用吸管吸出細(xì)胞懸液,加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液,混勻;離心,1000rpm,5min;棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計數(shù),調(diào)整細(xì)胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。注意事項(xiàng):取錯細(xì)胞:拿錯凍存管。(快快快,匆忙之中,難免出錯,況且-170多度,凍手?。┙鉀Q:(1)核查記錄冊及凍存管上細(xì)胞的名稱、時間是否一致。(2)拿細(xì)胞時戴手套!2.水浴時間太長:2min還沒融化。(凍存管的壁較厚,隔熱)解決:(1)適當(dāng)提高水浴溫度(37度-40度)。(2)要是冬天,就選用保溫盒。3.冰盒內(nèi)時間太長:復(fù)蘇1h后,還沒有加入新的培養(yǎng)液。(高濃度...
非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。注意事項(xiàng):錯誤的時機(jī):細(xì)胞狀態(tài)不好(長的太過了,培養(yǎng)液已經(jīng)很黃;細(xì)胞可疑污染;細(xì)胞已經(jīng)開始凋亡或崩解;連續(xù)培養(yǎng)超過二個月,細(xì)胞性狀已有改變改變)。解決:**佳時機(jī):細(xì)胞增殖旺盛,情況穩(wěn)定,試驗(yàn)效果良好,復(fù)蘇后兩周內(nèi)。2.細(xì)胞太少:凍存時細(xì)胞濃度低于1-5×1000,000/ml。(復(fù)蘇很難成功)。解決:離心后調(diào)整細(xì)胞濃度。(不要重新洗細(xì)胞)。3.蓋子不緊:凍存管的蓋子一定要擰緊,否則復(fù)蘇水浴時會滲水,造成污染。解決:選擇原配的管子和蓋子(不同牌子/型號的顏色會有差別)。4.單薄的凍存盒:放在-80度的凍存盒,壁太薄,細(xì)胞在被迅速降溫。解決:選擇厚壁泡沫塑料盒,或塞...
本發(fā)明的目的在于提供一種細(xì)胞凍存液,使凍存培養(yǎng)后的細(xì)胞具有成活率高的優(yōu)點(diǎn),同時滿足凍存液成分簡單、成本低等要求。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案得以實(shí)現(xiàn)上述目的。***方面,本發(fā)明提供了一種細(xì)胞凍存液,所述細(xì)胞凍存液的成分如下:將上述組分加入到工業(yè)用水中,用于配置得到細(xì)胞凍存液。該細(xì)胞凍存液采用聯(lián)合滲透性和非滲透性保護(hù)液組合方案,細(xì)胞凍存液在完全凝固之前,滲透到細(xì)胞內(nèi),在細(xì)胞內(nèi)外產(chǎn)生一定的摩爾濃度,降低細(xì)胞內(nèi)外未結(jié)冰溶液中電解質(zhì)的濃度,從而保護(hù)細(xì)胞免受高濃度電解質(zhì)的損傷,同時細(xì)胞內(nèi)水分也不會過分外滲,避免細(xì)胞過分脫水皺縮。第二方面,本發(fā)明提供了一種細(xì)胞凍存液的使用方法,所述方法包括如下步驟:1...
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1到-2℃...
進(jìn)行瓶口消毒,棄去細(xì)胞原來的培養(yǎng)基。按每25cm2/ml胰酶/EDTA消化液比例加入消化液,放入顯微鏡下觀察,待所有細(xì)胞變圓后立即拿入超凈臺內(nèi),加入2ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基以立即終止消化。采用無菌***頭輕輕吹打細(xì)胞表面,注意吹打全部培養(yǎng)表面,可以按照先左右吹打,后上下吹打的方式,取所有細(xì)胞懸液放入一干凈的15毫升離心管內(nèi)。配平離心:采用天平配平兩端,每分鐘800轉(zhuǎn),室溫離心5分鐘。采用羅氏CASY-DT快速細(xì)胞計數(shù)及活率分析儀進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。加入10mlCASY-ton至以標(biāo)記viable的管子中,加入100μl細(xì)胞懸液,顛倒混勻三次,可進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)??梢娒亢辽龖乙褐杏谢罴?xì)胞總數(shù)。取出凍存...
