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來源: 發(fā)布時間:2022-01-25

CCK-8的用途1.細(xì)胞增殖測定:細(xì)胞增殖實驗在很多領(lǐng)域都會用到,比如**相關(guān)、損傷后修復(fù)等。2.***篩選:在測定一個***的毒性和安全有效濃度時,經(jīng)常會用到CCK-8。3.細(xì)胞毒性測定:這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響,比如在UV、低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上。4.**藥敏試驗:這個是用的比較廣的,我見過做**的團隊,買CCK-8都是一整箱,一整箱的買,比如果子老師所在的團隊,哈哈哈。5.微生物對細(xì)胞的毒性或增殖的實驗cck8試劑盒價格是多少?天津cck8

讀數(shù)前可在搖床上溫柔混勻,酶標(biāo)儀在 450nm 波長處檢測每孔的吸光度。

***率(%)= [(對照孔吸光度-實驗孔吸光度)/(對照孔吸光度-空白孔吸光度)]×100=IC50

注意事項

CCK8法檢測細(xì)胞生長情況基于的原理是脫氫酶催化的反應(yīng),如果實驗處理條件中存在還原劑的影響,應(yīng)事先去除。如果實驗條件中存在還原物質(zhì),需單獨測定還原物質(zhì)的空白吸光度。如果還原物質(zhì)的吸光度很小,可以忽略不計;但如果吸光度很大,則需要去除培養(yǎng)基,再用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞3次,然后再加入新的 100ul培養(yǎng)基和10ul CCK-8 溶液進(jìn)行檢測。 浙江cck8 說明書將她培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。

五、實驗注意事項:·若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內(nèi)測定,吸光度不會發(fā)生變化。·如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加CCK8之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉***影響。當(dāng)然***影響比較小的情況下,可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。·當(dāng)使用標(biāo)準(zhǔn)96孔板時,貼壁細(xì)胞的**小接種量至少為1,000個/孔(100μl培養(yǎng)基)。檢測白細(xì)胞時的靈敏度相對較低,因此推薦接種量不低于2,500個/孔(100μl培養(yǎng)基)。

1、種板數(shù):這個要查文獻(xiàn),看你所用細(xì)胞別人有無做過,把范圍大致找出。記住還要參考說明書,這個很重要。然后稀釋一系列濃度種板。首先你要觀察多長時間細(xì)胞可貼壁完全,一般貼壁生長24小時。然后還有在你的實驗時間內(nèi),不同細(xì)胞數(shù)下孔內(nèi)生長情況。比如我擬定考察4天的時間,那么在4天內(nèi),細(xì)胞是剛好鋪滿還是堆積生長?因為每塊板都會設(shè)置對照孔,也就是含有細(xì)胞的培養(yǎng)基+CCK8,這個數(shù)值是板上的比較大數(shù)值,CCK8試驗比較好OD值在1.0附近,所以這個比較大數(shù)值比較好能控制在1.0左右。我的實驗經(jīng)驗是不要讓細(xì)胞長滿,一旦長滿了很難去判斷是否堆積生長了,對***能否順利進(jìn)入細(xì)胞有影響此為其一,其二生長不均勻易導(dǎo)致孔間OD值數(shù)據(jù)偏差大,而且OD值也很大。MTT與CCK8比色法的實驗細(xì)節(jié)和注意事項.

CCK8檢測細(xì)胞增殖/毒性的注意事項:1.加入CCK8溶液時不要在孔中生成氣泡,它們會影響OD值的讀數(shù);2.要設(shè)計空白對照組;3.對于大多數(shù)情況,加入CCK8溶液后,孵育2h左右就可以了;4.使用酶標(biāo)儀之前要提前開啟10min預(yù)熱;5.若連續(xù)多天檢測,必須保持所有條件一致。相關(guān)鏈接:CCK8的特性、保存方法以及與BrdU的區(qū)別CCK8空白對照,測定參比波長的設(shè)定以及OD值的合適范圍CCK8標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢測時間、終止反應(yīng)以及減少加樣誤差的方法外界因素(金屬/***/細(xì)菌/培養(yǎng)基/培養(yǎng)板)對CCK8測定的影響細(xì)胞因素(預(yù)培養(yǎng)/生長方式/狀態(tài)/細(xì)胞數(shù)/死細(xì)胞)對CCK8測定的影響細(xì)胞增殖到底用MTT還是CCK8呢?在CCK-8試劑盒中,**主要的化學(xué)藥品是WST-8.北京cck8 cc

CCK-8的英文全稱是Cell Counting Kit-8,也就是進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)的一個盒子。天津cck8

在細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育1-4小時,對于大多數(shù)情況孵育2小時左右就可以了。6.用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度(使用酶標(biāo)儀之前要提前開啟10min預(yù)熱)測定完成后,保存數(shù)據(jù)。7.連續(xù)五天檢測,每天保持一樣的時間點加入CCK-8溶液,在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育時間相同。注:若暫時不測定OD值,可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液,并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內(nèi)測定,吸光度不會發(fā)生變化。如果待測物質(zhì)有氧化性或還原性的話,可在加CCK8之前更換新鮮培養(yǎng)基(除去培養(yǎng)基,并用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的培養(yǎng)基),去掉***影響。當(dāng)然***影響比較小的情況下,可以不更換培養(yǎng)基,直接扣除培養(yǎng)基中加入***后的空白吸收即可。天津cck8