羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性，在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證，尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較，X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENEHP試劑遠優(yōu)于其他試劑超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進行8折促銷哦快去搶購吧~試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。動物轉(zhuǎn)染試劑分裝

基于陽離子聚合物的轉(zhuǎn)染試劑，帶正電的聚合物與核酸帶負電的磷酸基團形成帶正電的復合物后與細胞表面帶負電的蛋白多糖相互作用，并通過內(nèi)吞作用進入細胞。其又分為樹枝狀陽離子聚合物和線性陽離子聚合物兩類，前者細胞毒性相對較大，后者細胞毒性較小，但其轉(zhuǎn)染效率都高于脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染，適用也較為廣范。以上單一成分的轉(zhuǎn)染試劑或聚焦于提高效率或著重于降低細胞毒性，可謂魚和熊掌不可兼得也。新一代轉(zhuǎn)染試劑，不局限于單一成分，混合了不同 配方的脂類（非脂質(zhì)體）、加上蛋白質(zhì)組分、以及各種的 成分，兼具了轉(zhuǎn)染效率高和細胞毒性小的優(yōu)勢，且操作更加簡單，易于高通量。上海動物體內(nèi)轉(zhuǎn)染試劑價格每孔培養(yǎng)體積均為100μL，細胞數(shù)目在105左右。

圖3. 用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得：只需簡單地混合，并進行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。

高效、靶向敲低

在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果

圖4. 使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物，以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射，**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低（使用TaqMan分析對敲低進行評估）。

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物，粘附到細胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時間，細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產(chǎn)生影響，因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長，且重復性不佳。基于脂質(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導入細胞膜內(nèi)。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導入細胞。此方法操作簡單，重復性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細胞毒性，可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。國產(chǎn)轉(zhuǎn)染試劑制作原理是什么?

簡介：X-tremeGENE HP DNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系。優(yōu)勢：

1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。

2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。

3.使用細胞毒性低的試劑，結果相關性好。

圖2. X-tremeGENE HP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENE HP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENE HP，導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡)。 將20μL轉(zhuǎn)染復合物加入孔中的細胞懸液中，前后移動培養(yǎng)皿，混合均勻；DNA轉(zhuǎn)染試劑

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用于轉(zhuǎn)染的Invivofectamine 3.0試劑及RNAi復合物非常容易獲得：只需簡單地混合，并進行孵育（30min）、稀釋、及注射即可。

靶向敲低

在實驗靶標中可觀察到高達85%的敲低效果

使用Invivofectamine 3.0試劑可在單次靜脈注射后即可在肝臟中實現(xiàn)靶向敲低。Invivofectamine 3.0試劑與靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA組成的復合物，以每千克小鼠體重1 mg(mg/kg)的注射量進行注射，**終靶向mRNA水平出現(xiàn)了高達85%的敲低（使用TaqMan分析對敲低進行評估）。 動物轉(zhuǎn)染試劑分裝