簡介：X-tremeGENEHPDNA轉(zhuǎn)染試劑是一種高效的無動物源成分的低毒轉(zhuǎn)染試劑，兼容含血清或不含血清的培養(yǎng)基，可用于轉(zhuǎn)染各類真核細胞(包括昆蟲細胞)以及多種難轉(zhuǎn)染細胞系。優(yōu)勢：1.簡單易用的多組分混合試劑，無動物源性成分，室溫穩(wěn)定。2.高轉(zhuǎn)染效率，對于原代細胞和使用其它試劑難轉(zhuǎn)染的**細胞系有高轉(zhuǎn)染效率。3.使用細胞毒性低的試劑，結(jié)果相關性好。圖2.X-tremeGENEHP高效低毒的轉(zhuǎn)染性能。通過X-tremeGENEHP和脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法將GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至CHO-K1。A和C圖的熒光視野顯示了實驗后兩種方法均獲得了成功轉(zhuǎn)染的細胞。但B和D圖的明亮視野表明脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方法的細胞毒性遠高于X-tremeGENEHP，導致存活細胞量減少(圖片來源于網(wǎng)絡)...細胞培養(yǎng)系列 | 專為 293T 優(yōu)化的轉(zhuǎn)染試劑 Nano293T.完全培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)染試劑的公司

原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖,因此，它們的形態(tài)學和生理特征和體內(nèi)狀態(tài)更為相似。但相對于連續(xù)細胞系，它們通常更難培養(yǎng)和轉(zhuǎn)染。在經(jīng)過***次傳代培養(yǎng)之后，原代培養(yǎng)物變成了一種細胞系。源自于原代培養(yǎng)物的細胞系具有有限的壽命（即它們是有限細胞系），且隨著傳代的進行，具有比較高的生長能力的細胞逐漸占據(jù)支配地位，從而造成了細胞群內(nèi)的基因型和表型接近一致的情形。相對來說，這一類細胞要比原代細胞使用起來更為方便，尤其是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的克隆傳代。怎么配制轉(zhuǎn)染試劑原代細胞直接分離自組織并在適當條件下增殖.

胞因素用低代數(shù)的細胞293T細胞非常重要！！當然也要保證細胞狀態(tài)特別好，沒有細微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細胞才可以產(chǎn)生較高滴度的***哦！載體系統(tǒng)在實驗中**常見的慢***載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！載體構建和質(zhì)粒抽提純化我們要注意是否構建時導致質(zhì)粒載體重組或某個部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時做陰性對照的習慣：建議目的基因載體和陰性對照GFP載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達載體構建純化良好，質(zhì)粒間比例得當，并且對質(zhì)粒進行酶切驗證。

基于磷酸鈣成分的轉(zhuǎn)染試劑，其主要作用原理是與DNA通過沉淀反應形成磷酸鈣-DNA復合物，粘附到細胞膜表面，借助內(nèi)吞作用進入細胞質(zhì)。pH值，鈣離子濃度，DNA濃度，沉淀時間，細胞孵育時間乃至各組分加入順序都可能對結(jié)果產(chǎn)生影響，因此實驗條件摸索和優(yōu)化時間較長，且重復性不佳?；谥|(zhì)體的轉(zhuǎn)染試劑包括中性脂質(zhì)體和陽離子脂質(zhì)體兩種。中性脂質(zhì)體是利用脂質(zhì)膜包裹DNA，借助脂質(zhì)膜將DNA導入細胞膜內(nèi)。目前應用比較***的是帶正電的陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑，DNA并沒有預先包埋在脂質(zhì)體中，而是帶負電的DNA自動結(jié)合到帶正電的脂質(zhì)體上，形成DNA-陽離子脂質(zhì)體復合物，從而吸附到帶負電的細胞膜表面，經(jīng)過內(nèi)吞被導入細胞。此方法操作簡單，重復性好，在體外轉(zhuǎn)染中有很高的效率，但具有一定的細胞毒性，可能會干擾細胞的代謝。且活性受血清影響，需要去除血清。**于siRNA的轉(zhuǎn)染試劑，還有通用型轉(zhuǎn)染試劑Lipofectamine?.

細胞轉(zhuǎn)染是指將外源基因如DNA，RNA等導入細胞內(nèi)的技術。隨著分子生物學的發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制細胞基因功能、實現(xiàn)基因調(diào)控的常規(guī)工具。市場上各種轉(zhuǎn)染試劑琳瑯滿目，各有千秋，然而沒有任何一種轉(zhuǎn)染試劑可以能夠適用于所有細胞種類、滿足所有實驗需求和目的，成分控認為轉(zhuǎn)染試劑的成分及作用機理對轉(zhuǎn)染效果及細胞生理作用影響***，是轉(zhuǎn)染試劑選擇的重要依據(jù)，選試劑時要留意成分哦。嚴格來講，轉(zhuǎn)染的方法可以基于化學法、物理法（電穿孔、顯微注射等）以及***介導法，沒有一種方法是放之四海而皆準。作為成分控的小編，本次主要為大家介紹基于各類轉(zhuǎn)染試劑的化學法轉(zhuǎn)染。轉(zhuǎn)染后6h觀察細胞狀態(tài)，并更換培養(yǎng)基，繼續(xù)培養(yǎng)24 h后收取細胞，用PBS洗滌3次以上，以備RNA抽提。北京適合a549的轉(zhuǎn)染試劑

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LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑具有以下幾個優(yōu)點：高轉(zhuǎn)染效率，適用于多種細胞系對細胞毒性低適用于DNA和RNA的轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染前無需去除細胞培養(yǎng)基或血清轉(zhuǎn)染后無需清洗細胞或更換培養(yǎng)基轉(zhuǎn)染效率高，適用于多種細胞系圖1.LipoFectMax?轉(zhuǎn)染試劑以綠色熒光蛋白（GFP）表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染幾種常見細胞系，通過檢測GFP信號比較轉(zhuǎn)染效率。細胞毒性低圖2.LipoFectMax?，LipoFectamine®2000及LipoFectamine®3000分別對A549細胞進行轉(zhuǎn)染操作，通過計算轉(zhuǎn)染后的細胞存活率比較細胞毒性。完全培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)染試劑的公司

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