十全十美難，十全九美卻可以通過選擇一款好的轉(zhuǎn)染試劑來實(shí)現(xiàn)。理想的轉(zhuǎn)染試劑包括要具有較高的轉(zhuǎn)染效率，細(xì)胞毒性低，操作簡單可重復(fù)，價(jià)格還要可愛?，F(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室用的是脂質(zhì)體系列轉(zhuǎn)染試劑，但脂質(zhì)體對細(xì)胞毒性大，某些細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率還很低，看單孔的價(jià)格也很不美好。尤其是在轉(zhuǎn)染RNA方面，脂質(zhì)體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉(zhuǎn)染試劑領(lǐng)域的研發(fā)思路與其核酸純化領(lǐng)域的精而專，全而深不同。在轉(zhuǎn)染試劑的研發(fā)過程中，另辟蹊徑，研精致思進(jìn)而做到小而美的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品。從市面上眾多轉(zhuǎn)染試劑的一片紅海中，神奇的開辟出一塊藍(lán)海，為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉(zhuǎn)染試劑私房菜。將20μL轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入孔中的細(xì)胞懸液中，前后移動(dòng)培養(yǎng)皿，混合均勻；上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑公司

轉(zhuǎn)染是將外源核酸導(dǎo)入真核細(xì)胞的過程，是細(xì)胞和分子生物學(xué)研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物領(lǐng)域的科研黨們繞不開的話題。然而常常聽到的抱怨是"轉(zhuǎn)染效率太低""轉(zhuǎn)染完細(xì)胞全漂了""轉(zhuǎn)染后忘記給細(xì)胞換液了"，真所謂辛辛苦苦實(shí)驗(yàn)N多回，一夜回到解放前……眾所周知，影響轉(zhuǎn)染成功的因素非常多，包括細(xì)胞質(zhì)量、核酸質(zhì)量、微生物污染、轉(zhuǎn)染試劑等。各種細(xì)胞使用的轉(zhuǎn)染條件都可能不同，現(xiàn)實(shí)中也并沒有一種放之四海而皆準(zhǔn)的方案。上海核酸轉(zhuǎn)染試劑作用轉(zhuǎn)染試劑快速查找工具上線!

羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性，在超過350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證，尤其針對難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較，X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證還有一個(gè)好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷哦快去搶購吧~

.在多種不同類型細(xì)胞中基因敲除效率超過90%。

2.高靈活應(yīng)用， 同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實(shí)驗(yàn)。

3.細(xì)胞毒性低，結(jié)果相關(guān)性好，確保所觀察到的細(xì)胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。

4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。

圖4. X-tremeGENE siRNA Transfection Reagent用于4種細(xì)胞系的HPRT基因沉默實(shí)驗(yàn)。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程，或標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)方法，將100nM HPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細(xì)胞。 通過LightCycler® h-HPRT Housekeeping Gene Set的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細(xì)胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。 采用Lipofectamine RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí)，實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細(xì)胞，左圖轉(zhuǎn)染GFP cDNA，右圖共轉(zhuǎn)染GFP CDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。

4適用于神經(jīng)細(xì)胞的轉(zhuǎn)染圖4.  用LipoFectMax? 和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白（GFP），轉(zhuǎn)染24小時(shí)后觀察轉(zhuǎn)染效果，LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染效率（左圖）比LipoFectamine®2000（右圖）高5倍。

LipoFectMax? 轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程

細(xì)胞毒性低圖2.LipoFectMax? ，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細(xì)胞進(jìn)行轉(zhuǎn)染操作，通過計(jì)算轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞存活率比較細(xì)胞毒性。 RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進(jìn)、高效的siRNA輸送解決方案。上海昆蟲細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑哪種好

各種轉(zhuǎn)染試劑成分分析.上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑公司

胞因素用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要?。‘?dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好，沒有細(xì)微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實(shí)驗(yàn)中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當(dāng)，并且對質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證。上海國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑公司