重復(fù)2~3次,以去除細(xì)胞懸液中的細(xì)胞碎片;e.加少許pbs液,將沉淀細(xì)胞輕輕吹打均勻;加固定液或低溫保存待用。3)根據(jù)細(xì)胞懸液的體積,按一定比例以穩(wěn)定速率加入細(xì)胞凍存液并充分混勻;4)凍存:將步驟3)中充分混勻的細(xì)胞溶液分裝至凍存管中,并轉(zhuǎn)移至液氮中,進(jìn)行程序性降溫至-80℃并轉(zhuǎn)至液氮中儲存;5)細(xì)胞復(fù)蘇:從液氮系統(tǒng)中取出裝有凍存細(xì)胞樣品,等待1~2min使殘余液氮揮發(fā)之后,迅速放入37℃水浴中,待可見冰塊剛好要消失至黃豆大小體積時,取出細(xì)胞樣品待用。6)計算細(xì)胞存活率推薦地,步驟3)中細(xì)胞懸液體積與細(xì)胞凍存液體積的比例為2~8:1,**推薦地,細(xì)胞懸液體積與細(xì)胞凍存液的體積的比例為4...
本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域:,尤其涉及一種細(xì)胞凍存液,具體涉及一種用于干細(xì)胞的凍存液。背景技術(shù)::臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液,通常是廢棄不用的。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建人體造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞,可用于造血干細(xì)胞移植,***80多種疾病。因此,臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源,特別是無血緣關(guān)系造血干細(xì)胞的來源。也是一種非常重要的人類生物資源。干細(xì)胞***是將具有不斷自我繁殖能力和多向化潛能的干細(xì)胞在體外培養(yǎng)后,再將其移植入患者受損或缺損組織中,從而實(shí)現(xiàn)對損傷組織的補(bǔ)充和修復(fù)。目前干細(xì)胞采集后,需要加入保存液進(jìn)行冷凍保存,細(xì)胞凍存液是細(xì)...
正確凍存細(xì)胞并從液氮中復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中**重要的的技術(shù)方法之一。防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶并**大程度降低細(xì)胞壓力,是凍存過程保持細(xì)胞活力的關(guān)鍵。我們可提供各種各樣的無菌過濾、經(jīng)應(yīng)用測試的冷凍保護(hù)劑,如DMSO和含/不含DMSO的即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基,可**大程度確保凍存和解凍過程中的細(xì)胞活力。即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基便捷的細(xì)胞凍存培養(yǎng)基試劑無需滴定DMSO濃度,且可提供不含DMSO的制劑版本。CryoStor?細(xì)胞凍存培養(yǎng)基提供2%、5%和10%濃度選擇,以及不含DMSO的制劑版本CryoSOFree?。pZerve?是一種同時適合含血清培養(yǎng),或不含二甲基亞砜(DMSO)、胎牛血清或其他動物來源...
常須將培養(yǎng)物進(jìn)行冷凍保存,并在需要的時候重新復(fù)蘇和培養(yǎng)。目前,細(xì)胞凍存**常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)局的緩慢冷凍法保存細(xì)胞。無血清非程序細(xì)胞凍存液,添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑可防止或延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降,防止細(xì)胞互相擠壓,影響細(xì)胞凍存效果。另外添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑。滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑,它們在溶液中同水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成,能**降低細(xì)胞在凍存過程中冰晶對于細(xì)胞的損傷,有效提高細(xì)胞復(fù)蘇率和活力。同時無任何外源血清成分,減少細(xì)胞污染機(jī)會,并且無需繁瑣的程序凍存步驟,節(jié)省了大量時間和...
