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磷酸化蛋白的WB第三方檢測在實操過程中有哪些注意事項？“研究完某一蛋白的磷酸化情況后比較好也要研究一下該蛋白總的表達量 ”。這有兩種方法，一是：相同的 sample 在不同的 well 中上樣兩次，可在相同的gel上，也可在不同的gel。其一壓磷酸化蛋白，另一壓該蛋白總的表達量（包括磷酸化和未磷酸化的該蛋白），甚至還可跑另一個 gel ，壓內(nèi)標。但是本人不建議如此做，因為這樣比較時誤差還是較大的。因此，比較公認的，本人也建議如此的方法，即：將原先結合上的磷酸化抗體及二抗用 strip solution 洗去。

“做miRNA下調(diào)，QPCR檢測miRNA，表達水平無變化”，這到底是怎么回事？現(xiàn)有miRNA抑制手段，無論是基于載體構建的、還是化學合成的，本質上都是用跟成熟體互補的反義miRNA（miRNA海綿體屬于不完全互補的反義RNA重復），其可以通過結合miRNA，阻斷其與靶基因結合，但并不能有效引發(fā)miRNA的降解，原因有兩方面：其一是反義RNA與miRNA結合后，序列很短，導致Dicer酶（細胞內(nèi)降解雙鏈RNA的主角）不能有效結合；其二是miRNA與Ago2以RISC復合物的形式存在，該復合物也會導致Dicer酶無法高效結合。因此，如果以反義RNA技術抑制miRNA功能，QPCR可以做，如果檢測出表達水平下降還好，即便未檢測到，也不表示抑制無效，正確的做法是直接檢測目的基因蛋白水平是否有上調(diào)。但若實驗者不清楚靶基因的情況下，不檢測到miRNA下調(diào)，心里是沒底的。第三方檢測Western Blot實驗就找瑞普信！

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第三方檢測細胞實驗，細胞復蘇、培養(yǎng)、凍存，WB代測，QPCR代測，購買原代細胞，細胞株，找成都瑞普信。細胞實驗之細胞培養(yǎng)：細胞培養(yǎng)也叫細胞克隆技術，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術。不細胞培養(yǎng)可以由一個細胞經(jīng)過大量培養(yǎng)成為簡單的單細胞或極少分化的多細胞，這是克隆技術必不可少的環(huán)節(jié)，而且細胞培養(yǎng)本身就是細胞的克隆。通過細胞培養(yǎng)得到大量的細胞或其代謝產(chǎn)物。因為生物產(chǎn)品都是從細胞得來，所以可以說細胞培養(yǎng)技術是生物技術中關鍵關鍵環(huán)節(jié)?；A實驗靠譜第三方檢測公司，第三方細胞實驗檢測服務，上瑞普信。西藏生化法第三方檢測報告

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