故根據(jù)熒光反應的情況可以檢測樣品中的微生物含量。APT熒光檢測儀***用于食品、飲用水、餐飲器具等的微生物快速檢測。1970年,科學家***次測定了螢火蟲熒光素酶的結(jié)構(gòu);1985年,科學家***克隆了一種螢火蟲熒光素酶基因,并在大腸桿菌中表達,從而得到了具有活性的熒光素酶;1986年,科學家們測定了該種螢火蟲熒光素酶的基因序列。隨后,各種螢火蟲熒光素酶基因相繼克隆成功,熒光素酶的研究和應用不斷發(fā)展。目前,熒光素酶發(fā)光系統(tǒng)的分析技術已經(jīng)廣泛應用到醫(yī)學、生命科學、環(huán)境科學、微生物學等許多領域。以醫(yī)學領域為例,**們將熒光素酶基因嵌入到*細胞中,再注入熒光素,使*細胞發(fā)光,通過探測熒光,就能監(jiān)測*細胞的擴散和轉(zhuǎn)移。同理,用這種方法能對致病基因、***免疫機制等進行研究,對某些疾病進行診斷,監(jiān)測疫苗、藥物和治療方法的效力。南京D-熒光素鉀鹽測試公司有哪幾家。上海熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽應用
熒光素也就是FDAFDA可透過細胞膜并作為熒光素積蓄在活細胞內(nèi)。由于熒光素較BCECF或Calcein的親水性低,因此熒光素從細胞中滲漏的量也高。FDA也可用于流式細胞儀。熒光素的激發(fā)和發(fā)射波長分別為488nm和530nm。熒光素酶(英文名稱:Luciferase)是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱,其中更有代表性的是一種學名為Photinuspyralis的螢火蟲體內(nèi)的熒光素酶。在相應化學反應中,熒光的產(chǎn)生是來自于螢光素的氧化,有些情況下反應體系中也包括三磷酸腺苷(ATP)。沒有熒光素酶的情況下,螢光素與氧氣反應的速率非常慢,而鈣離子的存在常??梢赃M一步加速反應(與肌肉收縮的情況相似)。[1]熒光生成反應通常分為以下兩步:螢光素+ATP→螢光素化腺苷酸(luciferyladenylate)+PPi螢光素化腺苷酸+O2→氧熒光素+AMP+光這一反應非常節(jié)省能量,幾乎所有輸入反應的能量都被轉(zhuǎn)化為光。與之形成鮮明對比的是人類使用的白熾燈,只有越10%的能量被轉(zhuǎn)化為光,剩余的能量都變?yōu)闊崮芏焕速M。熒光素或熒光素酶不是特定的分子,而是對于所有能夠產(chǎn)生熒光的底物和其對應的酶的統(tǒng)稱,雖然它們各不相同。不同的能夠控制發(fā)光的生物體用不同的熒光素酶來催化不同的發(fā)光反應。南京熒光素酶D-熒光素鉀鹽生物公司D-熒光素鉀鹽檢測公司招代理嗎?
注意事項1)本品(fireflyluciferin)和甲蟲熒光素(beetleluciferin)、螢光素鉀鹽只是不同別名,以CAS號115144-35-9為準。2)注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射,因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學曲線,確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3)如果要進行ATP的檢測,盡量避免外源ATP的污染,如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材,在進行熒光素的溶解時應使用ATP-free無菌水。4)為避免反復凍融,本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化,如有條件,可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。5)對于檢測靈敏度要求特別高的實驗,建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6)在進行D-熒光素鉀鹽的溶解時,應使用無鈣鎂離子的DPBS,因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性,此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響,從而影響檢測。7)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。8)本產(chǎn)品只作科研用途!
