確定希望輸送的運載物
(如DNA、RNA或蛋白質(zhì))
根據(jù)不同實驗類型,我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內(nèi)部,包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。
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希望轉(zhuǎn)染的細胞類型
轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞。
連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。 一般會同時設(shè)置對照,對RNAi結(jié)果進行比較。RNAi的成功取決于正確導(dǎo)入合適量的siRNA,達到比較大預(yù)期反應(yīng)。上海脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑價格
將膠質(zhì)瘤干細胞(3×105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進膠質(zhì)瘤干細胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,與原代小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導(dǎo)的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上調(diào)。懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑對照RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。
用 LipoD293? 體外 DNA 轉(zhuǎn)染試劑(Ver. II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品 Invitrogen 公司的 293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染 pEGFP-C1 質(zhì)粒到 HEK293 細胞中。轉(zhuǎn)染 24 小時后,細胞的尼康 Eclipse 熒光顯微鏡 DIC 成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。
對懸浮 HEK293F 產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/
30 毫升的 293F 細胞分別使用 LipoD293?試劑、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉(zhuǎn)染步驟將 pEGFP-6xHis 質(zhì)粒導(dǎo)入細胞表達,用量為 LipoD293? 試劑,20 微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用 30 微克質(zhì)粒 DNA。
轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具收錄于話題轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細胞中的過程,是細胞生物學、基因表達和基因***實驗中的關(guān)鍵步驟。不同的實驗方案和技術(shù)差別巨大,我們可以利用化學方法或脂質(zhì)體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細胞內(nèi),也可以使用電穿孔方法利用電流在細胞膜上開孔,使核酸進入細胞內(nèi)。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染。如何選擇**受信賴的可用于轉(zhuǎn)染的系統(tǒng),是實驗結(jié)果的重要影響因素。該試劑可將RNA導(dǎo)入多種細胞系,包括原代細胞和懸浮細胞.
Polysciences的高純度單體和聚合物產(chǎn)品在醫(yī)療器械中有許多應(yīng)用,并不斷開發(fā)和增強其性能。公司秉承為應(yīng)用而研發(fā),目前已擁有超過3000種產(chǎn)品。質(zhì)量保證1、遵循ISO 13485質(zhì)量管理認證
獲得美國FDA有效注冊
遵守良好生產(chǎn)規(guī)范(cGMP)
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特種化學行業(yè)公認的代言人功能強大、經(jīng)濟實惠、安全可靠
這么好的轉(zhuǎn)染試劑,難道你不心動嗎?
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經(jīng)過幾年的不懈努力,華雅思創(chuàng)生物提供的產(chǎn)品覆蓋免疫細胞***、干細胞***、干細胞基礎(chǔ)研究、動物模型疾病研究、基因檢測(NGS)、試管嬰兒、產(chǎn)品質(zhì)控等諸多熱點科學研究領(lǐng)域。如今,華雅思創(chuàng)已經(jīng)成為Lifeline、Takara、 連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理.懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑對照
國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?上海脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑價格
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性.上海脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑價格