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LNCap細胞的培養(yǎng)和傳代嚴格由ATCC建議的操作步驟進行,與pBabe-hygro-SSeCKs(1.5ug)和pEGFP-N3(1:1,共1.0微克)共轉(zhuǎn)染(6孔板中每孔的量),并用LipoD293?試劑(左圖)和FugeneHD(右圖)分別按照生產(chǎn)制造商的科學實驗步驟進行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下,HepG2和SaoS-2細胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達到95%的細胞融合。轉(zhuǎn)染48小時后,分別通過Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測效率。賽默飛提供了多種高質(zhì)量的轉(zhuǎn)染產(chǎn)品,適用于各種細胞類型的轉(zhuǎn)染。上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑供應商
用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。上海動物轉(zhuǎn)染試劑類型一般會同時設置對照,對RNAi結(jié)果進行比較。RNAi的成功取決于正確導入合適量的siRNA,達到比較大預期反應。
細胞轉(zhuǎn)染過程X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.
細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化將20μL轉(zhuǎn)染復合物加入孔中的細胞懸液中,前后移動培養(yǎng)皿,混合均勻;
將膠質(zhì)瘤干細胞(3105)接種至6孔板中,然后使用riboFECTCP轉(zhuǎn)染試劑分別將5μl20μMBMPER、CXCL10和HOXA9siRNA轉(zhuǎn)染進膠質(zhì)瘤干細胞(DP3321、DP7857)中,48h后,qRT-PCR和westernblots檢測siRNA***效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)DP3321中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為46.32%、49.71%和43.64%,DP7857中的siBMPER、siCXCL10和siHOXA9表達水平分別為53.21%、47.46%和46.31%。將1.25μlTREM-1siRNA(20μm)和3μlriboFECTTMCPRegent在30μlriboFECTTMCPBuffer中混合以產(chǎn)生轉(zhuǎn)染混合物。然后將混合物加入DMEM(siRNA濃度:50nM)中,與原代小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)48h。RT-PCR和westernblot分析檢測轉(zhuǎn)染效率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染TREM-1siRNA后******了OGD誘導的TREM-1、p-SYK、SYK、CARD9、p-p65和NLRP3的上調(diào)。RNAiMAX轉(zhuǎn)染試劑是先進、高效的siRNA輸送解決方案。上海非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑多少錢
轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑供應商
細胞轉(zhuǎn)染過程:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑是脂質(zhì)和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經(jīng)0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉(zhuǎn)染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關(guān)數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉(zhuǎn)染試劑進行簡單稀釋,再與質(zhì)粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作。上海懸浮細胞轉(zhuǎn)染試劑供應商
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