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福建酵母文庫

來源: 發(fā)布時間:2023-01-16

通過酵母雙雜交文庫進行了互作蛋白的篩選,結果顯示TaTIFY9可以與TaSRL1相互作用(下圖A),并通過Bi-FC、熒光互補實驗得以證實(圖B-C)。TaTIFY9屬于茉莉酸信號途徑關鍵因子JAZ家族的成員之一。RT-PCR顯示TaTIFY9也主要表達于小麥根部,外源施加茉莉酸可以***誘導TaTIFY9表達。這一結果表明,TaSRL1可能通過與TIFY9結合介導了茉莉酸對根生長的抑制。已有研究表明 ERF 蛋白可以特異性結合到靶基因啟動子序列中的 GCC-box 序列。TaSRL1 屬于 ERF 家族。在生長素轉運基因 TaPIN2 的啟動子序列中含有一個 GCC-box 序列。酵母單雜交實驗顯示,TaSRL1 可以直接與 TaPIN2 啟動子結合并***其表達(圖 A),但該***作用會被TaSRL1的互作蛋白TaTIFY9 所抑制(圖 B和C)。酵母雙雜交優(yōu)惠快速出報告品牌歐易生物特色科學嚴謹準確。福建酵母文庫

酵母雜交試驗:隨著分子生物學研究進入以蛋白質組學為標志的后基因組時代,蛋白質-蛋白質相互作用、蛋白質-DNA相互作用已成為互作組學研究的熱門主題。人類基因粗略約編碼2萬種蛋白,只算一對一的相互作用種類也有12萬到100萬種。而加上動態(tài)變化,每個物種、個體、細胞中都存在著一張張不同的互作網(wǎng)絡圖,這一張張圖譜中,蘊藏著各種生命的奧秘。有兩種通用的相互作用組圖譜繪制方式:第一種酵母雜交試驗,通過偶聯(lián)基因表達體現(xiàn)細胞內發(fā)生直接相互作用的蛋白對。第二種是通過抗體/標簽分離純化復合體,然后用質譜鑒定復合體內部組分,識別直接相互作用或間接相互作用的蛋白質。兩種高通量方法彼此互補,相互驗證。青海什么是酵母文庫酵母文庫構建方法酵母篩庫構建酵母文庫的意義。

酵母雙雜交文庫:本研究通過藍/紅光誘導青蒿中青蒿素生物合成基因的表達,使用轉錄組分析確定了一個WRKY轉錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關基因的表達。實驗表明AaWRKY9通過光依賴JA信號通路調節(jié),在青蒿素生物合成中發(fā)揮重要作用,AaWRKY9通過與AaDBR2和AaGSW1的啟動子結合正向調節(jié)青蒿素的積累。此外,JA信號通路中的抑制因子AaJAZ9與AaWRKY9相互作用,并抑制其轉錄***活性,而在MeJA存在情況下,AaJAZ9被降解,AaWRKY9的轉錄***活性增加,進而促進青蒿素生物合成基因的表達。酵母雙雜交文庫結果表明,AaWRKY9有助于光和JA信號調節(jié)青蒿素的生物合成,為兩種信號途徑在植物次生代謝物合成中的整合調控提供了新見解。

利用酵母雙雜交技術進行篩選,結果顯示SP8可以與水稻OsMYC3蛋白相互作用,并且二者互作關系通過酵母一對一互作、BiFC、Co-IP、LCI實驗得以驗證(圖A-C)。利用截短的SP8進行酵母一對一互作和Co-IP檢測表明,與OsMYC3的結合依賴于SP8的NTP結構域(圖D-E);同樣,OsMYC3的TAD結構域也是二者互作所必不可少的(圖F)。酵母雙雜交、BiFC實驗表明,OsMYC3可以與OsJAZ相互作用。經(jīng)茉莉酸處理,野生對照株根的長度明顯被抑制、一系列JA生物合成和信號傳導相關基因表達量上升,但Osmyc3突變體中抑制程度減輕、JA相關基因表達量上升減少。酵母雜交案例專業(yè)的碩博團隊。

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