缺口平移法是**常用的探針標(biāo)記法，反應(yīng)體系的主要成分有DNA酶I（DNase I）、大腸桿菌DNA聚合酶I（DNA polymerase I）、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標(biāo)記的核苷酸（如dATP、dTTP、dCTP，”P—dGTP），其原理如圖1。首先用適當(dāng)濃度的DNA酶I在探針DNA雙鏈分子上隨機(jī)切開若干個(gè)缺口（不是切斷DNA或?qū)⑵浣到猓?，然后再借助于DNA聚合酶I的5 '→3'的外切酶活性，切去5’末端的核苷酸；同時(shí)又利用該酶的5’→3’聚合酶活性，使32P標(biāo)記的互補(bǔ)核苷酸補(bǔ)入缺口．DNA聚合酶I的這兩種活性的交替作用，使缺口不斷向3’的方向移動(dòng)，DNA鏈上的核苷酸不斷為32P標(biāo)記的核苷酸所取代。由于反應(yīng)體系中含有同位素標(biāo)記的單核苷酸，使新合成的鏈帶有同位素標(biāo)記，所以缺口平移實(shí)際上是同位素標(biāo)記的核苷酸取代了原DNA鏈中不帶同位素的同種核苷酸。不隨意安裝非正規(guī)商家應(yīng)用App、及各類廣告插件App,使用正規(guī)合法App是保護(hù)個(gè)人信息;寶山區(qū)挑選探針推薦貨源

探針的標(biāo)記也可以采用隨機(jī)引物法，即向變性的探針溶液加入6個(gè)核苷酸的隨機(jī)DNA小片段，作為引物，當(dāng)后者與單鏈DNA互補(bǔ)結(jié)合后，按堿基互補(bǔ)原則不斷在其3’OH端添加同位素標(biāo)記的單核苷酸，這樣也可以獲得比放射性很高的DNA探針。DNA探針是以病原微生物DNA或RNA的特異性片段為模板，人工合成的帶有放射性或生物素標(biāo)記的單鏈DNA片段，可用來(lái)快速檢測(cè)病原體。DNA探針將一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或熒光染料等標(biāo)記后制成的探針?？膳c固定在硝酸纖維素膜的DNA或RNA進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合，經(jīng)放射自顯影或其他檢測(cè)手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在。浦東新區(qū)挑選探針現(xiàn)價(jià)電子探針是法國(guó)制成的，是在1949年用電子顯微鏡和X射線光譜儀組合而成。

早期采用的RNA探針是細(xì)胞mRNA探針和病毒RNA探針，這些RNA是在細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄或病毒復(fù)制過(guò)程中得到標(biāo)記的，標(biāo)記效率往往不高，且受到多種因素的制約。這類RNA探針主要用于研究目的，而不是用于檢測(cè)。例如，在篩選逆轉(zhuǎn)錄病毒人類免疫缺陷病毒（HIV）的基因組DNA克隆時(shí)，因無(wú)DNA探針可利用，就利用HIV的全套標(biāo)記mRNA作為探針，成功地篩選到多株HIV基因組DNA克隆。又如進(jìn)行中的轉(zhuǎn)錄分析（nuclearrunontranscrip－tionassay）時(shí)，在體外將細(xì)胞核分離出來(lái)，然后在α-32P-ATP的存在下進(jìn)行轉(zhuǎn)錄，所合成mR－NA均摻入同位素而得到標(biāo)記，此混合mRNA與固定于硝酸纖維素濾膜上的某一特定的基因的DNA進(jìn)行雜交，便可反映出該基因的轉(zhuǎn)錄狀態(tài)，這是一種反向探針實(shí)驗(yàn)技術(shù)。

