插入突變風(fēng)險評估一些整合性載體（如逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒、轉(zhuǎn)座子）可將外源基因插入整合到細(xì)胞基因組中，這可能會導(dǎo)致關(guān)鍵基因突變或jihuo原基因，從而導(dǎo)致惡性liu風(fēng)險增加。影響插入突變的關(guān)鍵風(fēng)險因素包括：（1）載體的整合特征，如插入位點的偏好性；（2）載體的設(shè)計，如增強子、啟動子等構(gòu)建元件的活性，影響鄰近基因的潛力；產(chǎn)生剪接突變體的潛在剪接位點或多聚腺苷酸信號等；（3）細(xì)胞載體拷貝數(shù)；4）轉(zhuǎn)基因表達(dá)產(chǎn)物的功能活性（如與細(xì)胞生長調(diào)控相關(guān)）和表達(dá)水平；5）靶細(xì)胞群的轉(zhuǎn)化可能性，這可能與細(xì)胞的分化狀態(tài)、增殖潛力、體外培養(yǎng)條件和體內(nèi)植入環(huán)境等有關(guān)。非病毒定點整合CAR-T技術(shù)的開發(fā)和應(yīng)用。上海慢病毒整合位點

遺傳物質(zhì)整合到宿主基因組中、患者長期處于免疫抑制狀態(tài)誘發(fā)（惡性）形成；建議研究病毒整合至目標(biāo)細(xì)胞的典型特征，包括優(yōu)勢插入位點、插入拷貝數(shù)、優(yōu)勢克隆異常生長等。關(guān)注基因附近是否存在優(yōu)先整合情況及潛在的致風(fēng)險。致瘤性的風(fēng)險：考慮產(chǎn)品特征，所使用整合性載體（如逆轉(zhuǎn)錄病毒或轉(zhuǎn)座子等）將外源基因插入到基因組中可能會插入到原基因附近jihuo該基因?qū)е禄颊唢L(fēng)險增加?；騴hiliao產(chǎn)品可能會采用修飾宿主基因組的技術(shù)，并有可能在宿主細(xì)胞或組織中持續(xù)存在。很多基因zhiliao載體的基因整合不會指向基因組的特定位點，可能在整合位點處產(chǎn)生插入突變、或jihuo整合位點附近的原基因等，進(jìn)而破壞重要基因功能或增加惡性的風(fēng)險。病毒整合位點CRO病毒整合位點，推薦唯可生物，實驗實力強，專業(yè)性高，檢測效率高，結(jié)果準(zhǔn)確率高。

確證性臨床試驗。與其它藥物一樣，免疫細(xì)胞zhiliao產(chǎn)品的確證性研究（或關(guān)鍵研究）的目的是確認(rèn)探索性研究中初步提示的療效和安全性，為注冊提供關(guān)鍵的獲益/風(fēng)險評估證據(jù)。確證性研究的目標(biāo)人群、主要和次要終點的選擇、研究持續(xù)時間、樣本量估計和統(tǒng)計學(xué)設(shè)計等應(yīng)符合具體zhiliao領(lǐng)域的一般指南要求。對照和設(shè)盲，良好的隨機對照試驗（randomizedcontrolledtrial,RCT）是確證性研究中優(yōu)先推薦的設(shè)計方法，該研究方法可以消除受試者的基線差異、減少偏倚，有利于客觀評價試驗產(chǎn)品的zhiliao效果。對于某些適應(yīng)癥，可能缺少合適的對照藥物，或倫理上不宜采用安慰劑作為對照藥，可考慮與比較好支持性護(hù)理或zhiliao進(jìn)行對照。

慢病毒整合事件要素及檢測方法要求：對于食藥監(jiān)局指導(dǎo)性文件和既往研究內(nèi)容，我們不難發(fā)現(xiàn)對于慢病毒整合檢測所謂整合事件至少包含三個要素：整合位置；整合方向；特定整合位置和整合方向的juedui克隆數(shù)目；因此檢測在定性和定量性能方面都有要求，檢測方法需要結(jié)合臨床樣本進(jìn)行分析性能進(jìn)行系統(tǒng)驗證。慢病毒整合位點檢測方法，目前檢測慢病毒整合位點的主要平臺為高深度測序（NGS)。而目前較為成熟已經(jīng)應(yīng)用于工業(yè)產(chǎn)品檢測及臨床研究的整合位點富集建庫方法為機械片段化及依賴于接頭的擴增子建庫(LM-PCR,如INSPIIRED),已經(jīng)應(yīng)用于多個CART19臨床項目的安全性評估及與CAR-T細(xì)胞增值相關(guān)的回顧yao效學(xué)分析。如何確定慢病毒/逆轉(zhuǎn)錄病毒前病毒整合位點？

物流：夠低溫嗎？CGT 供應(yīng)鏈本質(zhì)上是以患者為中心的，因為患者既可以是制造的上游也可以是下游。通過自體療法，從體內(nèi)提取細(xì)胞，進(jìn)行操作，然后將其注射回同一位患者體內(nèi)，從而創(chuàng)建了一個被稱為“靜脈到靜脈”的供應(yīng)鏈。一個完美的 CGT 供應(yīng)鏈需要從頭到尾進(jìn)行嚴(yán)格的流程控制。供應(yīng)鏈合作伙伴必須采用多種策略來保護(hù)患者以及試驗的完整性。考慮到每個方案都需要不同的供應(yīng)鏈，這些策略會有所不同。冷鏈需要成為 CGT 供應(yīng)鏈的一個組成部分，因為它必須能夠在整個存儲和分配過程中保持huoti產(chǎn)品的活力，一直到患者手中。CAR-T整合位點，推薦唯可生物，實驗實力強，專業(yè)性高，檢測效率高，結(jié)果準(zhǔn)確率高。載體整合位點政策

整合位點相比γ-逆轉(zhuǎn)錄病毒更安全，成本更高。上海慢病毒整合位點

對照設(shè)計，早期探索性臨床試驗以觀察安全性為主，對照設(shè)計的重要性不如確證性試驗，但如果合并用藥可能影響本品的不良反應(yīng)觀察，或者在早期探索性研究中初步觀察產(chǎn)品活性，申請人可能有必要設(shè)置對照。當(dāng)臨床上對疾病進(jìn)程的認(rèn)識尚不充分，或入組受試者的疾病嚴(yán)重程度差異很大時，設(shè)置平行對照組對于評價試驗產(chǎn)品的安全性或活性更加重要。如果需要設(shè)置對照，對照品的選擇可能考慮研究目的、疾病的進(jìn)展程度和嚴(yán)重性、zhiliao選擇等多重因素，例如，早期探索性研究采16用安慰劑或標(biāo)準(zhǔn)zhiliao對照可能有助于評價試驗產(chǎn)品的安全性。上海慢病毒整合位點