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來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2022-06-29

    輕輕吹3-5次混勻。B.輕輕混勻轉(zhuǎn)染試劑,用50ulOpti-MEM稀釋lipofectamineTM2000,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置5min。C.混合轉(zhuǎn)染試劑和siRNA稀釋液,輕輕吹3-5次混勻,室溫下靜置20min。D.轉(zhuǎn)染復(fù)合物加入到24孔細(xì)胞板中,100ul/孔,前后輕搖細(xì)胞板混合均勻。E.細(xì)胞板置于37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18-48h。轉(zhuǎn)染4-6h后可更換新鮮培養(yǎng)基。3)效果檢測(cè):轉(zhuǎn)染完成后24-72h均可進(jìn)行siRNA沉默效果檢測(cè),更佳檢測(cè)時(shí)間與細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染試劑,檢測(cè)目的等相關(guān)。1)RNA水平的檢測(cè):mRNA是檢測(cè)siRNA沉默效率的更佳指標(biāo),siRNA轉(zhuǎn)染后24-72h即可檢測(cè)到靶基因mRNA表達(dá)明顯降低,檢測(cè)方法是RealtimePCR。2)蛋白水平的檢測(cè):檢測(cè)方法是Westernblot。3)功能篩選:應(yīng)用EdU細(xì)胞增殖、EdUTP細(xì)胞凋亡等方法進(jìn)行細(xì)胞功能篩選。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)修飾方法:由于動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)siRNA穩(wěn)定性的要求較高,盡管未修飾的siRNA也可以進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn),但是以CHol,OMe,PS修飾的siRNA效果較好。給***法:局部給藥:更直接的導(dǎo)入方式,siRNA的導(dǎo)入效率高,用量少。siRNA能很快被吸收。適用于淺表***和組織,包括眼,肌肉和皮下組織等。2表2:使用lipofectamineTM2000轉(zhuǎn)染siRNA產(chǎn)品參考用量細(xì)胞培養(yǎng)容器表面積。南京秦淮區(qū)RNA哪家便宜?常州比較好的RNA公司

    總RNA(含microRNA)提取試劑盒:各種類型RNA提取不再愁發(fā)布者:艾美捷科技發(fā)布時(shí)間:2018-06-26分享按鈕RNA是以DNA的一條鏈為模板,以堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,轉(zhuǎn)錄而形成的一條單鏈,主要功能是實(shí)現(xiàn)遺傳信息在蛋白質(zhì)上的表達(dá),是遺傳信息向表型轉(zhuǎn)化過(guò)程中的橋梁。隨著研究的不斷深入,mRNA、IncRNA、SmallRNA、以及microRNA的神秘面紗被慢慢揭開(kāi)。特別是現(xiàn)今流行的單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)(RNA-seq)的興起,研究者對(duì)RNA提取的質(zhì)量要求變得更加嚴(yán)苛。市場(chǎng)上有很多名義上是總RNA提取的試劑盒,但是實(shí)際上很難提取到全部的RNA,特別是小分子RNA基本上無(wú)法提取。這對(duì)于研究者來(lái)說(shuō)是非常大的損失。為此,艾美捷科技作為專業(yè)的生命科學(xué)領(lǐng)域解決方案供應(yīng)商,為您推薦NorgenBiotek品牌的質(zhì)量總RNA提取試劑盒,可以完整的提取各種類型的RNA:mRNA,lncRNA,smallRNA,microRNA(miRNA)等;提取后的總RNA可直接用于下游應(yīng)用:qRT-PCR,Northernblots,microarrays,NGS,miRNAprofiling,biomarkerdiscovery,Primerextension,RNaseprotection。上海piRNA生物公司RNA的測(cè)試方法有哪幾種?

    2014):."Broad-spectrumtherapeuticsuppressionofmetastaticmelanomathroughnuclearhormonereceptoractivation."Cell5(2014):."Pyrimidinehomeostasisisaccomplishedbydirectedoverflowmetabolism."Nature7461(2013):,公司總部位于加拿大,是一家***中外的生物技術(shù)公司,生產(chǎn)基于**技術(shù)的核酸和蛋白質(zhì)純化及富集產(chǎn)品用于研究和診斷。NorgenBiotek在2003年獲得加拿大國(guó)家研究委員會(huì)頒發(fā)的科技創(chuàng)新獎(jiǎng),是一家致力于樣品制備并獲得ISO9001(產(chǎn)品質(zhì)量)、ISO13485(產(chǎn)品可用于商業(yè)化的醫(yī)療設(shè)備,包括用于體外診斷領(lǐng)域)和ISO15189(可用于臨床檢測(cè)機(jī)分子診斷領(lǐng)域的研發(fā)能力)認(rèn)證的生物科技公司。艾美捷科技與國(guó)內(nèi)外***的生物試劑供應(yīng)商保持著密切的合作關(guān)系,目前已成為眾多聞名中外品牌的中國(guó)總代理或一級(jí)代理,主要包括:Abbkine、MerckMillipore、Origene、AATBioquest、CaymanChemical、Abnova、Biovision、ProSpec、HycultBiotech、Equitech-Bio、Trevigen、AlomoneLabs、Epigentek、ImmunoReagents、Jackson、SouthernBiotech、USBiological、CaissonLabs等,可以在***時(shí)間為用戶提供前沿的專業(yè)資訊、完備的產(chǎn)品及物流服務(wù)。

    不過(guò),這些核糖體的基本結(jié)構(gòu)和功能一致。[2]核酶科學(xué)家在研究RNA的轉(zhuǎn)錄后加工時(shí)發(fā)現(xiàn)某些RNA有催化活性,可以催化RNA的剪接,這些由活細(xì)胞合成、起催化作用的RNA稱為核酶。許多核酶的底物也是RNA,甚至就是其自身,其催化反應(yīng)也具有專一性。[2]已經(jīng)闡明的天然核酶有錘頭狀核酶、發(fā)夾狀核酶、I型內(nèi)含子、Ⅱ型內(nèi)含子、丁型肝炎病毒核酶、核糖核酸酶P、肽基轉(zhuǎn)移酶等。如何評(píng)價(jià)核酶的理論意義與實(shí)際意義,如何看待核酶與傳統(tǒng)意義上的酶在代謝中的地位,都有待進(jìn)一步研究。[2]1.核酶發(fā)現(xiàn)核酶更早由Cech和Altman(1989年諾貝爾化學(xué)獎(jiǎng)獲得者)發(fā)現(xiàn)。1967年,Woese、Crick與Orgel等基于RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜程度提出其可能有催化活性;1982年,Cech在研究四膜蟲rRNA前體剪接時(shí)發(fā)現(xiàn)其內(nèi)含子有自我剪接活性;1983年,Altman在研究細(xì)菌tRNA前體時(shí)發(fā)現(xiàn)核糖核酸酶P中的MRNA參與tRNA前體轉(zhuǎn)錄后加工;1982年,Kruger等建議將有催化活性的RNA命名為“ribozyme(核酶)”。 南京鼓樓區(qū)做RNA測(cè)試的怎么樣?

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