胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要??！當然也要保證細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構建純化良好，質(zhì)粒間比例得當，并且對質(zhì)粒進行酶切驗證。3.0試劑進行轉(zhuǎn)染的每個個體間所檢測的生物標志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。DNA轉(zhuǎn)染試劑配制

Zeta Life轉(zhuǎn)染試劑 成功轉(zhuǎn)染THP-1 (人單核白血病細胞) 懸浮細胞                 ZETA LIFE                                             ZETA LIFE                                                              微信號                               gh_97714b427409

功能介紹                               美國 Zeta Life公司是國際無血清細胞培養(yǎng)基 DMEM/F12主要完成人，有三十多年的胎牛血清、無血清細胞培養(yǎng)基生產(chǎn)經(jīng)驗； Zeta Life與美國加利福尼亞大學聯(lián)合開發(fā)全球細胞體內(nèi)可代謝轉(zhuǎn)染試劑，此技術成為全球細胞轉(zhuǎn)染優(yōu)先技術之一。                                                                                                      7月17日                 收錄于話題Zeta Life Advanced DNA RNA，AD600150轉(zhuǎn)染試劑；

成功轉(zhuǎn)染THP-1 (人單核白血病細胞) 懸浮細胞；

來自廣州中山大學附屬**醫(yī)院客戶的喜訊;

出色的細胞轉(zhuǎn)染結(jié)果與您分享;

24小時熒光圖片:

zeta life，Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑信息如下 慢病毒轉(zhuǎn)染試劑分裝用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞，左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA，右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。

4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP），轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。

LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程

細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作，通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。

.在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。

2.高靈活應用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。

3.細胞毒性低，結(jié)果相關性好，確保所觀察到的細胞效應是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導。

4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標準實驗方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 所見即所得——分享兩款超好用的轉(zhuǎn)染試劑,拯救你的細胞.

簡介：X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系。優(yōu)勢：

1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。

2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。

3.使用細胞毒性低的試劑，結(jié)果相關性好。

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP，導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡)。 .0試劑及RNAi復合物非常容易獲得：只需簡單地混合，并進行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。上海pei轉(zhuǎn)染試劑推薦

將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.DNA轉(zhuǎn)染試劑配制

轉(zhuǎn)染 48 小時后，使用尼康熒光顯微鏡 GFP 熒光進行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293； B：293fectin；C：Xfect 和 D：Fugene 6.  帶有 6xHis 標記的 GFP 熒光蛋白使用 Ni-NTA 親和柱技術實現(xiàn)分離。5 微升洗脫液載入 SDS-PAGE 凝膠電泳分離并進行 Coomassie 亮藍染色（右上圖 E），道 1 為 LipoD293293、道 2 為標準蛋白分子、道 3 為 Xfect、道 4 為 293fectin 和道 5 為 Fugene 6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進一步定量（見右下圖 F）。產(chǎn)生慢***的比較

通過 LipoD293? 試劑（升級版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個 cDNAs 共轉(zhuǎn)染進 293T 細胞。一個 GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。 DNA轉(zhuǎn)染試劑配制