特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高，數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好；操作簡便，省時省力；水溶性，不需要換液，尤其適合于懸浮細胞；無需放射性同位素和有機溶劑，對細胞毒性低；適合于高通量***篩選。2、MTT法：特點是靈敏度高、經(jīng)濟。三、應(yīng)用不同1、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、**藥敏試驗。2、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗*****篩選、細胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等?；瘜W(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).江蘇cck8的價格

7、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化。注意：如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話，可在加CCK之前更換新鮮培養(yǎng)基（除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的培養(yǎng)基），去掉***影響。當然***影響比較小的情況下，可以不更換培養(yǎng)基，直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。活力計算：保存條件：4℃避光保存一年有效，-20℃避光保存兩年有效。江蘇cck8實驗結(jié)果計算CCK-8用途：***篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、**藥敏試驗.

CKK-8原理

CellCountingKit，CCK-8試劑含有WST-8（化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽），是近年新開發(fā)的一種更新的水溶性四唑鹽檢測，原理與WST-1類似：在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-MethoxyPMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原成具有高度水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物（Formazan）。生成的甲臜物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比，用酶聯(lián)免疫分析儀測定其光吸收值可間接反映活細胞數(shù)量，在一定細胞數(shù)量范圍內(nèi)甲臜形成的量與細胞數(shù)成正比。

當使用標準96孔板時，貼壁細胞的**小接種量至少為1000 個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細胞時的靈敏度相對較低，因此推薦接種量不低于2500 個/孔(100μl培養(yǎng)基)。酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。

注意事項CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染，以免影響結(jié)果。CCK-8在0-5℃下能夠保存至少6個月，在-20℃下避光可以保存1年。當在培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)時，培養(yǎng)板**外一圈的孔**容易干燥揮發(fā)，由于體積不準確而增加誤差。一般情況下，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用。在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度即為空白對照。 若細胞培養(yǎng)時間較長，培養(yǎng)基顏色或 pH 發(fā)生變化，建議更換培養(yǎng)基后再加 CCK-8.

四、方法及步驟：實驗一：細胞增殖分析1、制備細胞懸液：細胞計數(shù)。2、接種到96孔板中：根據(jù)合適的鋪板細胞數(shù)（約1-2×104），每孔約100ul細胞懸液，同樣的樣本可做4-6個重復(fù)。3、37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)：細胞接種后貼壁大約需要培養(yǎng)4小時，如果不需要貼壁，這步可以省去。4、加入10ulCCK8：由于每孔加入CCK8量比較少，有可能因試劑沾在孔壁上而帶來誤差，建議將***頭浸入培養(yǎng)液中加入且在加完試劑后輕輕敲擊培養(yǎng)板以幫助混勻?；蛘咧苯优渲煤?0%CCK8的培養(yǎng)基（現(xiàn)用現(xiàn)配），以換液的形式加入。細胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響，比如低氧或者什么化學(xué)物品對細胞的影響上。上海同仁cck8

CCK-8 反復(fù)凍融會增加背景值，干擾實驗測定。江蘇cck8的價格

沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應(yīng)機理不一樣）。都說CCK8簡單點而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認真閱讀，里面很多細節(jié)的問題都有提到。而且說明書里提供的一些關(guān)于各種細胞的種板數(shù)都很有參考價值，因為那是反復(fù)驗證過的比較好數(shù)值。但無論如何，做這個試驗一定要摸條件。你就算再懶，這個懶不得，否則你都只是在做無用功。以下言論全部以細胞毒性試驗為前提，如果你做的是促進細胞生長的***的藥效實驗?zāi)蔷土懋攧e論了。江蘇cck8的價格