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南京熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽哪家好

來源: 發(fā)布時間:2022-06-14

    8.取剩余裂解液測定LacZ的活性,其讀數(shù)作為內(nèi)標(biāo)用以矯正熒光素酶的讀數(shù)。9.用矯正后的讀數(shù)作圖,分析數(shù)據(jù)。注:熒光素見光易氧化,已稀釋未用的熒光素應(yīng)丟棄。注意事項:1.熒光素酶檢測試劑需在15-25℃條件下預(yù)平衡后再進(jìn)行反應(yīng),而后依據(jù)具體條件進(jìn)行自動或手動檢測。當(dāng)用液閃計數(shù)儀時,加入熒光素酶檢測試劑后立即輕輕混勻。2.如果細(xì)胞裂解后不能立即對提取物進(jìn)行檢測,樣品可以在冰上保存大約5h,在-70℃可保存數(shù)月。不要反復(fù)凍融以避免酶活性的降低。3.利用上述方法檢測冷的樣品時,其信號強(qiáng)度將下降5-15%。4.在熒光素酶活性較高的情況下,導(dǎo)致信號超出線性范圍(信號溢出)可用裂解液將樣品進(jìn)行稀釋。5.不要儲存稀釋過的樣品。如果必須保存,要在稀釋的樣品中加入BSA至終濃度為,這樣可以保持樣品的穩(wěn)定性。6.一些熒光儀在進(jìn)行檢測前需要1-2s的穩(wěn)定,因此建議在開機(jī)后過一段時間再進(jìn)行檢測操作。熒光素酶報告基因檢測主要有哪些用途?a.啟動子結(jié)構(gòu)分析,將啟動子區(qū)域序列(通常2k左右)進(jìn)行分段截短,或?qū)μ囟ㄎ稽c進(jìn)行突變,再分別構(gòu)建入luciferase報告載體,檢測其啟動子活性。b.啟動子SNP分析,一些基因的啟動子區(qū)域存在單核苷酸多態(tài)性。光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性。南京熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽哪家好

    其中更有代表性的是一種學(xué)名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應(yīng)化學(xué)反應(yīng)中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應(yīng)體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應(yīng)的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M(jìn)一步加速反應(yīng)(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應(yīng)通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusolearius)或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物。南通D-熒光素鉀鹽活題成像原理D-熒光素鉀鹽的測試方法有哪幾種?

    產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應(yīng)用于整個生物技術(shù)領(lǐng)域,特別是體內(nèi)***成像技術(shù)。其作用機(jī)制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光。當(dāng)熒光素過量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關(guān)性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的慢病毒轉(zhuǎn)染入細(xì)胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株,構(gòu)建原位**模型,之后注入熒光素底物,通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強(qiáng)度變化,從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展?fàn)顟B(tài)或進(jìn)行藥物藥效評價等。也可以利用ATP對此反應(yīng)體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強(qiáng)度的變化來指示能量或生命體征。注:在抗**藥物藥效評價試驗中,由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達(dá)標(biāo)定**大小,受**生長所發(fā)生的**內(nèi)部壞死影響,生物自發(fā)光并不能很***的評價**生長,在抗**藥效評價有較高要求的實驗中,建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測**生長。D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液。可溶于甲醇和DMSO。

    可以以方便的96孔和384孔微量滴定板形式進(jìn)行半衰期為一小時的“輝光型”信號在大量檢測板之間提供一致的信號與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容海腎熒光素酶海腎螢光素酶是一種從海桑(Renillareniformis)分離的36kDa蛋白。與螢火蟲熒光素酶相比,海腎熒光素酶的底物和輔因子要求不同。海腎熒光素酶在氧氣存在下使用腔腸素,產(chǎn)生480nm的藍(lán)光。與螢火蟲螢光素酶類似,海腎螢光素酶因其底物要求和光輸出方面的差異而可用于雙重報告檢測。Amplite?海腎熒光素酶報告基因測定Amplite?Renilla螢光素酶報告基因檢測試劑盒(#AAT-12535)提供了一種快速,靈敏的方法,可以使用專有的發(fā)光配方在基于細(xì)胞的檢測中檢海腎螢光素酶的活性,與海腎螢光素酶相互作用后,該試劑產(chǎn)生具有強(qiáng)光的產(chǎn)物。Amplite?海腎熒光素酶報告基因檢測試劑盒特點:該測定法與標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞生長培養(yǎng)基兼容該試劑盒可以測量野生型和合成hRluc基因的原始表達(dá)或基因表達(dá)每個試劑盒均包含可以方便96孔和384孔板檢測所必不可少的組分各類螢光素酶底物,輔因子和物理特性:近幾十年來,腺苷三磷酸(ATP)生物發(fā)光技術(shù)得到了很大的發(fā)展,已經(jīng)在細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性和生物量計數(shù)等方面廣泛應(yīng)用。D-熒光素鉀鹽適用于哪些領(lǐng)域?

    但是上一次底物的殘留曲線可以知道,可以控制對下一次觀察結(jié)果的影響。儲存與運輸一般放在-20℃的冰箱即可,半年以上不使用放在-80℃的冰箱,溶解配制后放在4℃冰箱,短期運輸放在4℃環(huán)境。建議現(xiàn)用現(xiàn)配,D熒光素鉀鹽在液體中容易降解。應(yīng)用領(lǐng)域腫大的瘤,干細(xì)胞,藥物開發(fā),基因治的好,轉(zhuǎn)基因小鼠,免疫學(xué)等等。英文名字firefly.中文名稱熒光素酶,重組熒光素貨號AAT-12500規(guī)格¥1430/1mL背景資料:熒光素酶是來自北美螢火蟲(Photinuspyralis)中熒光素酶基因的克隆和重組表達(dá),它為實驗研究或者用生物熒光試劑制備試劑盒檢測ATP或者熒光素底物提供了可信度和可靠性。這種重組酶可以克服由天然資源純化獲得熒光素酶時受季節(jié)和地方區(qū)域變化的影響。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin,在luciferin氧化的過程中,會發(fā)出生物熒光(bioluminescence),可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光,常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。產(chǎn)品形式提供的熒光素酶*重組熒光素*產(chǎn)品為溶液形式。作者:思存鏈接:zhuanlan./p/來源:知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán),非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。D-熒光素鉀鹽的使用說明。泰州熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽保質(zhì)期

D-熒光素鉀鹽運輸條件是4℃冰袋運輸。南京熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽哪家好

    luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應(yīng)非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應(yīng)的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。分析熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應(yīng)的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應(yīng)。更為人所知的發(fā)光生物是螢火蟲,而其所采用不同的熒光素酶與其他發(fā)光生物如熒光菇(發(fā)光類臍菇,Omphalotusoleariu')或許多海洋生物都不相同。在螢火蟲中,發(fā)光反應(yīng)所需的氧氣是從被稱為腹部氣管(abdominaltrachea)的管道中輸入。一些生物,如叩頭蟲,含有多種不同的熒光素酶,能夠催化同一熒光素底物,而發(fā)出不同顏色的熒光。螢火蟲有2000多種,而叩甲總科(包括螢火蟲、叩頭蟲和相關(guān)昆蟲)則有更多,因此它們的熒光素酶對于分子系統(tǒng)學(xué)研究很有用。目前研究得更透徹的熒光素酶是來自Photinini族螢火蟲中的北美螢火蟲(Photinuspyrali')。應(yīng)用熒光素酶可以在實驗室中用基因工程的方法生成,并被用于多種不同的實驗。南京熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽哪家好

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