了實驗準(zhǔn)備工作的時間和精力。這些物理性質(zhì)的改進(jìn)不僅提升了實驗的便捷性,還提高了實驗的整體效率。乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基的主要成分包括蛋白胨、乳糖、牛膽鹽和溴甲酚紫。蛋白胨提供碳源和氮源,支持細(xì)菌生長。2216E瓊脂培養(yǎng)皿
玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基的配方優(yōu)化,使其在制備和使用過程中操作簡便,且保存條件寬松(2-8℃避光保存)。25%甘油硝酸鹽瓊脂培養(yǎng)皿
溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基:微生物檢測的高效工具溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基(Bromocresol Purple Glucose Peptone Water Broth,簡稱BGBM)是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)領(lǐng)域的培養(yǎng)基,特別適用于壓力蒸汽消毒過程監(jiān)測指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養(yǎng)及消毒效果測定。制備方法:稱取15.0g培養(yǎng)基干粉,加入1000ml蒸餾水或去離子水中。加熱攪拌至完全溶解。分裝試管,115℃高壓滅菌30分鐘,備用。檢驗原理蛋白胨提供氮源、碳源、維生素和生長因子;葡萄糖是可發(fā)酵糖類;溴甲酚紫作為pH指示劑,通過顏色變化反映培養(yǎng)基中pH的變化。應(yīng)用BGBM培養(yǎng)基主要用于:壓力蒸汽消毒過程監(jiān)測指示菌(嗜熱脂肪桿菌芽孢)的培養(yǎng)及消毒效果測定。牛奶中抗生物質(zhì)生物抑制法快速檢測試劑盒的研發(fā)研究。質(zhì)量控制按標(biāo)簽用法制備培養(yǎng)基,接種以下質(zhì)控菌株,放置56±1℃需氧培養(yǎng)48小時:嗜熱脂肪桿菌芽孢(Bacillus stearothermophilus):生長良好。注意事項制備時需確保培養(yǎng)基完全溶解,避免結(jié)塊。滅菌后需冷卻至室溫后使用,以避免高溫對營養(yǎng)成分的破壞。使用時需注意無菌操作,避免污染。BGBM培養(yǎng)基因其營養(yǎng)豐富、制備方便和應(yīng)用廣,已成為微生物檢測中的重要工具。25%甘油硝酸鹽瓊脂培養(yǎng)皿