操作時切勿使水浸沒凍存管口,以免造成細(xì)胞污染);2)待細(xì)胞凍存管中凍存液完全融化后,立即逐滴加入少量細(xì)胞完全培養(yǎng)基于該冷凍管中與細(xì)胞進(jìn)行混合,再將細(xì)胞混合液從凍存管中移入含有8~10mL該細(xì)胞完全培養(yǎng)基的試管中,輕輕混合均勻;1000r/min離心5min,棄上清;3)加入1~2mL完全培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,按照合適的接種密度將細(xì)胞接種到細(xì)胞培養(yǎng)容器中,加入適量的已預(yù)熱的新鮮的細(xì)胞完全培養(yǎng)基。4)輕輕搖晃培養(yǎng)器皿,使細(xì)胞分布均勻,靜置于37℃、飽和濕度細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。產(chǎn)品穩(wěn)定性及保存條件1)置于2~8℃避光保存,有效期為1年;2)本產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超過保質(zhì)期,必須放棄使用;3)為確保...
嚴(yán)禁充裝液氧等易燃易爆及腐蝕性液體,以免產(chǎn)生猛烈燃燒、或?qū)θ萜鳟a(chǎn)生腐蝕。液氮是**溫液體(-196℃),在充裝時,要穿長袖工作服、帶皮手套,以避免液氮飛濺造成***。貯存容器不得作貯運(yùn)容器使用。若運(yùn)輸液氮。必須使用B型貯運(yùn)容器。因此類容器有特殊支撐結(jié)構(gòu),堅固可靠不易損壞。4.液氮容器在使用過程中,每天都應(yīng)隨時檢查容器的使用情況,如發(fā)現(xiàn)容器瓶蓋上和上部有水珠或結(jié)霜情況,說明容器質(zhì)量出現(xiàn)問題,應(yīng)立即停止使用。5.存入取出樣品要標(biāo)記,拿取東西要輕拿輕放。一、細(xì)胞凍存方法:凍存液**好現(xiàn)配:按1:3:6(或1:2:7)配凍存液1份DMSO3份血清和6份培養(yǎng)基(養(yǎng)細(xì)胞時用什么培養(yǎng)基凍存時就用什么...
無血清細(xì)胞凍存液,含多種保護(hù)劑成分。一些保護(hù)劑,易于穿透細(xì)胞,避免細(xì)胞內(nèi)部水分子形成冰晶損傷細(xì)胞,同時另一些保護(hù)劑不能穿透細(xì)胞,但可以在冰晶形成之前,優(yōu)先結(jié)合細(xì)胞外的水分子,降低細(xì)胞外溶液的電解質(zhì)濃度,減少陽離子進(jìn)入細(xì)胞的數(shù)量,為多種保護(hù)劑組合,在細(xì)胞內(nèi)外進(jìn)行雙重保護(hù),**提高了細(xì)胞復(fù)蘇存活率。無血清細(xì)胞凍存液不含牛血清,無動物源組份。2-8℃即可穩(wěn)定保存,無需冷凍,即取即用。凍存細(xì)胞,無需程序降溫。凍存細(xì)胞復(fù)蘇率在90%以上。1.無血清細(xì)胞凍存液用于造血干細(xì)胞、間充質(zhì)干細(xì)胞等干細(xì)胞的儲存。2.無血清細(xì)胞凍存液用于T淋巴細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞的存儲。3.無血清細(xì)胞凍存液用于其他類型哺...
進(jìn)行瓶口消毒,棄去細(xì)胞原來的培養(yǎng)基。按每25cm2/ml胰酶/EDTA消化液比例加入消化液,放入顯微鏡下觀察,待所有細(xì)胞變圓后立即拿入超凈臺內(nèi),加入2ml細(xì)胞完全培養(yǎng)基以立即終止消化。采用無菌***頭輕輕吹打細(xì)胞表面,注意吹打全部培養(yǎng)表面,可以按照先左右吹打,后上下吹打的方式,取所有細(xì)胞懸液放入一干凈的15毫升離心管內(nèi)。配平離心:采用天平配平兩端,每分鐘800轉(zhuǎn),室溫離心5分鐘。采用羅氏CASY-DT快速細(xì)胞計數(shù)及活率分析儀進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。加入10mlCASY-ton至以標(biāo)記viable的管子中,加入100μl細(xì)胞懸液,顛倒混勻三次,可進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。可見每毫升懸液中有活細(xì)胞總數(shù)。取出凍存...
