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非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑原理

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-03-22

原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命(即它們是有限細(xì)胞系),且隨著傳代的進(jìn)行,具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō),這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。給你選擇CycloFect轉(zhuǎn)染試劑的五大理由!非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑原理

轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具收錄于話(huà)題轉(zhuǎn)染是將核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞中的過(guò)程,是細(xì)胞生物學(xué)、基因表達(dá)和基因***實(shí)驗(yàn)中的關(guān)鍵步驟。不同的實(shí)驗(yàn)方案和技術(shù)差別巨大,我們可以利用化學(xué)方法或脂質(zhì)體將核酸(DNA或RNA)高效輸送到細(xì)胞內(nèi),也可以使用電穿孔方法利用電流在細(xì)胞膜上開(kāi)孔,使核酸進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,適用于各種細(xì)胞類(lèi)型的轉(zhuǎn)染。如何選擇**受信賴(lài)的可用于轉(zhuǎn)染的系統(tǒng),是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的重要影響因素。慢病毒轉(zhuǎn)染試劑作用包括**常見(jiàn)的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。

對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒光素酶蛋白的cDNA(phRL-CMV)和綠色熒光蛋白GFP的cDNA按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟分別轉(zhuǎn)染到CHO細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染24小時(shí)后,熒光素酶的活性使用Beckman公司的化學(xué)發(fā)光監(jiān)測(cè)器測(cè)定;GFP陽(yáng)性細(xì)胞率使用BD公司的FACS檢測(cè)。左圖:LipoD293試劑(升級(jí)版)和Lipofecatmine2000(L2K),TransIT以及Fugene6的價(jià)格比較(美元/1000微升)。所有的價(jià)格是從生產(chǎn)制造商的網(wǎng)站上收集對(duì)CHO細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較右圖:使用以上轉(zhuǎn)染試劑將編碼熒

siRNA,加入HiperFect轉(zhuǎn)染試劑混勻并溫育5-10min,將混合物逐滴加入培養(yǎng)皿中混勻,培養(yǎng)細(xì)胞直到適當(dāng)?shù)臅r(shí)候檢測(cè)基因沉默效果。這個(gè)快速操作流程簡(jiǎn)便到還可以用于“反向轉(zhuǎn)染”,方便至極。當(dāng)然,習(xí)慣用傳統(tǒng)方法也是可以的,只要培養(yǎng)到細(xì)胞匯合度50%—80%進(jìn)行轉(zhuǎn)染就可以了。沒(méi)有禁用血清、***的困擾,HiperFect真的是將實(shí)驗(yàn)簡(jiǎn)化到了***。適合多種細(xì)胞類(lèi)型:HiPerfect可高效轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞類(lèi)型,包括HeLa、HeLaS3、HEK293、NIH/3T3、Huh-7、HepG2、MCF-7、HUVEC和NHLF等。對(duì)于原代細(xì)胞,產(chǎn)品手冊(cè)中列出了轉(zhuǎn)染原代HUVEC、成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞、上皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞的操作步驟,貼心用于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑,還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.

確定希望輸送的運(yùn)載物

(如DNA、RNA或蛋白質(zhì))

根據(jù)不同實(shí)驗(yàn)類(lèi)型,我們可能需要將不同的運(yùn)載物輸送到細(xì)胞內(nèi)部,包括**常見(jiàn)的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。

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希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型

轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型可簡(jiǎn)單分為兩大類(lèi),連續(xù)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。

連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能,通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類(lèi)細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力,它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。 但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。上海腺病毒轉(zhuǎn)染試劑選購(gòu)

正確的了解您希望輸送的運(yùn)載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑原理

轉(zhuǎn)染試劑-Advanced DNA RNA                 西安中團(tuán)生物                                                                                                                                                                                              中團(tuán)生物                                             中團(tuán)生物                                                              微信號(hào)                               zhongtuanshengwu

功能介紹                               西安中團(tuán)生物科技有限公司坐落于陜西省西安市碑林區(qū),是專(zhuān)門(mén)從事分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、微生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)試劑及儀器研究、銷(xiāo)售的高科技企業(yè)。中團(tuán)生物與國(guó)內(nèi)外大學(xué)、中科院及醫(yī)科院等科研機(jī)構(gòu)建立了良好的合作關(guān)系。                                                                                                      4月30日                 收錄于話(huà)題Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑(AD600025、AD600050、AD600075、AD600150、AD600500、AD601000)

貨號(hào):AD600025、AD600050、AD600075、AD600150、AD600500、AD601000

  Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑

適用貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞  細(xì)胞毒性低

                              適用細(xì)胞廣                      高效轉(zhuǎn)染效率

                                       產(chǎn)品名稱(chēng)貨號(hào)規(guī)格數(shù)量報(bào)價(jià)Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑AD6000250.25ML1詢(xún)價(jià)Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑AD6000500.5ml1詢(xún)價(jià)Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑AD6000750.75ml1詢(xún)價(jià)Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑AD6001501.5ML1詢(xún)價(jià)Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑AD6005005ML1詢(xún)價(jià)Advanced DNA RNA轉(zhuǎn)染試劑AD60100010ML1詢(xún)價(jià) 非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑原理