RNA提?。侯A備工作(1)塑料制品:盡量使用一次性無菌塑料制品。已標明RNase-free的塑料制品,如沒有開封使用過,通常不必再處理。處理的步驟如下:O在玻璃燒杯中注入去離子水,加入DEPC使其終濃度為0.05%~0.1%(DEPC-H2O)。(DEPC二乙基焦碳酸酯為活性很強的劇毒物,須在通風櫥中小心使用)O將待處理的塑料制品放入一個可以高溫滅菌的容器中,注入DEPC-H2O,使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中,在通風柜中37℃或室溫下處理過夜。O將DEPC-H2O小心倒入廢液瓶中,將裝有DEPC-H2O處理過的塑料制品的容器以鋁箔封口,高溫高壓蒸汽滅菌至少30分鐘。O滅菌塑料制品烘烤干燥,置潔凈處備用。(2)玻璃和金屬物品250℃烘烤3小時以上。植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:是富含多酚或淀粉的植物組織中,提取高純度的總RNA。徐州RNA提取試劑推薦廠家
植物花總RNA提取試劑盒:采用進口硅基質(zhì)膜制作的總RNA吸附柱,配合特殊的提取緩沖液,可以從多糖多酚植物的根、莖、葉以及花組織中快速提取總RNA,40~60分鐘內(nèi)即可完成提取過程,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實驗。特殊的提取緩沖液保證特殊植物材料中的總RNA充分溶解。總RNA提取速度快,提取效率高。有效去除植物花組織中的多糖、多酚類等雜質(zhì),提取純度高。細菌總RNA提取試劑盒:本試劑盒可以快速從細菌體內(nèi)提取總RNA,提取的總RNA純度高,沒有DNA和蛋白質(zhì)污染,適用于RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northernblot雜交等實驗。吸附柱特異吸附總RNA,提取速度快。提取效率高。有效去除蛋白質(zhì)、鹽類、脂類等雜質(zhì),提取純度高。昆明正規(guī)RNA提取試劑進貨價細胞質(zhì)和細胞核RNA提取試劑盒特點:有效分離和提取細胞質(zhì)RNA,與細胞核RNA。
與DNA不同,RNA一般為單鏈長分子,不形成雙螺旋結(jié)構(gòu),但是很多RNA也需要通過堿基配對原則形成一定的二級結(jié)構(gòu)乃至三級結(jié)構(gòu)來行使生物學功能。RNA的堿基配對規(guī)則基本和DNA相同,不過除了A-U、G-C配對外,G-U也可以配對。在細胞中,根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA(轉(zhuǎn)運RNA),rRNA(核糖體RNA),mRNA(信使RNA)。mRNA是合成蛋白質(zhì)的模板,內(nèi)容按照細胞核中的DNA所轉(zhuǎn)錄;tRNA是mRNA上堿基序列(即遺傳密碼子)的識別者和氨基酸的轉(zhuǎn)運者;rRNA是組成核糖體的組分,是蛋白質(zhì)合成的工作場所。
環(huán)狀RNA是一類產(chǎn)生于RNA剪切過程中的封閉喚醒RNA分子,主要由外顯子和(或)內(nèi)含子構(gòu)成。環(huán)狀RNA參與了復雜的RNA-RNA的相互作用網(wǎng)絡,在基因轉(zhuǎn)錄后調(diào)控中發(fā)揮作用;環(huán)狀RNA可直接與蛋白質(zhì)結(jié)合,也可通過RNA介導間接與蛋白質(zhì)發(fā)生關(guān)聯(lián),影響蛋白質(zhì)功能;部分環(huán)狀RNA具有翻譯功能。研究發(fā)現(xiàn),環(huán)狀RNA與一些疾病的發(fā)生、發(fā)展具有直接關(guān)聯(lián),為一些疾病發(fā)病機制提供了新思路,除此之外,環(huán)狀RNA在與衰老、炎癥等生理、病理現(xiàn)象方面也有重大應用。在實際RNA提取中,有幾個提取原則:保證RNA一級結(jié)構(gòu)的完整性。
植物RNA提取試劑產(chǎn)品特點:1.針對植物材料獨特配置,操作更簡單、流程更優(yōu)化。2.配有高效的DNaseⅠ,可有效去除DNA污染。3.配有CS過濾柱,可有效去除其它雜質(zhì)。4.RNA純度更高,無雜質(zhì)殘留,特別適合于對純度要求很高的下游實驗。5.操作安全可靠,無需酚抽提,無需氯化銫梯度離心,無需氯化鋰或乙醇沉淀。用途植物RNA提取試劑可從植物Chemicalbook組織,特別是富含多酚或淀粉的植物組織中(如馬鈴薯塊莖、白松松針或嫩苗和西紅柿葉等),提取高純度的總RNA。操作步驟先將RNaseFree離心管置于干冰中再放入研磨好的冷凍的組織樣品。準備新鮮植物組織,在液氮中研磨成粉狀,如果是干種子,可在室溫研磨。處理過的植物材料應一直保持置于-70℃冷凍保存,直至加入提取試劑并懸浮。在細胞中,RNA種類繁多。根據(jù)結(jié)構(gòu)功能的不同,RNA主要分三類,即tRNA、rRNA,以及mRNA。溫州廣州RNA提取試劑
血漿/血清RNA提取試劑盒:利用吸附柱法從血清、血漿樣品中簡單快捷提取高純度高質(zhì)量的miRNA。徐州RNA提取試劑推薦廠家
總RNA提取試劑試劑能促進不同種屬不同分子量大小的多種RNA的析出。例如,從大鼠肝臟抽提的RNA瓊脂糖凝膠電泳并用溴化乙啶染色,可見許多介于7kb和15kb之間不連續(xù)的高分子量條帶(mRNA和hnRNA成分),兩條優(yōu)勢核糖體~5kb(28S)和~2kb(18S),低分子量RNA介于0.1和0.3kb之間(tRNA,5S)。當抽提的RNA用TE稀釋時其A260/A280比值≥1.8。注意如果是普通瓊脂糖凝膠電泳,28S的位置大約在2kb,18S大約在1kb的位置,不同濃度的凝膠位置變化較大。注意事項:樣品用總RNA提取試劑勻漿后,如果不即刻加入氯仿之前,置于-70°C下可放置一個月以上。保存在75%乙醇中的RNA沉淀,2-8°C可以保存一周,-20°C條件下可以保存1年。RNA半衰期比較短,容易降解,建議提取后盡快進行后續(xù)實驗,如反轉(zhuǎn)錄成cDNA,NorthernBlot等徐州RNA提取試劑推薦廠家