2）X射線能譜分析法。無(wú)須分析晶體，而直接將探測(cè)器接收的訊號(hào)加以放大，進(jìn)行脈沖幅度分析，通過(guò)選擇不同的脈沖幅度來(lái)確定入射x射線的能量，從而區(qū)分不同的特征X射線。計(jì)算時(shí)應(yīng)用布拉格方程：nλ=2dsinθ。 [2]1、能進(jìn)行微區(qū)分析?？煞治鰯?shù)個(gè)μm3內(nèi)元素的成分。2、能進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)分析。無(wú)需把分析對(duì)象從樣品中取出，可直接對(duì)大塊試樣中的微小區(qū)域進(jìn)行分析。把電子顯微鏡和電子探針結(jié)合，可把在顯微鏡下觀察到的顯微組織和元素成分聯(lián)系起來(lái)。3、分析范圍廣。Z>4其中，波譜：Be~U，能譜：Na~U。光學(xué)顯微鏡目測(cè)系統(tǒng)。用以準(zhǔn)確選擇需要分析的區(qū)域，并作光學(xué)觀察。

3 面分析用于測(cè)定某種元素的面分布情況。方法是將X射線譜儀固定在所要測(cè)量的某元素特征X射線信號(hào)的位置上，電子束在樣品表面做光柵掃描，此時(shí)在熒光屏上便可看到該元素的面分布圖像。顯像管的亮度由試樣給出的X射線強(qiáng)度調(diào)制。圖像中的亮區(qū)表示這種元素的含量較高。定量分析定量分析時(shí)，先測(cè)得試樣中Y元素的特征X射線強(qiáng)度IY，再在同一條件下測(cè)出已知純?cè)豗的標(biāo)準(zhǔn)試樣特征X射線強(qiáng)度IO。然后兩者分別扣除背底和計(jì)數(shù)器死時(shí)間對(duì)所測(cè)值的影響，得到相應(yīng)的強(qiáng)度值IY和IO，兩者相除得到X射線強(qiáng)度之比KY= IY / IO。 直接將測(cè)得的強(qiáng)度比KY當(dāng)作試樣中元素Y的重量濃度，其結(jié)果還有很大誤差，通常還需進(jìn)行三種效應(yīng)的修正。即原子序數(shù)效應(yīng)的修正，吸收效應(yīng)修正，熒光效應(yīng)修正。經(jīng)過(guò)修正，誤差可控制在±2%以內(nèi)。只要令探測(cè)器連續(xù)進(jìn)行2θ角的掃描，即可在整個(gè)元素范圍內(nèi)實(shí)現(xiàn)連續(xù)測(cè)量。寶山區(qū)挑選探針推薦貨源

能進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)分析。無(wú)需把分析對(duì)象從樣品中取出，可直接對(duì)大塊試樣中的微小區(qū)域進(jìn)行分析。寶山區(qū)挑選探針推薦貨源

DNA探針（DNA probe）是**常用的核酸探針，為長(zhǎng)度在幾十到幾百甚至上千堿基對(duì)的單鏈或雙鏈DNA，用特殊示蹤劑（如同位素、酶或有色基團(tuán)）進(jìn)行標(biāo)記；在適當(dāng)?shù)膒H值、溫度和離子強(qiáng)度下，DNA探針利用分子的變性、復(fù)性以及堿基互補(bǔ)配對(duì)的高度精確性，能與待測(cè)樣本中互補(bǔ)的非標(biāo)記單鏈DNA或RNA以氫鍵結(jié)合（雜交），形成雙鏈復(fù)合物（雜交體）。雜交體的穩(wěn)定性取決于兩條單鏈核苷酸之間的互補(bǔ)程度。在嚴(yán)格的條件下（高pH值、高溫、低離子強(qiáng)度），不完全匹配的雜交體的兩鏈將會(huì)解離，而完全匹配的雜交體將保持雙鏈。將未配對(duì)結(jié)合的探針洗去后，可用放射自顯影或酶聯(lián)反應(yīng)等檢測(cè)系統(tǒng)檢測(cè)雜交反應(yīng)結(jié)果。寶山區(qū)挑選探針推薦貨源

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