正確凍存細(xì)胞并從液氮中復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中**重要的的技術(shù)方法之一。防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶并**大程度降低細(xì)胞壓力,是凍存過程保持細(xì)胞活力的關(guān)鍵。我們可提供各種各樣的無菌過濾、經(jīng)應(yīng)用測試的冷凍保護(hù)劑,如DMSO和含/不含DMSO的即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基,可**大程度確保凍存和解凍過程中的細(xì)胞活力。即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基便捷的細(xì)胞凍存培養(yǎng)基試劑無需滴定DMSO濃度,且可提供不含DMSO的制劑版本。CryoStor?細(xì)胞凍存培養(yǎng)基提供2%、5%和10%濃度選擇,以及不含DMSO的制劑版本CryoSOFree?。pZerve?是一種同時適合含血清培養(yǎng),或不含二甲基亞砜(DMSO)、胎牛血清或其他動物來源...
不含血清及動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全成分明確,批次間差異小既適用于一般細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存無需程序降溫,可直接放置-80℃冰箱長期凍存,操作簡單可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時高效。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法,其中細(xì)胞凍存液,作為細(xì)胞凍存時必須使用的一種溶液,不僅更是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,在細(xì)胞的購買、寄贈、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、...
凍存成功的兩大必要條件細(xì)胞的生長狀態(tài)按照標(biāo)準(zhǔn)凍存程序操作為什凍存細(xì)胞需要加入保護(hù)劑在不附加任何保護(hù)劑下直接凍存細(xì)胞時,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、滲透壓改變、脫水、PH改變、蛋白變性等,能引起細(xì)胞死亡。如向培養(yǎng)液加入保護(hù)劑,可使冰點(diǎn)降低。在緩慢的凍結(jié)條件下,能使細(xì)胞內(nèi)水份在凍結(jié)前透出細(xì)胞。貯存在負(fù)130℃以下的低溫中能減少冰晶的形成。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備凍存管、15毫升離心管、移液管、移液槍、qiang頭等放入無菌超凈工作臺,以紫外線照射30分鐘。采用通風(fēng)機(jī)通風(fēng)3分鐘。以75%酒精擦拭操作臺和雙手。準(zhǔn)備好冰盒。將離心機(jī)調(diào)節(jié)至800轉(zhuǎn),3分鐘。水浴箱調(diào)節(jié)...
不同細(xì)胞系請參照附表。細(xì)胞系凍存密度備注正常人成纖維細(xì)胞1-3x106cells/mL雜交瘤細(xì)胞1-3x106cells/mL某些hybridoma會因冷凍濃度太高而在解凍24小時后死去。貼壁腫瘤細(xì)胞5-7x106cells/mLHela除外,1~3×106cells/ml即可其他懸浮細(xì)胞5-10x106cells/mL人淋巴細(xì)胞高密度凍存效果好干細(xì)胞類1-2x107cells/mL支持高密度凍存MSC細(xì)胞,為常規(guī)血清凍存液的10倍。2、細(xì)胞凍存過程a)將要凍存的細(xì)胞懸液,進(jìn)行細(xì)胞計數(shù),計數(shù)后離心,800轉(zhuǎn),3min即可。b)棄去上清,將4度保存的無血清凍存液緩慢加入離心后的細(xì)胞沉淀中...
