未來,單細胞多組學測序技術(shù)的發(fā)展,一方面將集中在對現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)化和新方法的開發(fā).現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)化不僅包括建庫手段、測序技術(shù)和算法工具等方面,還包括優(yōu)化實驗設計、自動化實驗流程以及提升實驗效率.為了更好地檢測到各種大分子的特征,研究者可以考慮從生物、化學和物理等多學科中尋找解決方案.此外,新的計算方法和分析工具能幫助研究者越過一些實驗限制,發(fā)現(xiàn)更多新奇的生物過程.例如,擬時序分析(pseudotimetrajectory)將有助于人們理解早期胚胎發(fā)育的細胞分化軌跡.新方法則可以更多地關(guān)注目前未能檢測到的一些重要的基因表達調(diào)控層面,如DNA三維結(jié)構(gòu)、非編碼RNA和胞內(nèi)蛋白等.另一方面,目前的單細胞多組學測序技術(shù)發(fā)展勢頭強勁,研究者不斷研發(fā)并豐富著單細胞測序工具箱,各種組學方法百家爭鳴.未來,研究者需要從眾多相似的方法中篩選出一些穩(wěn)定、通用、成本低、可商業(yè)化的方法,并進一步擴大其實際應用范圍。單細胞組學技術(shù)方法的不斷 發(fā)展和改進, 為單細胞層級的多組學整合分析奠定了 基礎(chǔ)。西安single cell RNA單細胞多組學技術(shù)支持
單細胞多組學技術(shù)優(yōu)勢:1. 構(gòu)建蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫,大幅度提高蛋白質(zhì)鑒定數(shù)量;2. 不同層面表達水平分析,構(gòu)建表達“全景圖”;3. 多組學交叉驗證:深層次挖掘其中調(diào)控機制;4. 對基因突變信息在蛋白水平上進行驗證;5.精細醫(yī)療:實現(xiàn)genomics到protegenomics的轉(zhuǎn)變。生物領(lǐng)域各個研究方面,1. 農(nóng)林領(lǐng)域:抗逆脅迫機制,生長發(fā)育機制,育種保護研究等;2. 畜牧業(yè):肉類及乳品質(zhì)研究,致病機理研究等;3. 基礎(chǔ)醫(yī)學、臨床診斷:生物標志物,疾病機理機制,疾病分型等;4. 生物醫(yī)藥:藥物作用機理,藥效評價,藥物開發(fā)等;5. 微生物領(lǐng)域:致病機理,耐藥機制,病原體-宿主相互作用研究等;6. 海洋水產(chǎn):漁業(yè)資源,海水養(yǎng)殖,漁業(yè)環(huán)境與水產(chǎn)品安全等;7. 生物能源、環(huán)境科學領(lǐng)域:發(fā)酵過程優(yōu)化,生物燃料生產(chǎn),環(huán)境危定風險評估研究等;8.食品營養(yǎng):食品儲藏及加工條件優(yōu)化,食品組分及品質(zhì)鑒定,功能性食品開發(fā),食品安全監(jiān)檢測等。合肥單細胞多組學商業(yè)化服務目前已應用的單細胞多組學聯(lián)合分析包括轉(zhuǎn)錄組和基因組,轉(zhuǎn)錄組和DNA甲基化、轉(zhuǎn)錄組和蛋白組。
BDRhapsody單細胞分選系統(tǒng)集成了熒光顯微成像系統(tǒng),可以對不同熒光標記的細胞進行檢測并計數(shù)。在進行質(zhì)量評估之前,首先要將細胞的培養(yǎng)體系更換成上機所需的Buffer。在這個過程中,需要進行多次離心、重懸操作,烈冰Novelbio單細胞實驗團隊推薦采用水平轉(zhuǎn)子離心機來進行這步操作。這種離心機可以有效減少細胞在多次更換Buffer過程中的損失,尤其是對于細胞量較少的樣本來說,顯得非常有必要。更換完Buffer之后,還需要將細胞進行過篩操作,去除較大的細胞團,獲得較為純凈的單細胞懸液。
多樣本數(shù)據(jù)合并:FractionofReadsKept:合并樣本時,各樣本根據(jù)MappedBarcodedReadsperCell數(shù)量計算出來的數(shù)據(jù)利用率。如果各樣本間該參數(shù)值相差很大,需要進行Downsample處理,以數(shù)據(jù)量少的樣本為基準將不同樣本中細胞測序深度標化到同一水平,從而避免因測序深度差異導致的基因檢測數(shù)量、基因表達水平的差異。烈冰科技自主研發(fā)的單細胞云平臺致力于幫助每一位客戶定制化分析數(shù)據(jù),深入解讀數(shù)據(jù)分析結(jié)果,深入挖掘其背后的生物學意義;從操作便捷、結(jié)果可視化、分析可追溯、系統(tǒng)穩(wěn)定等方面助力單細胞研究,加速科研進程!隨著單細胞多組學的不斷進步, 研究者將有機會在單細胞分辨率下進一步理解個體發(fā)育以及疾病發(fā)展機制。
分子檢測型單細胞多組學測序技術(shù)中也有一些集中于探究單細胞內(nèi)表觀遺傳組各層面的變化及關(guān)聯(lián)。功能研究型單細胞多組學測序技術(shù),結(jié)合了強大的CRISPR基因編輯技術(shù),從而可以深度挖掘基因表達調(diào)控與細胞功能以及命運決定之間的因果關(guān)系。在未來,為了更系統(tǒng)地研究多層組學之間的互動關(guān)系對細胞命運的影響,一方面,單細胞多組學測序技術(shù)的策略會繼續(xù)向轉(zhuǎn)錄組結(jié)合其他多個組學的三組學甚至四組學方向發(fā)展.另一方面,單細胞多組學測序技術(shù)會轉(zhuǎn)向研發(fā)多組學測序分析和功能驗證同時進行的方法,這種探究因果關(guān)系的策略對于揭示發(fā)育和疾病發(fā)展中的關(guān)鍵因子和分子網(wǎng)絡模塊十分重要。單細胞多組學可從整體層面快速有效地探尋疾病發(fā)生、發(fā)展的根本原因或藥物作用靶點等信息。重慶BD Rhapsody單細胞多組學多組學測序
單細胞組學通過一系列測序技術(shù)實現(xiàn)高分辨檢測單個細胞水平表達譜,以解析細胞異質(zhì)性及其功能表型。西安single cell RNA單細胞多組學技術(shù)支持
機體為響應各種應激,其細胞會從一種功能“狀態(tài)”轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N功能“狀態(tài)”;當細胞在不同狀態(tài)之間轉(zhuǎn)變時,往往會經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄重組,導致一些基因被“沉默”,一些基因被重新“喚醒”,但純化這些瞬態(tài)細胞進行研究是很困難或不可能的;scRNA-seq擬時序分析可以讓我們在不需要純化的情況下查看這些細胞狀態(tài)。擬時序分析,即根據(jù)不同細胞亞群基因表達量隨時間的變化情況,構(gòu)建細胞譜系發(fā)育,但這里的時間并不是真時間,而是一個虛擬的時間,是指的細胞與細胞之間的轉(zhuǎn)化和演替的順序和軌跡。即使在同一個樣本中,也會存在多種不同的細胞形態(tài)。因此,不論測定了多少樣本,我們都可以采用擬時序分析對樣本中的細胞轉(zhuǎn)化和變化進行描述。西安single cell RNA單細胞多組學技術(shù)支持
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