通過酵母雙雜交進(jìn)行篩選,結(jié)果顯示 SWC6 可以在藍(lán)光下與 CRY1 相互作用(圖 A-C)。同樣,酵母雙雜交實驗顯示 CRY2 也可以在藍(lán)光下與 SWC6 相互作用(圖 D)。并通過 pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗(圖 E-L)證實 CRY1、CRY2 與 SWC6 的結(jié)合是藍(lán)光依賴性的。SWC6 是真核生物中已報道的 SWR1 復(fù)合物亞基,負(fù)責(zé)催化 H2A.Z 在染色質(zhì)上的替換。已報道 SWR1 復(fù)合物中 SWC6 可以與 ARP6 亞基結(jié)合。Pull-down、split-LUC、semi-in vivo pull-down、Co-IP 實驗(圖 A-H)顯示,CRY1、CRY2 可以藍(lán)光依賴性與 ARP6 結(jié)合。專業(yè)化的篩庫流程,多重質(zhì)檢保證質(zhì)量。初篩+復(fù)篩提高目標(biāo)陽性克隆質(zhì)粒精確度。陜西生物技術(shù)酵母文庫做什么
酵母文庫篩選:為了系統(tǒng)地揭示調(diào)控叢枝菌根共生的轉(zhuǎn)錄因子,研究者以51個水稻基因的啟動子為誘餌,利用包含1570個水稻全長轉(zhuǎn)錄因子的文庫進(jìn)行了酵母單雜交篩選。這51個基因主要是已報道的參與或調(diào)節(jié)菌根共生的基因。文庫篩選發(fā)現(xiàn)了一個由266個轉(zhuǎn)錄因子和47個啟動子高度連接的網(wǎng)絡(luò),稱之為"叢枝菌根共生酵母單雜交網(wǎng)絡(luò)(YAM)"。平均每個啟動子可以和4個轉(zhuǎn)錄因子互作。266個轉(zhuǎn)錄因子分屬至少11個轉(zhuǎn)錄因子家族。72%(192個)的YAM轉(zhuǎn)錄因子在根中存在表達(dá)(FPKM>1)。與非定殖根相比,19個YAM轉(zhuǎn)錄因子在叢枝菌根***定殖的根中表達(dá)上調(diào)。山西發(fā)展酵母文庫報價什么是酵母文庫的構(gòu)建? 只需構(gòu)建自己需要研究蛋白的BD載體,就能和本司**儲備的酵母文庫進(jìn)行篩庫實驗。
酵母雙雜交表明擬南芥AtBT2蛋白可以與AtRGA互作。與對照相比,擬南芥bt1/2雙突變體幼苗高度降低,而硝酸鹽處理可以進(jìn)一步抑制其生長,外源施加GA可以回復(fù)其生長缺陷。在擬南芥中異源表達(dá)MdBT2可以明顯提高植株高度,而PAC處理則會抑制這種生長的促進(jìn)作用。在擬南芥中異源表達(dá)MdRGL3a可以明顯抑制植株生長,而硝酸鹽處理和MdBT2過表達(dá)則會緩解這種生長抑制作用。外源GA處理可以逆轉(zhuǎn)以上對植株生長的影響(圖A-D)。以上結(jié)果表明,BT蛋白通過DELLA蛋白調(diào)控植株生長,這一機(jī)制在不同的植物中具有保守性。
文庫篩選做的好,培養(yǎng)基和轉(zhuǎn)化試劑少不了。實驗做不出、克隆生長不正常的小伙伴,你是不是會懷疑培養(yǎng)基配的有問題,或者轉(zhuǎn)化試劑配的不對?歐易生物現(xiàn)隆重推出酵母雙雜、單雜篩選、一對一互作驗證的配套培養(yǎng)基、轉(zhuǎn)化試劑啦~該系列產(chǎn)品,經(jīng)歐易生物實驗室多年使用、不斷改良,質(zhì)量保證,物美價廉。所有培養(yǎng)基均無需調(diào)pH,使用方便。*需將1袋**包裝的培養(yǎng)基溶于500mlddH2O中,然后121℃高壓滅菌15min,固體培養(yǎng)基冷卻至50℃左右即可倒板使用,液體培養(yǎng)基冷卻至室溫后直接使用。從現(xiàn)在開始再也不用為重復(fù)配制試劑、重復(fù)做實驗、不停的花費時間驗證而頭禿了。歐易生物酵母文庫擁有GAL4系統(tǒng)、泛素系統(tǒng),單雜、雙雜等多種酵母雜交篩選方法。
歐易生物酵母文庫技術(shù)發(fā)表的又一篇高水平研究論文。植物***茉莉酸(JA)參與植物許多發(fā)育過程的調(diào)控。JAZ蛋白是茉莉酸信號反應(yīng)的阻遏物,通過抑制JA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)劑來負(fù)向調(diào)節(jié)JA信號。花青素和原花青素是種子、葉、花和果實中重要的植物次生代謝產(chǎn)物,可充當(dāng)抗氧化劑,幫助***活性氧和對**老,對人類健康具有重要價值。已有研究表明,花青素和原花青素的生物合成基因的轉(zhuǎn)錄受MYB、basichelix-loop-helix(bHLH)及WD40蛋白的調(diào)控。其中,蘋果MYB轉(zhuǎn)錄因子MdMYB9參與調(diào)控JA介導(dǎo)的花青素和原花青素的生物合成,但其分子機(jī)制仍有待深入研究。酵母文庫"酵母"和"文庫"有什么不同。山西酵母文庫報價
酵母雜交技術(shù)是很巧妙且很好用的蛋白/蛋白,蛋白/DNA等分子互作檢測的技術(shù)。陜西生物技術(shù)酵母文庫做什么
本研究通過酵母雙雜交篩選,鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復(fù)合物關(guān)鍵亞基 SWC6、ARP6 結(jié)合,共同以藍(lán)光依賴模式調(diào)控 H2A.Z 在染色質(zhì)的沉積。藍(lán)光***的 CRY1 可以增強(qiáng) SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結(jié)合,將 SWR1 復(fù)合物募集到 HY5 靶向位置,調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá),進(jìn)而影響擬南芥下胚軸的伸長據(jù)此,本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調(diào)控的分子機(jī)制:CRY1 通過增強(qiáng) SWR1 復(fù)合物活性和 HY5 介導(dǎo) SWR1 復(fù)合物向 HY5 靶基因的募集,共同促進(jìn) H2A.Z 染色質(zhì)沉積,以調(diào)控 HY5 靶基因的表達(dá)和藍(lán)光條件下光形態(tài)建成。陜西生物技術(shù)酵母文庫做什么
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