如果想要達(dá)到這樣的目的,那么就需要細(xì)胞冷卻液,這種東西怎樣配置呢?下面就來具體的了解一下,細(xì)胞凍存液的配方是什么?(一)細(xì)胞凍存1.配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液;2.取對數(shù)生長期的細(xì)胞,去除舊培養(yǎng)液,用PBS清洗。3.去除PBS,加入適量胰蛋白酶(覆蓋培養(yǎng)皿表面)把單層生長的細(xì)胞消化下來;4.離心1000rpm,5min;5.去除胰蛋白酶,加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,計數(shù),調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的**終密度為5×106/ml~1×107/ml;6.將細(xì)胞分裝入凍存管中,每管1~7.在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱,凍存時間及操作者;8.凍存:...
正確凍存細(xì)胞并從液氮中復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng)中**重要的的技術(shù)方法之一。防止細(xì)胞內(nèi)形成冰晶并**大程度降低細(xì)胞壓力,是凍存過程保持細(xì)胞活力的關(guān)鍵。我們可提供各種各樣的無菌過濾、經(jīng)應(yīng)用測試的冷凍保護(hù)劑,如DMSO和含/不含DMSO的即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基,可**大程度確保凍存和解凍過程中的細(xì)胞活力。即用型細(xì)胞凍存培養(yǎng)基便捷的細(xì)胞凍存培養(yǎng)基試劑無需滴定DMSO濃度,且可提供不含DMSO的制劑版本。CryoStor?細(xì)胞凍存培養(yǎng)基提供2%、5%和10%濃度選擇,以及不含DMSO的制劑版本CryoSOFree?。pZerve?是一種同時適合含血清培養(yǎng),或不含二甲基亞砜(DMSO)、胎牛血清或其他動物來源...
細(xì)胞凍存篇凍存原則細(xì)胞凍存原則為“慢凍”,即讓細(xì)胞在緩慢降溫的條件下逐漸冷凍。如果直接將細(xì)胞懸液放在**溫下快速冷凍,細(xì)胞會受到冷凍損傷而死亡。在凍存液中添加的保護(hù)劑(如DMSO、甘油)和在凍存盒中添加的異丙醇,都起到程序性降溫的作用。DMSO使用注意事項(xiàng)DMSO能夠快速穿透細(xì)胞膜進(jìn)入細(xì)胞中,延緩溫度下降速度,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成,從而起到保護(hù)細(xì)胞的作用。需注意的是,DMSO溶于培養(yǎng)基時,將釋放大量熱量,所以細(xì)胞凍存液需提前配制,不能直接將DMSO加入含有細(xì)胞的培養(yǎng)基中,避免燙傷細(xì)胞。另外,DMSO屬于致*物質(zhì),使用時應(yīng)戴好手套,規(guī)范操作。程序凍存液配方程序凍存液成分一般由基礎(chǔ)培養(yǎng)基、...
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保種非常常用的一種辦法,在細(xì)胞凍存中有很多非常關(guān)鍵的因素,其中細(xì)胞凍存液是細(xì)胞凍存**關(guān)鍵的要素之一,是細(xì)胞凍存所必須的物質(zhì)。細(xì)胞凍存的作用不僅*是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,還可以進(jìn)行售賣、運(yùn)輸?shù)仁马?xiàng),所以說選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。無血清細(xì)胞凍存液作為細(xì)胞凍存液的一種,那么無血清細(xì)胞凍存液的優(yōu)點(diǎn)有哪些呢?很多所使用的傳統(tǒng)的細(xì)胞凍存液的成份主要是:新鮮的培養(yǎng)基,其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。凍存的方法:將冷凍管置于4℃條件喜愛10分鐘,接著在-20℃的條件下30分鐘,-80℃的條件下保存16-18個小時(或隔夜保存也可以),**后再液氮的環(huán)境中進(jìn)...
