原代細(xì)胞直接分離自組織并在適當(dāng)條件下增殖。因此，它們的形態(tài)學(xué)和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對(duì)于連續(xù)細(xì)胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過(guò)***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細(xì)胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細(xì)胞系具有有限的壽命（即它們是有限細(xì)胞系），且隨著傳代的進(jìn)行，具有比較高的生長(zhǎng)能力的細(xì)胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細(xì)胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對(duì)來(lái)說(shuō)，這一類(lèi)細(xì)胞要比原代細(xì)胞使用起來(lái)更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。 隨后分離血清并檢測(cè)FVII蛋白的水平（Biophen 顯色檢測(cè)）。上海polviet轉(zhuǎn)染試劑配方

簡(jiǎn)介：X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無(wú)動(dòng)物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類(lèi)真核細(xì)胞(包括昆蟲(chóng)細(xì)胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細(xì)胞系。優(yōu)勢(shì)：

1.簡(jiǎn)單易用的多組分混合試劑，無(wú)動(dòng)物源性成分，室溫穩(wěn)定。

2.高轉(zhuǎn)染效率，對(duì)于原代細(xì)胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細(xì)胞系有高轉(zhuǎn)染效率。

3.使用細(xì)胞毒性低的試劑，結(jié)果相關(guān)性好。

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過(guò)X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實(shí)驗(yàn)后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細(xì)胞毒性遠(yuǎn)高于X-tremeGENE HP，導(dǎo)致存活細(xì)胞量減少(圖片來(lái)源于網(wǎng)絡(luò))。 上海國(guó)產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑配制誰(shuí)來(lái)拯救我的細(xì)胞之QIAGEN轉(zhuǎn)染試劑.

在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí)，需考慮您希望輸送的運(yùn)載物（DNA、RNA或蛋白質(zhì)）以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型。您可通過(guò)下表選擇各類(lèi)陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。

我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇，讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類(lèi)型的細(xì)胞無(wú)毒性作用—您之所以能看到結(jié)果，是因?yàn)楹怂岽嬖冢皇且驗(yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型提供了快速、簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案

連續(xù)細(xì)胞系 具有無(wú)限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類(lèi)細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力，它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。

產(chǎn)生慢***的比較

通過(guò) LipoD293? 試劑（升級(jí)版）和 Lipofectamine LTX（LTX）試劑將三個(gè) cDNAs 共轉(zhuǎn)染進(jìn) 293T 細(xì)胞。一個(gè) GFP 載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來(lái)測(cè)定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1 微升（上圖）和 10 微升（下圖）。

5 天后，細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來(lái)測(cè)定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化，分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 包括**常見(jiàn)的DNA，用于基因編輯的siRNA，能夠更快表達(dá)蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。

圖2.采用LipofectamineRNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染A549細(xì)胞時(shí)，實(shí)現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細(xì)胞毒性。試驗(yàn)采用的LipofectamineRNAiMAX試劑劑量范圍為0.1μL-1.0μL之間，在維持優(yōu)良的細(xì)胞活力的同時(shí)，實(shí)現(xiàn)了p53基因表達(dá)水平的有效敲低.功能多樣簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案，易于針對(duì)***的細(xì)胞系進(jìn)行優(yōu)化Invivofectamine?3.0Reagent突破性的體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑Invivofectamine3.0試劑是一種突破性的體內(nèi)RNAi輸送試劑，可大幅改善實(shí)驗(yàn)性能，使用微克級(jí)的siRNA即可達(dá)到高達(dá)85%的敲低效果。將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.慢病毒轉(zhuǎn)染試劑多少錢(qián)

MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.上海polviet轉(zhuǎn)染試劑配方

對(duì) HepG2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染效率的比較

右圖：使用以上轉(zhuǎn)染試劑將 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生產(chǎn)商的提供的轉(zhuǎn)染步驟轉(zhuǎn)染到 HepG2 細(xì)胞（在膠原預(yù)處理的培養(yǎng)皿中培養(yǎng)）。在轉(zhuǎn)染 48 小時(shí)之后，用流式細(xì)胞儀檢測(cè) GFP 陽(yáng)性細(xì)胞（%）和熒光強(qiáng)度。

左圖：血清和***存在的條件下能提高 LipoD293 試劑（升級(jí)版）對(duì)在 HepG2 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率。通過(guò)三種不同的條件下轉(zhuǎn)染 HepG2 細(xì)胞（生長(zhǎng)在膠原處理的培養(yǎng)皿上）---無(wú)血清和***，10% 血清和***的存在，轉(zhuǎn)染 5 小時(shí)后換液和不換液。

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