運用 CRISPR-Cas9 系統(tǒng)時，設(shè)計特異性引導(dǎo) RNA（gRNA）精細靶向 Cdx 基因特定序列，Cas9 蛋白隨即切割 DNA 雙鏈，制造雙鏈斷裂。細胞自主修復(fù)過程中，通過插入、缺失或替換堿基，實現(xiàn) Cdx 基因定點突變。這一操作能模擬人類先天性疾病相關(guān)基因突變場景，如敲除斑馬魚 Cdx 基因關(guān)鍵位點，幼魚精細呈現(xiàn)脊柱發(fā)育不全、腸道畸形等表型，與人類患者病癥高度相似，為探究疾病發(fā)病分子機制提供活的模型。TALEN 技術(shù)則利用人工設(shè)計的轉(zhuǎn)錄jihuo樣效應(yīng)因子核酸酶，同樣精細定位 Cdx 基因，誘導(dǎo)突變。相較于 CRISPR-Cas9，它在某些復(fù)雜基因位點編輯上更具優(yōu)勢，脫靶率更低，保障實驗精細性。這些基因編輯技術(shù)不僅用于構(gòu)建疾病模型，還助力解析 Cdx 基因功能網(wǎng)絡(luò)，通過逐一敲除上下游調(diào)控基因，勾勒完整調(diào)控圖譜，明晰胚胎發(fā)育指揮鏈。光照周期會影響斑馬魚的生物鐘，進而改變其行為。斑馬魚性別決定相關(guān)基因

PDX（Patient-Derived Xenograft）斑馬魚模型是tumor研究領(lǐng)域的一項重大突破。它將患者來源的tumor組織移植到斑馬魚體內(nèi)，為精細醫(yī)學(xué)研究開辟了新途徑。斑馬魚具有獨特的生物學(xué)特性，其胚胎透明，便于在顯微鏡下直接觀察腫瘤細胞的生長、侵襲和轉(zhuǎn)移過程。而且斑馬魚繁殖迅速、子代數(shù)量多，能在短時間內(nèi)提供大量實驗樣本。在 PDX 斑馬魚模型中，tumor組織在斑馬魚體內(nèi)微環(huán)境的作用下不斷發(fā)展，研究人員可以借此深入探究tumor的生物學(xué)行為，例如腫瘤細胞與血管生成的關(guān)系。通過對不同患者來源tumor的移植研究，能夠篩選出更具針對性的醫(yī)療藥物和方案，提高ancer醫(yī)療的有效性，為攻克ancer難題帶來新的曙光。斑馬魚性別決定相關(guān)基因斑馬魚視覺系統(tǒng)發(fā)達，能敏銳感知光線變化與周圍物體移動。

在斑馬魚胚胎發(fā)育的奇妙進程里，cdx基因宛如一位精細無誤的指揮家，把控著關(guān)鍵節(jié)奏。cdx基因家族包含多個成員，它們早早就在胚胎中“嶄露頭角”，在受精卵分裂、分化初期便積極“發(fā)號施令”。斑馬魚胚胎要從一團初始的全能細胞逐步構(gòu)建出復(fù)雜有序的軀體結(jié)構(gòu)，cdx起著決定性引導(dǎo)作用。它精細調(diào)控中胚層與內(nèi)胚層細胞的命運走向，決定哪些細胞將發(fā)育成肌肉組織、哪些投身腸道構(gòu)建。研究發(fā)現(xiàn)，當cdx基因功能受干擾時，斑馬魚胚胎后部發(fā)育明顯失常，脊柱彎曲、尾部短小甚至缺失，腸道也蜷縮不成形，蠕動功能大受影響。cdx基因通過jihuo一系列下游靶基因，促使細胞按預(yù)定程序分化、遷移，好似精密齒輪組有序運轉(zhuǎn)，一步步搭建起斑馬魚幼體完整架構(gòu)，為其后續(xù)健康生長筑牢根基。

斑馬魚實驗?zāi)Ｐ驮谒幬镅邪l(fā)過程中具有明顯的優(yōu)勢，為藥物篩選和評價提供了高效、快速和經(jīng)濟的平臺。其繁殖速度快、子代數(shù)量多的特點使得能夠在短時間內(nèi)對大量化合物進行高通量篩選。在藥物篩選實驗中，將斑馬魚胚胎或幼魚暴露于不同的藥物或化合物中，通過觀察斑馬魚的生長發(fā)育、生理功能、行為變化以及疾病模型中的表型改善情況等指標，來評估藥物的有效性和安全性。例如，在抗癲癇藥物研發(fā)中，可以利用斑馬魚癲癇模型，觀察候選藥物對斑馬魚癲癇發(fā)作的抑制作用。如果一種藥物能夠明顯減少斑馬魚的癲癇發(fā)作頻率和強度，并且對斑馬魚的正常生長發(fā)育沒有明顯的不良影響，那么該藥物就具有進一步開發(fā)的潛力。其肝臟在物質(zhì)代謝等方面承擔重要任務(wù)。

看似專注于軀體架構(gòu)規(guī)劃的斑馬魚cdx基因，實則與神經(jīng)發(fā)育也有著千絲萬縷聯(lián)系。在胚胎腦部及脊髓雛形初現(xiàn)階段，cdx基因悄然施展影響力。它間接調(diào)控神經(jīng)干細胞的增殖與分化節(jié)拍，確保生成足量神經(jīng)元，滿足斑馬魚早期感知外界、驅(qū)動身體所需。舉例而言，科研人員利用基因編輯技術(shù)適度降低cdx表達量后，斑馬魚幼魚出現(xiàn)游泳姿態(tài)異常，頻繁打轉(zhuǎn)、失衡側(cè)翻。深入探究得知，脊髓中運動神經(jīng)元發(fā)育受損，軸突延伸受阻，無法精細連接肌肉纖維，致使肌肉接收指令紊亂。cdx基因還參與構(gòu)建神經(jīng)回路，協(xié)同其他神經(jīng)發(fā)育關(guān)鍵基因，塑造從感覺輸入到運動輸出的信息傳遞路徑，助力斑馬魚神經(jīng)系統(tǒng)精細“布線”，在水中靈動游弋、機敏避險。斑馬魚的骨骼系統(tǒng)雖簡單，但支撐身體和保護內(nèi)臟。斑馬魚cas9敲除

斑馬魚的眼睛位置獨特，視野范圍較廣，利于捕食和防御。斑馬魚性別決定相關(guān)基因

利用反義maka啉環(huán)寡核苷酸（Morpholino）特異性阻斷mRNA的翻譯或正確剪切，從而降低基因的表達水平，用于胚胎早期發(fā)育中基因功能研究；利用CRISPR/Cas9技術(shù)特異性地瞬時破壞基因的編碼序列，從而降低基因蛋白產(chǎn)物的表達水平來研究基因的功能，用于各個階段的基因功能研究。破壞該基因正常表達，主要用于在動物模型中研究基因的功能等。定點插入外源核酸片段，用于標記基因的精細表達模式、破壞該基因正常表達、構(gòu)建點突變、實現(xiàn)時間空間上控制基因表達等。斑馬魚性別決定相關(guān)基因