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在難轉染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉染效率的比較
圖片由芝加哥大學肺和重癥護理系的 Nickolai Dulin 博士友情提供
制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用 LipoD293?試劑(左圖)和 Lipofecatmine 2000(L2K, 右圖)分別將 GFP 的 cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉染操作步轉染至該細胞。轉染 24 小時后,用尼康 Eclipse 2000 熒光顯微鏡檢測 GFP 熒光,以此來評價轉染效率。
對難轉染細胞 LNCap 細胞轉染效率的比較
圖片由羅斯威爾公園**研究所(Roswell Cancer Institute)的 Lyn Gao 博士友情提供
3.0試劑進行轉染的每個個體間所檢測的生物標志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。DNA轉染試劑推薦
產(chǎn)生慢***的比較
通過 LipoD293? 試劑(升級版)和 Lipofectamine LTX(LTX)試劑將三個 cDNAs 共轉染進 293T 細胞。一個 GFP 載體,pHR-SIN-cppt-CMVEWP 被用來測定慢***的滴度。在 24 孔板中每孔加入 1x10^5 293T 細胞,其次是分別添加不同量的慢定都上清液,1 微升(上圖)和 10 微升(下圖)。
5 天后,細胞通過流式細胞儀檢測。右上角的數(shù)字表明轉導的細胞的百分比來測定慢***的滴度。由 LipoD293? and LTX 產(chǎn)生的慢***的滴度被量化,分為是 8x10^6 和 3x10^6 tu/ml 。 上海Opti-MEM轉染試劑盒誰來拯救我的細胞之QIAGEN轉染試劑.
在選擇轉染方法時,需考慮您希望輸送的運載物(DNA、RNA或蛋白質(zhì))以及您希望轉染的細胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質(zhì)體轉染試劑和Neon轉染系統(tǒng)。
我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對自己的結果更加自信.***的輸送效果—可轉染多種類型的細胞無毒性作用—您之所以能看到結果,是因為核酸存在,而不是因為試劑需要的優(yōu)化工作更少—針對大多數(shù)細胞類型提供了快速、簡便的實驗方案
連續(xù)細胞系 具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。
將膠質(zhì)瘤干細胞(3×105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉染進膠質(zhì)瘤干細胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,與原代小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉染效率。結果發(fā)現(xiàn)轉染TREM-1siRNA后******了OGD誘導的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上調(diào)。用于siRNA的轉染試劑,還有通用型轉染試劑Lipofectamine?.
細胞轉染過程X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。將20μL轉染復合物加入孔中的細胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,混合均勻;上海sirna轉染試劑梯度
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Lipofectamine RNAiMAX轉染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。目前尚無其他siRNA轉染試劑能夠在***的細胞系中(包括常見細胞類型、干細胞、原代細胞以及歷來難轉染的細胞類型)提供如此簡便、高效的siRNA輸送效果。
高效
可在低siRNA濃度下獲得優(yōu)良的轉染效果
相對于其他的siRNA轉染試劑,Lipofectamine RNAiMAX 轉染試劑可以獲得更佳的基因***效果。同在10 nM和1 nM p53 siRNA下,Lipofectamine RNAiMAX轉染試劑實現(xiàn)了更高的有效***細胞/未轉染細胞比率,超過其他RNAi試劑。 DNA轉染試劑推薦