CCK8檢測原理圖2操作步驟1、在96孔板中接種細(xì)胞懸液（100μL/孔）。將培養(yǎng)板放在培養(yǎng)箱中預(yù)培養(yǎng)（37℃,5%CO2）。2、細(xì)胞處理（不同實驗處理方式不同）。3、向每孔加入10μLCCK溶液（注意不要在孔中生成氣泡，它們會影響OD值的讀數(shù)）。4、將培養(yǎng)板在培養(yǎng)箱內(nèi)孵育1-4小時。5、用酶標(biāo)儀測定在450nm處的吸光度。6、若暫時不測定OD值，可以向每孔中加入10μL0.1M的HCL溶液或者1%w/vSDS溶液，并遮蓋培養(yǎng)板避光保存在室溫條件下。24小時內(nèi)測定，吸光度不會發(fā)生變化。若細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，培養(yǎng)基顏色或 pH 發(fā)生變化，建議更換培養(yǎng)基后再加 CCK-8.江蘇cck8細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)分析

CCK-8沒有具體規(guī)定反應(yīng)時間的長短，以具體反映比較好顯色的時間為主。因為不同的細(xì)胞反應(yīng)時間、顯色標(biāo)準(zhǔn)都不一樣，所以一定要設(shè)置預(yù)實驗。預(yù)實驗中，可以先做幾個孔摸索一下接種數(shù)量和培養(yǎng)時間。3、懸浮細(xì)胞比貼壁細(xì)胞難顯色。在加入CCK-8培養(yǎng)后，可每隔一小時觀測一下顏色的變化情況，或者之間用酶標(biāo)儀檢測更為準(zhǔn)確。4、CCK8作用時間越長，OD值就越大，所以對于作用時間也不是越長久越好，要把OD值控制在1左右。5、CCK8要求檢測孔內(nèi)不能有氣泡。上海cck8檢測ogd后細(xì)胞活性CCK8細(xì)胞增值檢測實驗簡介.

在培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度即為空白對照。在做加藥實驗時，還應(yīng)考慮***的吸收，可在加入***的培養(yǎng)基中加入CCK8，培養(yǎng)一定的時間，測定450nm的吸光度作為空白對照。·金屬對CCK-8顯色有影響：當(dāng)終濃度為1mM的氯化亞鉛、氯化鐵、硫酸銅會***5%、15%、90%的顯色反應(yīng)，使靈敏度降級。如果終濃度是10mM的話，將會*****。·懸浮細(xì)胞由于染色比較困難，一般需要增加細(xì)胞數(shù)量和延長培養(yǎng)時間。·加入CCK-8時，如果細(xì)胞培養(yǎng)時間較長，培養(yǎng)基顏色或pH值已變化，建議換用新鮮的培養(yǎng)基。·用酶標(biāo)儀檢測前需確保每個孔內(nèi)沒有氣泡，否則會干擾測定，且要擦拭干凈樣品板了。

沒有做過MTT實驗，但其實原理及目的都是一樣的（反應(yīng)機(jī)理不一樣）。都說CCK8簡單點(diǎn)而且數(shù)據(jù)更穩(wěn)定，所以就用了這個試劑盒。CCK8的說明書大家一定要認(rèn)真閱讀，里面很多細(xì)節(jié)的問題都有提到。而且說明書里提供的一些關(guān)于各種細(xì)胞的種板數(shù)都很有參考價值，因為那是反復(fù)驗證過的比較好數(shù)值。但無論如何，做這個試驗一定要摸條件。你就算再懶，這個懶不得，否則你都只是在做無用功。以下言論全部以細(xì)胞毒性試驗為前提，如果你做的是促進(jìn)細(xì)胞生長的***的藥效實驗?zāi)蔷土懋?dāng)別論了。CCK8試驗的總體實驗心得.

cck8試劑加入后孵育時間，隨著時間的增加，OD值就會增大?？傊瓌t就是把OD值控制在1.0左右。這里我考察了0.5h、1.0h、2.0h。

再說一下關(guān)于種板設(shè)置問題。眾所周知周圍一圈孔因為邊緣效應(yīng)都是不用來做實驗的。一般每組樣品我會設(shè)置6個復(fù)孔，得到的OD值去掉**大值與**小值，其余取平均值。我用的是排***，會省很多力氣，但是也會增大組內(nèi)誤差。這個只有通過校正移液***和選用**適***頭了。

能力有限，表達(dá)不清的大家湊合著看看吧。有疑問的歡迎大家留言討論，我們的目標(biāo)是共同進(jìn)步，哈哈。 生成的甲臜物的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比.江蘇cck8細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)分析

細(xì)胞毒性測定：這個可以和各個處理因素對細(xì)胞活性和增殖的影響，比如低氧或者什么化學(xué)物品對細(xì)胞的影響上。江蘇cck8細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)分析

實驗材料及試劑

96 孔板、CO2培養(yǎng)箱、酒精燈、移液***、酶標(biāo)儀等；細(xì)胞、CCK8等。

實驗內(nèi)容取生長狀態(tài)良好的對數(shù)生長期細(xì)胞，每孔按 4×103個接種至 96 孔板中，每組設(shè)置8個復(fù)孔，置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細(xì)胞貼壁后轉(zhuǎn)染相應(yīng)質(zhì)粒后。繼續(xù)培養(yǎng) 48h 后，棄含藥培養(yǎng)基，每孔加入新鮮配制的含 10ｕL的毒性檢測液CCK8，置于培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng) 4h 后，用酶標(biāo)儀測波長為450 nm的OD值。實驗重復(fù) 3 次， 取實驗結(jié)果的平均值作為**終實驗結(jié)果。按公式計算生長***率＝[(對照組 OD－實驗組 OD)/對照組 OD]  ×**，以分組為橫坐標(biāo)，生長***率為縱坐標(biāo)，繪制細(xì)胞生長***率柱狀圖。 江蘇cck8細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)分析