蛋白組學研究怎么做？PRM:平行反應監(jiān)測(ParallelReactionMonitoring)是一種基于高分辨、高精度質(zhì)譜的離子監(jiān)視技術(shù)，能夠?qū)δ繕说鞍踪|(zhì)、目標肽段（如發(fā)生翻譯后修飾的肽段）進行選擇性檢測，從而實現(xiàn)對目標蛋白質(zhì)/肽段進行一定定量，因此也被稱之為基于液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的WesternBlot（LC-MSMSbasedWesternBlot,L-WB）。PRM技術(shù)基于Q-Orbitrap為表示的高分辨、高精度質(zhì)譜平臺，首先利用四級桿質(zhì)量分析器的選擇能力，用Q1選擇目標肽段的母離子，隨后在Collisioncell中對母離子進行碎裂，之后利用Orbitrap分析器在二級質(zhì)譜中檢測所選擇的母離子窗口內(nèi)的所有碎片信息。這樣即可對復雜樣本中的目標蛋白質(zhì)/肽段進行準確地特異性分析。蛋白質(zhì)組學研究的首要任務是建立獲取和分析蛋白質(zhì)的常規(guī)、可靠、有效的技術(shù)。四川DIA定量蛋白質(zhì)組學報價
蛋白質(zhì)組學在醫(yī)療和健康方面有什么應用？基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學是目前比較主流的高通量蛋白質(zhì)研究手段，當前在醫(yī)療健康方面的應用主要集中于基礎(chǔ)研究和轉(zhuǎn)化醫(yī)學。隨著質(zhì)譜、系統(tǒng)生物學、生物信息學等相關(guān)學科的發(fā)展，我認為今后我們會更多地在現(xiàn)實生活中見到蛋白質(zhì)組學相關(guān)的應用。如定量胰島素、鑒定血紅蛋白氨基酸突變（鐮刀形紅細胞癥）、糖化血紅蛋白比例測定等。從測試體量估計，應該遠小于1%的ELISA測試量。由于成本和通量等原因，蛋白質(zhì)組學技術(shù)并不如ELISA適合大量的日常分析。但對于一些分析有問題的項目，采用基于質(zhì)譜（或二維膠等手段）的蛋白質(zhì)組學有獨特的技術(shù)優(yōu)勢。另外，蛋白質(zhì)組學方法開發(fā)和驗證周期短，在中高級特殊應用（如極少使用的特殊蛋白指標臨床檢測、未知疾病研究和控制）中也有其獨特優(yōu)勢。四川DIA定量蛋白質(zhì)組學報價蛋白質(zhì)組學相關(guān)技術(shù)目前在一小部分]應用中具有獨特優(yōu)勢。
定量蛋白質(zhì)組學方法學介紹：iTRAQ：iTRAQ定量是目前定量蛋白質(zhì)組學應用比較普遍的技術(shù)，該技術(shù)的關(guān)鍵原理是多肽標記和定量，將多肽的含量轉(zhuǎn)化為114、115、116和117同位素的含量(或113、114、115、116、117、118、119和121的8標記)，從而簡化了定量的復雜性，然后通過多肽定量值回歸到蛋白的定量值，從而測定出不同樣本之間蛋白質(zhì)的差異。iTRAQ定量不依賴樣本，可檢測出較低豐度蛋白，胞漿蛋白、膜蛋白、胞外蛋白等，且定量準確，可同時對8個樣本進行分析，并可同時得出鑒定和定量的結(jié)果，特別適用于采用多種處理方式或來自多個處理時間的樣本的差異蛋白分析。
蛋白質(zhì)組學主要以全蛋白組（組織、細胞）、線粒體蛋白組、葉綠體蛋白組和外泌體蛋白組為研究對象，通過對蛋白組進行定性、定量、分子功能分析、通路互作分析和蛋白互作分析，揭示生物學功能、作用機制、疾病診斷的標志物以及預測蛋白的上、下游變化關(guān)系。蛋白質(zhì)組學可以克服核酸水平預測的不確定性、反映核酸翻譯后修飾情況。常用技術(shù)：非靶向蛋白組學：蛋白質(zhì)定性（膠條鑒定和溶液鑒定），高通量定量蛋白組（Labelfree、iTRAQ/TMT和DIA定量），多肽組學。蛋白質(zhì)組學技術(shù)有生物質(zhì)譜。
定量蛋白質(zhì)組學分析（QuantitativeProteomics）是對一個基因組表達的全部蛋白質(zhì)或一個復雜混合體系內(nèi)所有蛋白質(zhì)進行精確鑒定和定量?？捎糜诤Y選和尋找任何因素引起的樣本之間的差異表達蛋白，結(jié)合生物信息學揭示細胞生理病理等功能，同時也可對某些關(guān)鍵蛋白進行定性和定量分析。目前定量蛋白質(zhì)組學技術(shù)常見標記（Label）和非標記的（LabelFree）定量策略。定量蛋白質(zhì)組學技術(shù)常見的幾類主要包括：LabelFree定量蛋白組分析、SILAC與免疫共沉淀蛋白互作分析、MRM/PRM定量蛋白組學分析、SILAC/Dimethyl標記定量蛋白組分析、SWATH定量蛋白組學、TMT/iTRAQ/multinotch定量蛋白組學分析。通過對正常個體及病理個體間的蛋白質(zhì)組比較分析，我們可以找到某些“疾病特異性的蛋白質(zhì)分子”。廣州PRM靶向定量蛋白質(zhì)組學領(lǐng)域
蛋白質(zhì)組學技術(shù)的發(fā)展已經(jīng)成為現(xiàn)代的生物技術(shù)快速發(fā)展的重要支撐。四川DIA定量蛋白質(zhì)組學報價
定量蛋白質(zhì)組學技術(shù)：定量蛋白質(zhì)組學是蛋白質(zhì)組研究的重要內(nèi)容，通過對基因表達產(chǎn)物——蛋白質(zhì)的定量分析，以了解基因在不同的生理、病理和逆境條件下的表達情況。近年來，隨著非凝膠技術(shù)的發(fā)展，蛋白質(zhì)組學（“Shotgun”proteomics）技術(shù)，特別是多維蛋白質(zhì)鑒定（MultidimensionalProteinIdentification，MudPIT）已成為研究復雜生物樣本中大規(guī)模蛋白質(zhì)表達和定性和定量分析的強有力工具。蛋白質(zhì)組學在醫(yī)學的研究應用：蛋白質(zhì)組學是研究細胞、組織或生物體中蛋白質(zhì)組成、定位、變化及其相互作用規(guī)律的科學。四川DIA定量蛋白質(zhì)組學報價
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