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《NC》解讀：FBXO7與PRMT1相互作用
FBXO7與PRMT1相互作用
第一步，探討PRMT1在肝細胞AI中上調的機制
已有結果顯示，PRMT1的蛋白水平在HCC中上調，但PRMT1 mRNA水平沒有變化。推測泛素-蛋白酶體降解可能參與PRMT1的上調。用兩種不同的蛋白酶體抑制劑處理細胞，發(fā)現PRMT1蛋白水平呈劑量依賴性增加（圖1a），表明PRMT1的蛋白水平可以通過泛素介導的降解來調節(jié)。
第二步，確定PRMT1降解的關鍵泛素連接酶
根據設計的篩選策略，E3泛素連接酶FBXO7為候選互作蛋白（圖1b-c）。IP-MS分析顯示FBXO7是前面十個與PRMT1相互作用的候選E3連接酶中唯獨的E3泛素連接酶（圖1d）。
第三步，確定FBXO7作為E3連接酶參與PRMT1的降解及其互作關系
外源、內源Co-IP實驗顯示FBXO7與PRMT1相互作用（圖1e-h）。Co-IP實驗發(fā)現，敲減PRMT1后，FBXO7與PRMT1相互作用減弱（圖1i-j）。另外，GST pulldown實驗證實FBXO7與PRMT1直接相互作用（圖1k）。
第四步，確定FBXO7與PRMT1結合的具體的位置
Co-IP分析發(fā)現PRMT1與FBXO7的結合需要PRMT1的催化結構域(23-162aa)（圖1l-n），而FBXO7與PRMT1的結合需要FBXO7的泛素樣結構域(UBL，1-78aa)和FBXO7-PI31二聚化結構域(FP，181-324aa)（圖1o-q）。表明FBXO7與PRMT1直接相互作用。
圖1 FBXO7與PRMT1相互作用（Ref. Fig 1/S1）
本文揭示FBXO7通過抑制肝AI絲氨酸合成發(fā)揮抑AI的功能和分子機制。具體而言，FBXO7作為E3泛素連接酶，直接與PRMT1相互作用，導致PRMT1泛素化和隨后的泛素-蛋白酶體降解。FBXO7介導的PRMT1降解可阻止PHGDH甲基化活化，從而抑制絲氨酸合成，加重氧化應激，抑制HCC生長。本研究揭示了FBXO7-PRMT1-PHGDH軸在肝AI絲氨酸代謝調節(jié)中的分子機制，為絲氨酸代謝的靶向診療提供分子基礎。
全文分享請查閱：【《NC》解讀：泛素化-甲基化-氨基酸代謝機制，FBXO7 泛素化 PRMT1、抑制PDGDH7甲基化-絲氨酸合成，發(fā)揮抑AI功能！】。
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