目前,歐易生物負責該水稻轉錄因子文庫的維護和保存工作,并對廣大水稻科研工作者提供轉錄因子篩選服務。如去年歐易生物助力中國科學院分子植物科學***創(chuàng)新中心的王二濤老師應用該文庫對水稻-叢枝菌根進行了深入研究,成功構建了水稻-叢枝菌轉錄調控網絡,結果發(fā)表于《Cell》封面。截至文章發(fā)表,該文庫已收錄了1683個水稻轉錄因子,隸屬于54個家族,覆蓋預測的水稻轉錄因子總量的70%。文庫中水稻轉錄因子的a基因信息來源于PlantTFDB和KOME數據庫。文庫載體使用pGADT7,酵母菌株使用Y187,每一個轉錄因子菌株**保存于96孔板中。傳統(tǒng)酵母雜交技術應用已經30多年,技術已經成熟穩(wěn)定。四川酵母文庫規(guī)格
文章中酵母雙雜交文庫由歐易生物協助完成。近日,上海交通大學/復旦-交大-諾丁漢植物生物技術研發(fā)中心主任唐克軒課題組在New Phytologist(IF:8.512)發(fā)表了題為“AaWRKY9 contributes to light- and jasmonate-mediated to regulate the biosynthesis of artemisinin in Artemisia annua”的研究論文,揭示了青蒿轉錄因子AaWRKY9有助于光和茉莉酸信號所介導的青蒿素生物合成調控的新型分子機制,本研究通過藍/紅光誘導青蒿中青蒿素生物合成基因的表達,使用轉錄組分析確定了一個WRKY轉錄因子AaWRKY9,可明顯***青蒿素生物合成相關基因的表達。四川技術酵母文庫酵母三雜交系統(tǒng)原理酵母雙雜交文庫構建。
本研究通過酵母雙雜交篩選,鑒定到 CRY1 可以與 SWR1 復合物關鍵亞基 SWC6、ARP6 結合,共同以藍光依賴模式調控 H2A.Z 在染色質的沉積。藍光***的 CRY1 可以增強 SWC6 與 ARP6 的相互作用。此外,HY5 也可以與 SWC6、ARP6 結合,將 SWR1 復合物募集到 HY5 靶向位置,調控 HY5 靶基因的表達,進而影響擬南芥下胚軸的伸長據此,本研究提出擬南芥光形態(tài)建成調控的分子機制:CRY1 通過增強 SWR1 復合物活性和 HY5 介導 SWR1 復合物向 HY5 靶基因的募集,共同促進 H2A.Z 染色質沉積,以調控 HY5 靶基因的表達和藍光條件下光形態(tài)建成。
酵母雙雜交技術,自創(chuàng)建以來被廣泛應用于蛋白互作研究領域,在生命科學的基礎探秘研究中起著重要作用。然而該技術設計初衷,*是斯坦利先生為了完成申請學校經費的目的。該技術設計巧妙,它的許多優(yōu)點在設計之初并未顯現,反而在這么多年的高頻使用和進一步開發(fā)利用過程中越發(fā)明顯。(引用自MarcVidal&StanleyFields的“Theyeasttwo-hybridassay:stillfindingconnectionsafter25years”):(1)盡管酵母雜交技術揭示了蛋白質結合位點的詳細信息,但操作簡單。只需2個質粒+1個菌株即可完成,且有不同體系方便選擇。(2)該技術利用比較好的DNA結合位點,有效的***結構域和友好的報告基因系統(tǒng),可以放大弱互作的信號。(3)該技術可用于各種物種的蛋白互作檢測,具有物種普適性,尤其是人類蛋白。(4)衍生技術具有更***的應用,可擴展到檢測蛋白質與DNA、蛋白質與RNA、蛋白質與小分子以及其他組合之間的相互作用,甚至可實現將生理相互作用與表型數據直接關聯。當然,做過酵母雜交實驗的小伙伴應該都了解,互作結果的判斷,往往要等酵母生長好幾天才能看出來(當然,小歐認為這在偉大的科研事業(yè)過程中算不上啥),互作強弱也是主觀判斷性較強,存在假陽性。關于酵母雜交文庫構建及篩選你需要知道這些。
酵母文庫實驗:本研究發(fā)現了一個硝酸鹽響應的 BTB/TAZ 蛋白 MdBT2,它參與調節(jié)硝酸鹽介導的蘋果植株生長。利用酵母雙雜交、蛋白質 pull-down、BiFC 實驗證實,MdBT2 可以與一個 DELLA 蛋白 MdRGL3a 互作,這種互作是 MdRGL3a 蛋白經由 26S 蛋白酶體途徑的泛素化及降解所必需的。此外,異源表達 MdBT2 部分回復了 MdRGL3a 過表達所導致的擬南芥生長抑制。綜上表明,MdBT2 可以通過降低 DELLA 蛋白 MdRGL3a 的豐度促進硝酸鹽介導的植物生長。實驗室培養(yǎng)顯示,培養(yǎng) 45 天,蘋果幼苗的高度和生物量隨硝酸鹽濃度的增加而增加(圖 A-C)。推出兩套酵母雙雜交文庫構建體系MART體系。吉林應用酵母文庫做什么
使用原裝酵母技術試劑盒、培養(yǎng)基,保證實驗質量。實驗流程細致謹慎,實驗團隊經驗豐富。四川酵母文庫規(guī)格
酵母雙雜交篩選實驗:為進一步了解LEA3蛋白在干旱脅迫下調控植物生長和增強抗旱性的分子機制,本研究以干旱脅迫條件下的棉花根莖葉為材料,構建了棉花干旱脅迫酵母文庫。并以GhLEA3為誘餌,采用酵母雙雜交篩選實驗,從棉花酵母文庫中篩選獲得了GhLEA3互作蛋白,并對互作蛋白進行了GO和KEGG分析,發(fā)現其中的互作蛋白GhVDAC1主要參與鈣信號通路和cGMP-PKG信號通路,互作蛋白Gh***A參與多種生物途徑,如糖原生成和代謝途徑。此外,GhVDAC1和Gh***A受干旱脅迫誘導表達***,且在GhLEA3敲除的棉株中表達量低于野生型棉株四川酵母文庫規(guī)格
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