。一般情況下，**外一圈的孔只加培養(yǎng)基，不作為測定孔用。在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450 nm的吸光度作為空白對照。金屬對CCK-8顯色有影響：當終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會***5%、15%、90%的顯色反應，使靈敏度降級。如果終濃度是10 mM的話，將會*****。懸浮細胞由于染色比較困難，一般需要增加細胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間。***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時，經(jīng)常會用到CCK-8。浙江cck8實驗步驟

cck8試劑加入后孵育時間，隨著時間的增加，OD值就會增大?？傊瓌t就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。再說一下關于種板設置問題。眾所周知周圍一圈孔因為邊緣效應都是不用來做實驗的。一般每組樣品我會設置6個復孔，得到的OD值去掉**大值與**小值，其余取平均值。我用的是排***，會省很多力氣，但是也會增大組內(nèi)誤差。這個只有通過校正移液***和選用**適***頭了。能力有限，表達不清的大家湊合著看看吧。有疑問的歡迎大家留言討論，我們的目標是共同進步江蘇cck8數(shù)據(jù)sasCCK8原理、優(yōu)勢和步驟.

CCK-8的用途1.細胞增殖測定：細胞增殖實驗在很多領域都會用到，比如**相關、損傷后修復等。

2.***篩選：在測定一個***的毒性和安全有效濃度時，經(jīng)常會用到CCK-8。

3.細胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細胞活性和增殖的影響，比如在UV、低氧或者什么化學物品對細胞的影響上。

4.**藥敏試驗：這個是用的比較廣的，我見過做**的團隊，買CCK-8都是一整箱，一整箱的買，比如果子老師所在的團隊，哈哈哈。

5.微生物對細胞的毒性或增殖的實驗。

特點不同1、CellCountingKit-8：靈敏度高，數(shù)據(jù)可靠，重現(xiàn)性好；操作簡便，省時省力；水溶性，不需要換液，尤其適合于懸浮細胞；無需放射性同位素和有機溶劑，對細胞毒性低；適合于高通量***篩選。2、MTT法：特點是靈敏度高、經(jīng)濟。三、應用不同1、CellCountingKit-8：主要用途為***篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、**藥敏試驗。2、MTT法：***用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗*****篩選、細胞毒性試驗以及**放射敏感性測定等。CCK8的實驗步驟、實驗分組及檢測方法.

CCK8原理、優(yōu)勢和步驟 檢測原理：

◆ Cell Counting Kit簡稱CCK試劑盒，是一種基于WST-8（化學名：2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽）的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。

◆ WST-8屬于MTT的升級產(chǎn)品，工作原理為：在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成高度水溶性的橙黃色的甲臜產(chǎn)物（formazan）。顏色的深淺與細胞的增殖成正比，與細胞毒性成反比。使用酶標儀在450mM波長處測定OD值，間接反映活細胞數(shù)量。 細胞增殖測定：細胞增殖實驗在很多領域都會用到，比如**相關、損傷后修復等。江蘇cck8計算

CCK8試驗的總體實驗心得.浙江cck8實驗步驟

用途：

***篩選、

細胞增殖測定、

細胞毒性測定、

**藥敏試驗等。

所需設備及儀器：

10ul，100-200ul及多通道移液器

酶標儀（帶有450nm濾光片）

96孔培養(yǎng)板

二氧化碳培養(yǎng)箱

培養(yǎng)0.5-4小時:細胞種類不同，形成的Formazan的量也不一樣。如果顯色不夠的話，可以繼續(xù)培養(yǎng)，以確認比較好條件。特別是血液細胞形成的Formazan很少，需要較長的顯色時間（5-6小時）。

測定450nm吸光度：建議采用雙波長進行測定，檢測波長450-490nm，參比波長600-650nm。 浙江cck8實驗步驟

上海儒安生物科技有限公司屬于醫(yī)藥健康的高新企業(yè)，技術(shù)力量雄厚。是一家有限責任公司企業(yè)，隨著市場的發(fā)展和生產(chǎn)的需求，與多家企業(yè)合作研究，在原有產(chǎn)品的基礎上經(jīng)過不斷改進，追求新型，在強化內(nèi)部管理，完善結(jié)構(gòu)調(diào)整的同時，良好的質(zhì)量、合理的價格、完善的服務，在業(yè)界受到寬泛好評。以滿足顧客要求為己任；以顧客永遠滿意為標準；以保持行業(yè)優(yōu)先為目標，提供***的細胞轉(zhuǎn)染試劑，ecl發(fā)光液，cck8細胞增殖，內(nèi)參抗體。上海儒安生物科技將以真誠的服務、創(chuàng)新的理念、***的產(chǎn)品，為彼此贏得全新的未來！