細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化riboFECT CP轉(zhuǎn)染試劑應用案例,可轉(zhuǎn)染各種細胞,靠譜!動物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑配制
美國Polysciences公司是一家成立于1961年,致力于特殊技精細化學試劑、實驗室產(chǎn)品,單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應,所提供的產(chǎn)品服務于組織學(顯微技術)、生物技術、電子技術、護理及制藥工程等多個領域。起初為電子顯微鏡提供納米級樣本制備方案,幫助科學家揭示未知領域。隨后,開拓了在病理(組織研究)應用產(chǎn)品,使組織除了石蠟包埋外,還能夠包埋在塑料塊中;開發(fā)染料和染色劑,以實現(xiàn)更好的樣品觀測方式。與****合作,開發(fā)了用于診斷試劑盒應的聚合物微球。與美國國家**中心合作,開發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品,并用于紫杉醇的初步臨床試驗。繼而開發(fā)出超順磁珠,用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究。DNA轉(zhuǎn)染試劑原理驚艷登場!臨床級載體生產(chǎn)必備轉(zhuǎn)染試劑。
原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此,它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后,原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命(即它們是有限細胞系),且隨著傳代的進行,具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位,從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說,這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便,尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。
在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。3.細胞毒性低,結(jié)果相關性好,確保所觀察到的細胞效應是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。每孔培養(yǎng)體積均為100μL,細胞數(shù)目在105左右。
LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑 LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉(zhuǎn)染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基
1轉(zhuǎn)染效率高,適用于多種細胞系圖1. LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。
2細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。 CycloFect轉(zhuǎn)染試劑,你了解多少?上海體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑報價
轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞。動物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑配制
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。
4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4. 用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。
LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程
細胞毒性低圖2.LipoFectMax? ,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。 動物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑配制