LNCap細(xì)胞的培養(yǎng)和傳代嚴(yán)格由ATCC建議的操作步驟進(jìn)行，與pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共轉(zhuǎn)染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293?試劑（左圖）和FugeneHD（右圖）分別按照生產(chǎn)制造商的科學(xué)實(shí)驗(yàn)步驟進(jìn)行轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染24小時(shí)后，用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測(cè)GFP熒光，以此來(lái)評(píng)價(jià)轉(zhuǎn)染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2細(xì)胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分別轉(zhuǎn)染達(dá)到95%的細(xì)胞融合。轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，分別通過(guò)Zeiss510激光共聚焦顯微鏡和β-半乳糖苷酶染色試劑盒檢測(cè)效率。質(zhì)粒細(xì)胞轉(zhuǎn)染步驟是什么?動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒

轉(zhuǎn)染48小時(shí)后，使用尼康熒光顯微鏡GFP熒光進(jìn)行成像（左側(cè)四幅圖），A：LipoD293；B：293fectin；C：Xfect和D：Fugene6.帶有6xHis標(biāo)記的GFP熒光蛋白使用Ni-NTA親和柱技術(shù)實(shí)現(xiàn)分離。5微升洗脫液載入SDS-PAGE凝膠電泳分離并進(jìn)行Coomassie亮藍(lán)染色（右上圖E），道1為L(zhǎng)ipoD293293、道2為標(biāo)準(zhǔn)蛋白分子、道3為Xfect、道4為293fectin和道5為Fugene6。這四種轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)生蛋白質(zhì)的效率被進(jìn)一步定量（見(jiàn)右下圖F）。產(chǎn)生慢***的比較通過(guò)LipoD293?試劑（升級(jí)版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個(gè)cDNAs共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞。一個(gè)GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來(lái)測(cè)定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1微升（上圖）和10微升（下圖）。DNA轉(zhuǎn)染試劑公司MagTransf 磁轉(zhuǎn)染試劑實(shí)現(xiàn)高效轉(zhuǎn)染解析.

在選擇轉(zhuǎn)染方法時(shí)，需考慮您希望輸送的運(yùn)載物（DNA、RNA或蛋白質(zhì)）以及您希望轉(zhuǎn)染的細(xì)胞類(lèi)型。您可通過(guò)下表選擇各類(lèi)陽(yáng)離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和Neon轉(zhuǎn)染系統(tǒng)。我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇，讓您可以對(duì)自己的結(jié)果更加自信.***的輸送效果—可轉(zhuǎn)染多種類(lèi)型的細(xì)胞無(wú)毒性作用—您之所以能看到結(jié)果，是因?yàn)楹怂岽嬖?，而不是因?yàn)樵噭┬枰膬?yōu)化工作更少—針對(duì)大多數(shù)細(xì)胞類(lèi)型提供了快速、簡(jiǎn)便的實(shí)驗(yàn)方案連續(xù)細(xì)胞系具有無(wú)限增殖的潛能，通常要比原代或有限細(xì)胞更易處理。但由于此類(lèi)細(xì)胞經(jīng)歷過(guò)基因改變而變得具有無(wú)限增殖能力，它們?cè)谂囵B(yǎng)過(guò)程中的表現(xiàn)可能無(wú)法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。

羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者，升級(jí)版的多組分混合試劑，兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細(xì)胞毒性，在超過(guò)350株真核細(xì)胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗(yàn)證，尤其針對(duì)難轉(zhuǎn)染細(xì)胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對(duì)CHO-K1細(xì)胞轉(zhuǎn)染帶GFP標(biāo)記的質(zhì)粒，A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖，B和D是明場(chǎng)顯微圖.與競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)品比較，X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細(xì)胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對(duì)四種很難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞株進(jìn)行轉(zhuǎn)染，X-tremeGENEHP試劑遠(yuǎn)優(yōu)于其他試劑超過(guò)350種細(xì)胞株的高效轉(zhuǎn)染驗(yàn)證還有一個(gè)好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進(jìn)行8折促銷(xiāo)哦快去搶購(gòu)吧~所見(jiàn)即所得——分享兩款超好用的轉(zhuǎn)染試劑,拯救你的細(xì)胞.

產(chǎn)生慢***的比較通過(guò)LipoD293?試劑（升級(jí)版）和LipofectamineLTX（LTX）試劑將三個(gè)cDNAs共轉(zhuǎn)染進(jìn)293T細(xì)胞。一個(gè)GFP載體，pHR-SIN-cppt-CMVEWP被用來(lái)測(cè)定慢***的滴度。在24孔板中每孔加入1x10^5293T細(xì)胞，其次是分別添加不同量的慢定都上清液，1微升（上圖）和10微升（下圖）。5天后，細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀檢測(cè)。右上角的數(shù)字表明轉(zhuǎn)導(dǎo)的細(xì)胞的百分比來(lái)測(cè)定慢***的滴度。由LipoD293?andLTX產(chǎn)生的慢***的滴度被量化，分為是8x10^6和3x10^6tu/ml。隨后分離血清并檢測(cè)FVII蛋白的水平（Biophen 顯色檢測(cè)）。上海原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒

轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少:轉(zhuǎn)染試劑選擇工具.動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒

細(xì)胞轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)是生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室中**常規(guī)的研究手段，目的是把外源基因、蛋白或者小分子導(dǎo)入到靶細(xì)胞內(nèi)。目前主要有三種主流方法：生物轉(zhuǎn)染，物理轉(zhuǎn)染和化學(xué)轉(zhuǎn)染。其中生物轉(zhuǎn)染主要是利用***等微生物作為基因?qū)胼d體，以慢***、腺***和腺相關(guān)***等**常見(jiàn)，其侵染效率可以達(dá)到90%以上，但常因安全性等問(wèn)題，很多實(shí)驗(yàn)室對(duì)其敬而遠(yuǎn)之。物理轉(zhuǎn)染主要包括顯微注射、電穿孔和基因***，無(wú)論哪一種都需要特定的設(shè)備，且一分錢(qián)一分貨，性能好的價(jià)格也都很性感電轉(zhuǎn)化化學(xué)轉(zhuǎn)染方法是生物醫(yī)學(xué)研究中**常用的轉(zhuǎn)染方法，主要包括兩類(lèi)：陽(yáng)離子脂質(zhì)體和陽(yáng)離子聚合物。其基本原理是利用陽(yáng)離子的化學(xué)分子與帶有負(fù)電荷的核酸通過(guò)正負(fù)電荷作用形成穩(wěn)定的復(fù)合物。動(dòng)物轉(zhuǎn)染試劑盒

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