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上海sirna轉染試劑配方

來源: 發(fā)布時間:2023-03-29

基于磷酸鈣成分的轉染試劑,其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物,粘附到細胞膜表面,借助內吞作用進入細胞質。pH值,鈣離子濃度,DNA濃度,沉淀時間,細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結果產生影響,因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長,且重復性不佳。基于脂質體的轉染試劑包括中性脂質體和陽離子脂質體兩種。中性脂質體是利用脂質膜包裹DNA,借助脂質膜將DNA導入細胞膜內。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質體轉染試劑,DNA并沒有預先包埋在脂質體中,而是帶負電的DNA自動結合到帶正電的脂質體上,形成DNA-陽離子脂質體復合物,從而吸附到帶負電的細胞膜表面,經過內吞被導入細胞。此方法操作簡單,重復性好,在體外轉染中有很高的效率,但具有一定的細胞毒性,可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響,需要去除血清。研發(fā)合成的針對siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的轉染試劑。上海sirna轉染試劑配方

圖7.對注射了Invivofectamine3.0試劑的小鼠樣品進行血液化學分析。將Invivofectamine3.0試劑與靶向FVII的AmbioninvivosiRNA的復合物分別以1mg/kg[1],3mg/kg[3],或未處理[U]的劑量注射入小鼠體內。在注射后2、24及48小時收集血液樣品,并通過臨床化學檢測方法對數(shù)個生物標志物(Antech)進行評估。結果表明在使用Invivofectamine3.0試劑進行轉染的每個個體間所檢測的生物標志物的水平與未注射該試劑的個體相比并沒有***差異。除了以上兩種于siRNA的轉染試劑,還有通用型轉染試劑Lipofectamine?2000,Lipofectamine?3000和Neon?轉染系統(tǒng)也可以用于siRNA轉染慢病毒轉染試劑哪種好但相對于連續(xù)細胞系,它們通常更難培養(yǎng)和轉染。

十全十美難,十全九美卻可以通過選擇一款好的轉染試劑來實現(xiàn)。理想的轉染試劑包括要具有較高的轉染效率,細胞毒性低,操作簡單可重復,價格還要可愛?,F(xiàn)在大多數(shù)實驗室用的是脂質體系列轉染試劑,但脂質體對細胞毒性大,某些細胞的轉染效率還很低,看單孔的價格也很不美好。尤其是在轉染RNA方面,脂質體的劣勢較明顯。QIAGEN在轉染試劑領域的研發(fā)思路與其核酸純化領域的精而專,全而深不同。在轉染試劑的研發(fā)過程中,另辟蹊徑,研精致思進而做到小而美的轉染產品。從市面上眾多轉染試劑的一片紅海中,神奇的開辟出一塊藍海,為客戶烹制出了幾款高效、快速、低毒又親民的轉染試劑私房菜。

LipoFectMax?轉染試劑LipoFectMax?轉染試劑具有以下幾個優(yōu)點:高轉染效率,適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉染轉染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉染效率高,適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉染試劑以綠色熒光蛋白(GFP)表達質粒轉染幾種常見細胞系,通過檢測GFP信號比較轉染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?,LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉染操作,通過計算轉染后的細胞存活率比較細胞毒性。隨后分離血清并檢測FVII蛋白的水平(Biophen 顯色檢測)。

細胞轉染如果以上都沒有問題,那么******重要的環(huán)節(jié)就是慢***質粒轉染293T細胞了,轉染效果直接影響著出毒效率,那么一款好的轉染試劑在此時就是至關重要了!在這里給大家推薦一款性價比超高的轉染試劑,美國Polysciences家的PEIMAX40K!PEIMAX40K(也稱為游離堿PEI22K)是一種功能強大,值得信賴且經濟高效的瞬時轉染試劑。在HEK293和CHO表達系統(tǒng)中,能在96孔板至100L生物反應器范圍內提供始終如一高效的基因表達。越來越多的研究人員和公司使用PEI來替代其他類型轉染試劑,以獲得他們所需要的優(yōu)勢。相較于其他類型轉染試劑,使用自行制備的PEI轉染試劑可以使總轉染成本降低高達40%左右。ThomasM,etal(2005)研究數(shù)據(jù)表明,去乙?;腜EI40000(PolyethylenimineMAX40000)體外質粒DNA轉染效率提高21倍,小鼠體內靶向效率達到10000倍,隨之肺部特異療效顯示增強1500倍。采用Lipofectamine RNAiMAX轉染試劑轉染A549細胞時,實現(xiàn)了比較好的基因***效果和比較低的細胞毒性。上海病毒轉染試劑

所見即所得——分享兩款超好用的轉染試劑,拯救你的細胞.上海sirna轉染試劑配方

X-tremeGENE9DNA轉染試劑簡介:X-tremeGENE9DNA轉染試劑是脂質和其它成分混合而得的一類多組份試劑,溶于80%乙醇中,經0.2μm濾膜過濾,然后封裝于玻璃小瓶中,適用于細胞分析的多種實驗。優(yōu)勢:1.具有細胞毒性極低、轉染后細胞存活率高,生成可信任的生理學相關數(shù)據(jù)。2.操作簡便、節(jié)省時間,只需對X-tremeGENE9DNA轉染試劑進行簡單稀釋,再與質粒DNA共同孵育,即可直接向細胞添加反應混合物(有無血清均可)。3.對于常用細胞無需進行費時費力的優(yōu)化工作.上海sirna轉染試劑配方

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