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原代細胞轉(zhuǎn)染試劑配方

來源: 發(fā)布時間:2023-02-04

在多種不同類型細胞中基因敲除效率超過90%。2.高靈活應(yīng)用,同一試劑可用于siRNA和質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染的基因沉默實驗。3.細胞毒性低,結(jié)果相關(guān)性好,確保所觀察到的細胞效應(yīng)是由轉(zhuǎn)染的siRNA而非轉(zhuǎn)染過程本身介導(dǎo)。4.兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基,轉(zhuǎn)染前后均無需換液(如無血清培養(yǎng)基)。圖4.X-tremeGENEsiRNATransfectionReagent用于4種細胞系的HPRT基因沉默實驗。根據(jù)各試劑說明書建議的操作流程,或標準實驗方法,將100nMHPRT特異性siRNA轉(zhuǎn)染至4種細胞。通過LightCycler®h-HPRTHousekeepingGeneSet的熒光定量法評估基因沉默效率。結(jié)果顯示用羅氏這款試劑在四種細胞中轉(zhuǎn)染后基因沉默表現(xiàn)均表現(xiàn)優(yōu)異。轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞。原代細胞轉(zhuǎn)染試劑配方

用LipoFectMax?轉(zhuǎn)染Hela細胞,左圖轉(zhuǎn)染GFPcDNA,右圖共轉(zhuǎn)染GFPCDNA和GFP靶向siRNA。轉(zhuǎn)染siRNA后可以從右圖明顯看到基因沉默。4適用于神經(jīng)細胞的轉(zhuǎn)染圖4.用LipoFectMax?和LipoFectamine®2000分別對小鼠神經(jīng)元細胞進行轉(zhuǎn)染綠色熒光白蛋白(GFP),轉(zhuǎn)染24小時后觀察轉(zhuǎn)染效果,LipoFectMax?轉(zhuǎn)染效率(左圖)比LipoFectamine®2000(右圖)高5倍。LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑轉(zhuǎn)染試劑操作流程細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作,通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。原代細胞轉(zhuǎn)染試劑配方將EntransterTM-R4000稀釋液和agomir稀釋液充分混合.

羅氏X-TremeGENE便是新一代轉(zhuǎn)染試劑的佼佼者,升級版的多組分混合試劑,兼具極高轉(zhuǎn)染效率和極低細胞毒性,在超過350株真核細胞株中獲得了高效轉(zhuǎn)染的驗證,尤其針對難轉(zhuǎn)染細胞株亦有出色表現(xiàn)。圖1.兩種試劑對CHO-K1細胞轉(zhuǎn)染帶GFP標記的質(zhì)粒,A和C是轉(zhuǎn)染后熒光顯微圖,B和D是明場顯微圖.與競爭產(chǎn)品比較,X-tremeGENEHP表現(xiàn)出更優(yōu)的轉(zhuǎn)染效率更低的細胞毒性圖2.不同試劑在含血清的培養(yǎng)基中對四種很難轉(zhuǎn)染的細胞株進行轉(zhuǎn)染,X-tremeGENEHP試劑遠優(yōu)于其他試劑超過350種細胞株的高效轉(zhuǎn)染驗證還有一個好消息X-TremeGENE轉(zhuǎn)染試劑正在進行8折促銷哦快去搶購吧~

用LipoD293?體外DNA轉(zhuǎn)染試劑(Ver.II)(上圖)和受歡迎的品牌產(chǎn)品Invitrogen公司的293fectin?(下圖)轉(zhuǎn)染pEGFP-C1質(zhì)粒到HEK293細胞中。轉(zhuǎn)染24小時后,細胞的尼康Eclipse熒光顯微鏡DIC成像圖(左側(cè))和熒光成像圖(右側(cè))。對懸浮HEK293F產(chǎn)生蛋白質(zhì)效率的比較/30毫升的293F細胞分別使用LipoD293?試劑、293fectin、Xfect和Fugene6等轉(zhuǎn)染試劑按照生產(chǎn)商的標準轉(zhuǎn)染步驟將pEGFP-6xHis質(zhì)粒導(dǎo)入細胞表達,用量為LipoD293?試劑,20微克,所有其他三種轉(zhuǎn)染試劑均使用30微克質(zhì)粒DNA。mRNA細胞&***轉(zhuǎn)染試劑來助力.

確定希望輸送的運載物(如DNA、RNA或蛋白質(zhì))根據(jù)不同實驗類型,我們可能需要將不同的運載物輸送到細胞內(nèi)部,包括**常見的DNA,用于基因編輯的siRNA,能夠更快表達蛋白的mRNA,CRISPR-Cas9甚至是體內(nèi)轉(zhuǎn)染。正確的了解您希望輸送的運載物是選擇可靠轉(zhuǎn)染產(chǎn)品的第一步。2希望轉(zhuǎn)染的細胞類型轉(zhuǎn)染的細胞類型可簡單分為兩大類,連續(xù)細胞系和原代細胞。連續(xù)細胞系具有無限增殖的潛能,通常要比原代或有限細胞更易處理。但由于此類細胞經(jīng)歷過基因改變而變得具有無限增殖能力,它們在培養(yǎng)過程中的表現(xiàn)可能無法必然地反映體內(nèi)狀態(tài)。.0試劑及RNAi復(fù)合物非常容易獲得:只需簡單地混合,并進行孵育(30min)、稀釋、及注射即可。動物轉(zhuǎn)染試劑原理

轉(zhuǎn)染產(chǎn)品知多少——siRNA轉(zhuǎn)染試劑.原代細胞轉(zhuǎn)染試劑配方

在難轉(zhuǎn)染細胞(原代大鼠動脈平滑肌細胞)轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由芝加哥大學肺和重癥護理系的NickolaiDulin博士友情提供制備大鼠的動脈平滑肌原代細胞并用使用LipoD293?試劑(左圖)和Lipofecatmine2000(L2K,右圖)分別將GFP的cDNA(pEGFP-N3)按照生產(chǎn)制造商的轉(zhuǎn)染操作步轉(zhuǎn)染至該細胞。轉(zhuǎn)染24小時后,用尼康Eclipse2000熒光顯微鏡檢測GFP熒光,以此來評價轉(zhuǎn)染效率。對難轉(zhuǎn)染細胞LNCap細胞轉(zhuǎn)染效率的比較圖片由羅斯威爾公園**研究所(RoswellCancerInstitute)的LynGao博士友情提供原代細胞轉(zhuǎn)染試劑配方

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