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質粒轉染試劑選購

來源: 發(fā)布時間:2023-01-16

LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。轉染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞.質粒轉染試劑選購

在難轉染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉染效率的比較圖片由芝加哥大學肺和重癥護理系的NickolaiDulin博士友情提供制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用LipoD293?試劑(左圖)和Lipofecatmine2000(L2K,右圖)分別將GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生產制造商的轉染操作步轉染至該細胞。轉染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉染效率。對難轉染細胞LNCap細胞轉染效率的比較在難轉染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉染效率的比較圖片由羅斯威爾公園**研究所(RoswellCancerInstitute)上海蛋白轉染試劑原理世界上低價的細胞轉染試劑PEI,這里有**詳細的操作步驟!

在選擇轉染方法時,需考慮您希望輸送的運載物(DNA、RNA或蛋白質)以及您希望轉染的細胞類型。您可通過下表選擇各類陽離子脂質體轉染試劑和Neon轉染系統(tǒng)。我們提供了各種DNA、siRNA、寡核苷酸和RNA輸送選擇,讓您可以對自己的結果更加自信.***的輸送效果—可轉染多種類型的細胞無毒性作用—您之所以能看到結果,是因為核酸存在,而不是因為試劑需要的優(yōu)化工作更少—針對大多數細胞類型提供了快速、簡便的實驗方案連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內狀態(tài)。

胞因素用低代數的細胞293T細胞非常重要!!當然也要保證細胞狀態(tài)特別好,沒有細微污染,鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產生較高滴度的***哦!載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質粒系統(tǒng)、四質粒系統(tǒng),當然使用三質粒系統(tǒng)的小伙伴居多,一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)!載體構建和質粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質粒載體重組或某個部件缺失,或污染別的質粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣:建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批,且建議每次包裝都如此操作,要保證目的基因的表達載體構建純化良好,質粒間比例得當,并且對質粒進行酶切驗證.轉染后6h觀察細胞狀態(tài),并更換培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞,用PBS洗滌3次以上,以備RNA抽提。

簡介:X-tremeGENEHPDNA轉染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉染試劑,兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,可用于轉染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉染細胞系。優(yōu)勢:1.簡單易用的多組分混合試劑,無動物源性成分,室溫穩(wěn)定。2.高轉染效率,對于原代細胞和使用其它試劑難轉染的**細胞系有高轉染效率。3.使用細胞毒性低的試劑,結果相關性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質體轉染方法將GFP表達質粒轉染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質體轉染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP,導致存活細胞量減少(圖片來源于網絡)。誰來拯救我的細胞之QIAGEN轉染試劑.質粒轉染試劑選購

轉染產品知多少——siRNA轉染試劑.質粒轉染試劑選購

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