蛋白質組學技術：等電聚焦：等電聚焦（isoelectricfocusing，IEF）是一種利用有pH梯度的介質分離等電點不同的蛋白質的電泳技術。等電聚焦凝膠電泳依據(jù)蛋白質分子的靜電荷或等電點進行分離，等電聚焦中，蛋白質分子在含有載體兩性電解質形成的一個連續(xù)而穩(wěn)定的線性pH梯度中電泳。載體兩性電解質是脂肪族多氨基多羧酸，在電場中形成正極為酸性，負極為堿性的連續(xù)的pH梯度。蛋白質分子在偏離其等電點的pH條件下帶有電荷，因此可以在電場中移動；當?shù)鞍踪|遷移至其等電點位置時，其靜電荷數(shù)為零，在電場中不再移動，據(jù)此將蛋白質分離。蛋白質組學相關技術目前在一小部分]應用中具有獨特優(yōu)勢。山東醫(yī)學蛋白質組學方法

蛋白質組學研究這樣做：蛋白質組與基因組相對應，也是一個整體的概念，隨著基因組學研究的不斷深入，蛋白質組學已逐漸成為研究熱點，對蛋白組學的研究可以使我們更容易接近生命的機理本質，但探究成千上萬的蛋白質特性也是一個重大的技術挑戰(zhàn)。蛋白質組（Proteome）指的是某一時刻或某一狀態(tài)基因組表達的所有相應的蛋白，即細胞、組織或機體全部蛋白質的存在及活動形式，其是一個動態(tài)概念，它是在組織、細胞的整體蛋白質水平上，探索蛋白質作用模式、功能機理、調節(jié)控制以及蛋白質群體內(nèi)的相互關系、從而獲得生命活動調控網(wǎng)絡的全方面而深入的認識，以揭示生命活動的基本規(guī)律。貴陽外泌體蛋白質組學服務蛋白質組的研究能為眾多種疾病機理的闡明及攻克提供理論根據(jù)和解決途徑。

蛋白質組研究內(nèi)容：1.蛋白質鑒定：可以利用一維電泳和二維電泳并結合Western等技術，利用蛋白質芯片和抗體芯片及免疫共沉淀等技術對蛋白質進行鑒定研究。2.翻譯后修飾：很多mRNA表達產(chǎn)生的蛋白質要經(jīng)歷翻譯后修飾如磷酸化，糖基化，酶原刺激等。翻譯后修飾是蛋白質調節(jié)功能的重要方式，因此對蛋白質翻譯后修飾的研究對闡明蛋白質的功能具有重要作用?；?受體結合分析?？梢岳没蚯贸头戳x技術分析基因表達產(chǎn)物-蛋白質的功能。另外對蛋白質表達出來后在細胞內(nèi)的定位研究也在一定程度上有助于蛋白質功能的了解。

蛋白質組(Proteome)的概念指由一個基因組(genome)，或一個細胞、組織表達的所有蛋白質(Protein).蛋白質組的概念與基因組的概念有許多差別，它隨著組織、甚至環(huán)境狀態(tài)的不同而改變.在轉錄時，一個基因可以多種mRNA形式剪接，并且，同一蛋白可能以許多形式進行翻譯后的修飾.故一個蛋白質組不是一個基因組的直接產(chǎn)物，蛋白質組中蛋白質的數(shù)目有時可以超過基因組的數(shù)目.蛋白質組學(Proteomics)處于早期“發(fā)育”狀態(tài)，這個領域的**否認它是單純的方法學，就像基因組學一樣，不是一個封閉的、概念化的穩(wěn)定的知識體系，而是一個領域.蛋白質組學集中于動態(tài)描述基因調節(jié)，對基因表達的蛋白質水平進行定量的測定，鑒定疾病、藥物對生命過程的影響，以及解釋基因表達調控的機制.作為一門科學。通過對正常個體及病理個體間的蛋白質組比較分析，我們可以找到某些“疾病特異性的蛋白質分子”。

常規(guī)蛋白質組學：Labelfree多肽組學：顧名思義，就是不使用任何標記方法，直接對肽段進行質譜鑒定和定性定量分析。實驗流程簡單，只需要對蛋白進行常規(guī)酶解和除鹽步驟即可上機。定量方式分為兩種：峰面積（Peakintensity）和峰計數(shù)（Spectralcount），常用的是峰面積。不過，由于質譜采集時只選取topN的母離子進行二級碎裂和MS2檢測，所以會丟失一些豐度較低的肽段信息，缺失值比較多。TMT/iTRAQ標記定量蛋白組學：TMT全稱是TandemMassTag，是經(jīng)典化學標記試劑，普遍用于差異表達蛋白質組分析研究中。該技術采用6重、10重或16重同位素標簽，與肽段的氨基發(fā)生共價結合反應，可實現(xiàn)同時對6個/10個/16個不同樣品中蛋白質的定性和定量分析。（目前16標鹿明生物可提供技術服務）。蛋白質組學包括蛋白質的表達水平。湖北4D定量蛋白質組學一般流程

蛋白質組學研究的首要任務是建立獲取和分析蛋白質的常規(guī)、可靠、有效的技術。山東醫(yī)學蛋白質組學方法

蛋白組學技術：蛋白質組學研究的首要任務是建立獲取和分析蛋白質的常規(guī)、可靠、有效的技術。為達到這一要求，就需要樣品準備、數(shù)據(jù)獲取標準化及自動化，也就是要有可重復的高通量的技術。蛋白質組學技術手段在不斷完善，其工作流程，包括蛋白質樣本的制備、分離、定量及鑒定。由雙向凝膠電泳、質譜技術、酵母雙雜交系統(tǒng)、蛋白質微陣列技術、能進行大規(guī)模數(shù)據(jù)處理的計算機系統(tǒng)和軟件、軟電離技術及生物信息學技術構成了蛋白質組學研究的主要技術體系。其中蛋白質組學技術中的質譜技術是現(xiàn)在比較常用的一種蛋白質鑒定技術。山東醫(yī)學蛋白質組學方法

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