適用于凍存各種細(xì)胞系、原代細(xì)胞3.無需程序降溫,可直接放置-80℃凍存,操作簡單4.不含血清,**減少細(xì)胞污染5.因不含血清,批次間差異小6.無需液氮,-80℃冰箱長期凍存7.可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞凍存時可節(jié)省篩選過程溫馨提示:1.化學(xué)組成明確,以DMEM為母液,含有DMSO,不含牛血清或其他蛋白成分。2.獨(dú)特的細(xì)胞保護(hù)配方,在凍存過程中細(xì)胞可直接放入-70℃冰箱,無需繁瑣的程序降溫操作。3.不含牛血清或其他蛋白成分,不引入造成細(xì)胞種子污染的外源因子,如各種牛源病毒和支原體等。4.不含牛血清或其他蛋白成分,同樣適用于無血清培養(yǎng)的細(xì)胞凍存。5.不含牛血清或其他蛋白成分,非常適合...
在細(xì)胞培養(yǎng)中,細(xì)胞凍存是**關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一,尤其在細(xì)胞***、細(xì)胞存儲中對細(xì)胞凍存更有特殊要求,下面就根據(jù)降溫速度以及凍存液組分對細(xì)胞凍存做詳細(xì)介紹。根據(jù)降溫速度區(qū)分,細(xì)胞凍存可以分為程序降溫凍存與非程序降溫凍存。根據(jù)凍存方式不同可以分為慢速凍存(程序降溫法)與快速凍存(非程序降溫法)。程序降溫凍存技術(shù)要點(diǎn)是慢凍,標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1~-2/℃min;當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min。之前,常用的傳統(tǒng)方法是將凍存管置于4℃30分鐘--->-20℃60分鐘--->-80℃過夜--->液氮罐。不過,由于步驟較多,間隔時間又長,很容易遺忘。之后,人們也開始使用程序...
重懸細(xì)胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無血清凍存液注意事項(xiàng):1、請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細(xì)胞,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。細(xì)胞凍存概念:細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而...
無蛋白(2)方便:即取即用,無需配制(3)簡潔:無需程序降溫,一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存。(4)高效:可一步實(shí)現(xiàn)細(xì)胞凍存,細(xì)胞復(fù)活率高,活力強(qiáng)。二、組織凍存試劑1.組織保存液產(chǎn)品概述:用于保存、運(yùn)輸和細(xì)胞樣品。所有成分對細(xì)胞組織497c364a-6562-42a8-8dcc-ca害作用,不影響保存細(xì)胞或組織的生理功能。產(chǎn)品特點(diǎn):(1)保存時間長:組織和細(xì)胞在低溫條件(2-8℃)下可保持形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活性至少72小時,保存和運(yùn)輸?shù)慕M織細(xì)胞可用于單細(xì)胞測序。(2)操作簡單:組織或細(xì)胞樣品浸沒到溶液中即可。(3)成分明確:無血清,無蛋白,安全性高。(4)使用方便:即用即取,無需配制(5)質(zhì)量穩(wěn)定可靠,...
重懸細(xì)胞,調(diào)節(jié)密度至1-5x10*↑/mL。3、將加有凍存液的細(xì)胞懸液分裝至凍存管中。4、將凍存管直接轉(zhuǎn)移至-80C水箱中冷凍保存。5、儲存條件:2-8C保存,年有效:-20C保存,兩年有效。無血清凍存液注意事項(xiàng):1、請選擇對數(shù)生長期細(xì)胞進(jìn)行凍存。2、凍存液加入細(xì)胞后,請盡快放入-80C冰箱凍存。3、本產(chǎn)品凍存細(xì)胞可以在-80°C冰箱保存3年以上。4、若需長期凍存細(xì)胞,請轉(zhuǎn)移至液氮罐中貯存。5、凍存液中含DMSO成分,為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套。細(xì)胞凍存概念:細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而...
