針對(duì)單細(xì)胞測(cè)序的細(xì)胞上樣數(shù)，為什么不建議捕獲到的細(xì)胞數(shù)量越高越好？一味地追求高數(shù)量的細(xì)胞捕獲可能會(huì)存在一些問(wèn)題。例如在上機(jī)細(xì)胞懸液濃度固定時(shí)，如果目標(biāo)細(xì)胞捕獲數(shù)增加到8000甚至10000，上樣細(xì)胞懸液體積勢(shì)必增加，在細(xì)胞懸液質(zhì)量不是很理想（細(xì)胞活性<90%、碎片率>5%、結(jié)團(tuán)率均>5%）的情況下，引入的背景信號(hào)會(huì)增加，分析結(jié)果不理想的直接體現(xiàn)包括：cell、non-cell無(wú)法有效區(qū)分和Fraction reads in cells偏低。當(dāng)cell和non-cell無(wú)法有效區(qū)分時(shí)，會(huì)使得數(shù)據(jù)出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果！當(dāng)目標(biāo)細(xì)胞捕獲數(shù)很大時(shí)，多細(xì)胞率會(huì)增加，數(shù)據(jù)分析時(shí)，此部分“cell”表現(xiàn)為基因檢測(cè)數(shù)和UMI檢測(cè)數(shù)是正常cell的N倍（N是一個(gè)GEM包裹的細(xì)胞數(shù)），導(dǎo)致所有細(xì)胞的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)（單個(gè)細(xì)胞基因檢測(cè)中位數(shù)、單個(gè)細(xì)胞UMI檢測(cè)中位數(shù)）虛高。此部分“cell”雖然可以通過(guò)設(shè)置數(shù)據(jù)分析閾值進(jìn)行過(guò)濾，但是容易會(huì)有此類數(shù)據(jù)的殘留和正常高基因檢測(cè)細(xì)胞的人為去除！自2019年起，烈冰生物BD單細(xì)胞測(cè)序平臺(tái)已助力發(fā)表近20篇一區(qū)CNS高分文章。溫州single cell 單細(xì)胞多組學(xué)測(cè)序

樣本制備后的保存 為了盡可能地減少轉(zhuǎn)錄組的變化，在對(duì)細(xì)胞進(jìn)行清洗和計(jì)數(shù)后，單細(xì)胞懸液應(yīng)當(dāng)保存于冰上，直至用于后續(xù)的上機(jī)和文庫(kù)制備步驟。在理想狀況下，一旦制備好樣本，應(yīng)當(dāng)在3min鐘內(nèi)將其用于下游步驟。然而，您還有必要了解各類細(xì)胞的不同性質(zhì)，因?yàn)檫@可能會(huì)影響細(xì)胞應(yīng)在冰上保存的時(shí)間，以及它們?cè)谥苽浜蠖嗑帽銘?yīng)當(dāng)被盡快使用。例如，有些細(xì)胞（如PBMC）如果在冰上放置一段時(shí)間，它們就開始形成團(tuán)塊。這些團(tuán)塊很難解離，增加了堵塞的風(fēng)險(xiǎn)，而且每個(gè)團(tuán)塊被當(dāng)成單細(xì)胞計(jì)數(shù)，又降低了細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性。此外，有些細(xì)胞更加粘稠，形成團(tuán)塊的速度更快。對(duì)于這些細(xì)胞，必須盡量減少制備和使用之間的時(shí)間差。青島BD Rhapsody單細(xì)胞測(cè)序2019年，烈冰已助力發(fā)表了采用BD Rahpsody平臺(tái)的單細(xì)胞風(fēng)濕類文章。

單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)（Single Cell Sequencing）從一種新興的研究角度，借助已有的高通量測(cè)序手段，幫助研究者在樣本中細(xì)胞的異質(zhì)性、免疫微環(huán)境、發(fā)育學(xué)、免疫學(xué)以及其他領(lǐng)域中進(jìn)行單細(xì)胞層面的數(shù)據(jù)解析，解決了Bulk Population Sequencing所無(wú)法解決的問(wèn)題。這樣一個(gè)新的研究領(lǐng)域必然也需要足夠可靠的實(shí)驗(yàn)手段來(lái)支撐。BD Rhapsody單細(xì)胞分選系統(tǒng)為此提供了完善的硬件設(shè)備，保證了從單細(xì)胞懸液質(zhì)量評(píng)估到單細(xì)胞分選標(biāo)記過(guò)程中每一個(gè)實(shí)驗(yàn)步驟的準(zhǔn)確質(zhì)控。NovelBio單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)團(tuán)隊(duì)借助BD Rhapsody單細(xì)胞分選系統(tǒng)，在實(shí)驗(yàn)實(shí)施層面對(duì)單細(xì)胞測(cè)序結(jié)果的可靠性提供了強(qiáng)有力的保證。繼單細(xì)胞懸液制備之后，又在另一道關(guān)鍵關(guān)卡提供了可靠的支持，幫助研究者在單細(xì)胞測(cè)序領(lǐng)域收獲更多的成果。

