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如何開展qpcr第三方檢測方法的分析驗證？在檢測大量樣品前，每對引物都需要用對照樣品進行梯度稀釋實驗，以驗證方法和數(shù)據(jù)的可靠性。如果是評估商業(yè)化試劑，則比較好使用內(nèi)參基因和高、中、低豐度的目標基因來做梯度稀釋實驗，這樣可以更地了解檢測方法的分析性能。同一個基因RNA在不同樣品間表達水平可能有高有低，無論表達量高低，反轉(zhuǎn)錄效率一致的qPCR結(jié)果才能真正反映RNA水平：將 cDNA 或者 DNA 進行 4～10 倍梯度稀釋，得到至少 5 個濃度梯度的 cDNA（cDNA1，cDNA2，cDNA3，cDNA4，cDNA5），分別使用 qPCR supermix A，qPCR supermix B 針對同樣的模板進行檢測。貴州細胞計數(shù)第三方檢測公司推薦

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