CCK-8盒子的選購還記得***次做CCK-8的實驗時研究生二年級的時候，當(dāng)時用的***個盒子是Sigma的，當(dāng)時的Sigma-Aldrich就是Sigma-Aldrich，還不是現(xiàn)在的Millipore-Sigma。那個盒子給了我莫大的鼓勵，因為在那之前做分子克隆一直都不是很順利。這個盒子是我的碩士老板從美國帶回來的，品質(zhì)有保證，***的結(jié)果也是很好的。后面在做CCK-8的實驗時，我們在有選擇的情況下都會買sigma，下圖2是sigma官網(wǎng)的截圖。其實也不貴，只是到貨時間太慢。細(xì)胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響，比如低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上。天津celltiter glo 與cck8

制作標(biāo)準(zhǔn)曲線1.先用細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)所制備的細(xì)胞懸液中的細(xì)胞數(shù)量，然后接種細(xì)胞。2.按比例(例如：1/2比例)依次用培養(yǎng)基等比稀釋成一個細(xì)胞濃度梯度，一般要做3-5個細(xì)胞濃度梯度，每組3-6個復(fù)孔。3.接種后培養(yǎng)2-4小時使細(xì)胞貼壁，然后加CCK-8試劑培養(yǎng)一定時間后測定O.D值，制作出一條以細(xì)胞數(shù)量為橫坐標(biāo)(X軸)，O.D值為縱坐標(biāo)(Y軸)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線可以測定出未知樣品的細(xì)胞數(shù)量(使用此標(biāo)準(zhǔn)曲線的前提條件是實驗的條件要一致，便于確定細(xì)胞的接種數(shù)量以及加入CCK-8后的培養(yǎng)時間)。江蘇cck8 od值CCK8的實驗步驟、實驗分組及檢測方法.

特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高，數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好；操作簡便，省時省力；水溶性，不需要換液，尤其適合于懸浮細(xì)胞；無需放射性同位素和有機溶劑，對細(xì)胞毒性低；適合于高通量***篩選。2、MTT法：特點是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。三、應(yīng)用不同1、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選、細(xì)胞增殖測定、細(xì)胞毒性測定、**藥敏試驗。2、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗*****篩選、細(xì)胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等。

讀數(shù)前可在搖床上溫柔混勻，酶標(biāo)儀在 450nm 波長處檢測每孔的吸光度。

***率（％）= [（對照孔吸光度-實驗孔吸光度）/（對照孔吸光度-空白孔吸光度）]×100=IC50

注意事項

CCK8法檢測細(xì)胞生長情況基于的原理是脫氫酶催化的反應(yīng)，如果實驗處理條件中存在還原劑的影響，應(yīng)事先去除。如果實驗條件中存在還原物質(zhì)，需單獨測定還原物質(zhì)的空白吸光度。如果還原物質(zhì)的吸光度很小，可以忽略不計；但如果吸光度很大，則需要去除培養(yǎng)基，再用培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞3次，然后再加入新的 100ul培養(yǎng)基和10ul CCK-8 溶液進(jìn)行檢測。 化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基).

實驗材料及試劑96孔板、CO2培養(yǎng)箱、酒精燈、移液***、酶標(biāo)儀等；細(xì)胞、CCK8等。實驗內(nèi)容取生長狀態(tài)良好的對數(shù)生長期細(xì)胞，每孔按4×103個接種至96孔板中，每組設(shè)置8個復(fù)孔，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細(xì)胞貼壁后轉(zhuǎn)染相應(yīng)質(zhì)粒后。繼續(xù)培養(yǎng)48h后，棄含藥培養(yǎng)基，每孔加入新鮮配制的含10ｕL的毒性檢測液CCK8，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)4h后，用酶標(biāo)儀測波長為450nm的OD值。實驗重復(fù)3次，取實驗結(jié)果的平均值作為**終實驗結(jié)果。按公式計算生長***率＝[(對照組OD－實驗組OD)/對照組OD]×**，以分組為橫坐標(biāo)，生長***率為縱坐標(biāo)，繪制細(xì)胞生長cck8試劑盒價格是多少?天津cck8檢測原理

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、***濃度的確定需要做一個時間梯度，鋪板和上述相同，只需把各個實驗組改成各個作用時間就可以了。至于說***濃度的確定，網(wǎng)上有很多確認(rèn)方法，個人建議以IC50值作為***濃度即可。計算方法，某園子里都有，就不在這里介紹了。

MTT作用之后，一定要小心吸走培養(yǎng)液，以免將孔內(nèi)的紫色結(jié)晶吸走。有條件的實驗室，這一步可以采用離心機將沉淀充分離心到孔底，防止被吸出。如果沒有這種類型的離心機，可以在測量吸光度的時候，將酶聯(lián)免疫的機器震蕩時間調(diào)制5分鐘，**起碼可以保證沉淀充分溶解。 天津celltiter glo 與cck8