您的珍貴樣本，可以放心依賴烈冰生物BD Rhapsody單細(xì)胞捕獲系統(tǒng)，基于BD平臺(tái)從原理到效率到通量的多重包容性，使得BD平臺(tái)對(duì)實(shí)驗(yàn)過(guò)程存在的批次效應(yīng)產(chǎn)生的可能性更小，可在技術(shù)、生物學(xué)、實(shí)驗(yàn)中心和用戶之間的樣本檢測(cè)獲得一致、可靠的結(jié)果，而磁珠的拆分使用和即時(shí)存儲(chǔ)，可增加實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的靈活性，配套的BD Scanner可視化工作流程質(zhì)控，從細(xì)胞鋪板前微孔板空板檢測(cè)，到細(xì)胞上樣、磁珠上樣、磁珠洗滌掃描、細(xì)胞裂解、磁珠回收、回收磁珠掃描等全過(guò)程，均實(shí)現(xiàn)BD Scanner的可視化質(zhì)控，讓您的每個(gè)樣本在實(shí)驗(yàn)端全程無(wú)憂。單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)遍地開花，烈冰BD 單細(xì)胞測(cè)序服務(wù)讓您的醫(yī)學(xué)研究如虎添翼。

烈冰生物在上海、北京、廣州、西安、江西等多地部署單細(xì)胞測(cè)序?qū)嶒?yàn)組中心，多地部署搭建BD Rhapsody單細(xì)胞實(shí)驗(yàn)平臺(tái)，基于微孔的強(qiáng)大的高通量單細(xì)胞分析系統(tǒng)，為您提供可靠的單細(xì)胞分析工作流程，該系統(tǒng)可通過(guò)簡(jiǎn)單的唯恐把工作流程和多重條碼標(biāo)記系統(tǒng)，對(duì)高通量單細(xì)胞進(jìn)行多組學(xué)的信息捕獲，由此捕獲的信息科進(jìn)一步生成各種類型的二代測(cè)序（NGS）文庫(kù)。之后對(duì)文庫(kù)進(jìn)行測(cè)序和基于NovelBrain生物大數(shù)據(jù)分析平臺(tái)（云平臺(tái)）的數(shù)據(jù)可視化分析，實(shí)現(xiàn)高位分辨率下的組織內(nèi)基因的表達(dá)差異和表達(dá)豐度。BD Rhapsody平臺(tái)在細(xì)胞捕獲過(guò)程中沒(méi)有偏好性，可同樣無(wú)差別捕獲中性粒細(xì)胞。武漢single cell 單細(xì)胞多組學(xué)測(cè)序

基于“靜態(tài)蜂巢”技術(shù)，實(shí)現(xiàn)落孔細(xì)胞的物力分割和磁珠的一對(duì)一匹配。溫州single cell 單細(xì)胞多組學(xué)測(cè)序

細(xì)胞計(jì)數(shù)和活力評(píng)估在評(píng)估樣本質(zhì)量時(shí)，需要在細(xì)胞清洗和過(guò)濾之后測(cè)定細(xì)胞活力，這一點(diǎn)至關(guān)重要。測(cè)定細(xì)胞活力有許多種方法，烈冰多年單細(xì)胞測(cè)序經(jīng)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)臺(tái)盼藍(lán)法在鑒定活細(xì)胞與死細(xì)胞的比例時(shí)效果很好。細(xì)胞計(jì)數(shù)的準(zhǔn)確性以及目標(biāo)回收量和實(shí)際回收量之間的一致性，取決于我們了解樣本中有多少個(gè)細(xì)胞。一旦過(guò)濾和清洗完成，可采用細(xì)胞計(jì)數(shù)設(shè)備（如血球計(jì)數(shù)器或自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀）進(jìn)行定量。這些設(shè)備不但能提供準(zhǔn)確的細(xì)胞計(jì)數(shù)，還能計(jì)算出向微流體芯片上樣適量細(xì)胞所需的細(xì)胞懸液體積。溫州single cell 單細(xì)胞多組學(xué)測(cè)序

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