常須將培養(yǎng)物進(jìn)行冷凍保存,并在需要的時候重新復(fù)蘇和培養(yǎng)。目前,細(xì)胞凍存**常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)局的緩慢冷凍法保存細(xì)胞。無血清非程序細(xì)胞凍存液,添加了細(xì)胞沉降穩(wěn)定劑可防止或延緩細(xì)胞在凍存過程中的沉降,防止細(xì)胞互相擠壓,影響細(xì)胞凍存效果。另外添加了細(xì)胞膜保護(hù)劑。滲透性細(xì)胞膜內(nèi)保護(hù)劑、非滲透性細(xì)胞保護(hù)劑等多種冷凍保護(hù)劑,它們在溶液中同水分子結(jié)合,發(fā)生水合作用,弱化水的結(jié)晶過程使溶液的粘性增加從而減少冰晶的形成,能**降低細(xì)胞在凍存過程中冰晶對于細(xì)胞的損傷,有效提高細(xì)胞復(fù)蘇率和活力。同時無任何外源血清成分,減少細(xì)胞污染機(jī)會,并且無需繁瑣的程序凍存步驟,節(jié)省了大量時間和...
不含血清及動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細(xì)胞安全成分明確,批次間差異小既適用于一般細(xì)胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細(xì)胞的凍存無需程序降溫,可直接放置-80℃冰箱長期凍存,操作簡單可培養(yǎng)板整板凍存,例如雜交瘤細(xì)胞的凍存,省時高效。細(xì)胞凍存是細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)中細(xì)胞進(jìn)行保種并長期保存的常用方法,其中細(xì)胞凍存液,作為細(xì)胞凍存時必須使用的一種溶液,不僅更是說只是用來進(jìn)行細(xì)胞的保存,在細(xì)胞的購買、寄贈、交換和運(yùn)送過程中也起著關(guān)鍵作用,因此選擇一款好的細(xì)胞凍存液就尤為重要。如果不加任何條件直接凍存細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)和外環(huán)境中的水都會形成冰晶,能導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)發(fā)生機(jī)械損傷、電解質(zhì)升高、...
細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的主要方法之一。利用凍存技術(shù)將細(xì)胞置于-196℃液氮中低溫保存,可以使細(xì)胞暫時脫離生長狀態(tài)而將其細(xì)胞特性保存起來,這樣在需要的時候再復(fù)蘇細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。而且適度地保存一定量的細(xì)胞,可以防止因正在培養(yǎng)的細(xì)胞被污染或其他意外事件而使細(xì)胞丟種,起到了細(xì)胞保種的作用。除此之外,還可以利用細(xì)胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運(yùn)送某些細(xì)胞。細(xì)胞凍存時向培養(yǎng)基中加入保護(hù)劑--終濃度5%.15%的甘油或二甲基亞砜(DMSO),可使溶液冰點(diǎn)降低,加之在緩慢凍結(jié)條件下,細(xì)胞內(nèi)水分透出,減少了冰晶形成,從而避免細(xì)胞損傷。采用"慢凍快融"的方法能較好地保證細(xì)胞存活。標(biāo)準(zhǔn)冷凍速度開始為-1到-2℃...
本發(fā)明涉及生物醫(yī)學(xué)技術(shù)領(lǐng)域:,尤其涉及一種細(xì)胞凍存液,具體涉及一種用于干細(xì)胞的凍存液。背景技術(shù)::臍帶血是胎兒娩出、臍帶結(jié)扎并離斷后殘留在胎盤和臍帶中的血液,通常是廢棄不用的。近十幾年的研究發(fā)現(xiàn),臍帶血中含有可以重建人體造血和免疫系統(tǒng)的造血干細(xì)胞,可用于造血干細(xì)胞移植,***80多種疾病。因此,臍帶血已成為造血干細(xì)胞的重要來源,特別是無血緣關(guān)系造血干細(xì)胞的來源。也是一種非常重要的人類生物資源。干細(xì)胞***是將具有不斷自我繁殖能力和多向化潛能的干細(xì)胞在體外培養(yǎng)后,再將其移植入患者受損或缺損組織中,從而實(shí)現(xiàn)對損傷組織的補(bǔ)充和修復(fù)。目前干細(xì)胞采集后,需要加入保存液進(jìn)行冷凍保存,細(xì)胞凍存液是細(xì)...