2-乙磺酸)PIPES磷酸烯醇**酸三(環(huán)已胺)鹽PEP病毒保存液肝素鋰乙二胺四乙酸二鉀/EDTA二鉀血清分離膠/血液分離膠肝素抗凝劑乙二胺四乙酸三鉀/EDTA三鉀血液促凝劑高效促凝粉高效硅化劑水溶性硅化劑草酸鉀鈣離子螫合抗凝劑弱效抗凝劑吖啶酯己二酰阱NSP-DMAE-ADH吖啶酯-T4結(jié)合物吖啶酯-T3結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-N-乙胺基馬來酰亞胺吖啶磺酰胺鹽-T4結(jié)合物吖啶磺酰胺鹽-T3結(jié)合物生物素-T4結(jié)合物化學發(fā)光分析試劑及標記物生物素-T3結(jié)合物生物素-NHS活性酯吖啶磺酰胺NSP-SA-ADH吖啶酯NSP-DMOAE-NHS吖啶酯NSP-DMOAE-PEG-GT-NHSCy3-NHS酯Cy7-NHS酯5-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素-NHS酯5(6)-羧基熒光素-NHS酯6-羧基熒光素D熒光素鈉鹽D-Luciferin,SodiumSaltD-熒光素鉀鹽D-Luciferin,PotassiumSaltD-熒光素螢火蟲,游離酸D-LuciferinFirefly,freeacid螢火蟲熒光素酶fireflyluciferase海腎熒光素酶Renillaluciferase天然腔腸熒光素Coelenterazineh腔腸素hCoelenterazinef腔腸素fCoelenterazineh/腔腸素h腔腸熒光素運輸和保存冰袋運輸;-20℃干燥避光保存;有效期一年。使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1)用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鈉鹽,配制成30mg/mL的儲存液(100-200×),混勻。立即使用。D-熒光素鉀鹽應立即使用,或分裝于-20℃避光保存,避免反復凍融。
可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。c.驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用,將該序列(通常為啟動子區(qū)域)插入報告基因載體,同時在實驗細胞***轉(zhuǎn)過表達該轉(zhuǎn)錄因子,可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否***,將該信號通路的下游響應原件序列構(gòu)建入報告基因載體,在不同上游信號條件下,熒光素酶活性**了通路的下游響應。例如在GPCR研究中,將cAMPresponseelement(CRE)載入報告基因載體,構(gòu)建穩(wěn)定表達細胞株后,可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選。又如,將HIF1α的響應原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報告載體構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株,可以用于低氧相關通路的研究。e.驗證microRNA的靶序列,將待測的3’UTR序列插入報告基因載體,再共轉(zhuǎn)入該microRNA,如果熒光素酶活性下降,則提示為其靶序列。Q:在[信諾金達]做熒光素酶報告基因檢測,需要提供什么?實驗結(jié)果包括哪些?您需要提供:1.基因序列或模板,需提供詳細的轉(zhuǎn)錄因子、目的基因或microRNA信息;2.實驗細胞,[信諾金達]默認為使用293T細胞,實驗結(jié)束后,[信諾金達]會為您提供實驗流程及完整報告一份,包括實驗原始數(shù)據(jù)、圖片、分析結(jié)果等。南京靠譜的D-熒光素鉀鹽測試公司。上海熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽應用
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產(chǎn)品描述D-熒光素(D-Luciferin)是熒光素酶(Luciferase)的常用底物,普遍應用于整個生物技術領域,特別是體內(nèi)***成像技術。其作用機制是在ATP和熒光素酶的作用下,熒光素底物能夠被氧化發(fā)光。當熒光素過量時,產(chǎn)生的光量子數(shù)與熒光素酶的濃度呈正相關性(見下圖)。將攜帶熒光素酶編碼基因(Luc)的慢病毒轉(zhuǎn)染入細胞后構(gòu)建穩(wěn)定表達細胞株,構(gòu)建原位**模型,之后注入熒光素底物,通過IVIS系統(tǒng)來檢測光強度變化,從而實時監(jiān)測疾病發(fā)展狀態(tài)或進行藥物藥效評價等。也可以利用ATP對此反應體系的影響,根據(jù)生物發(fā)光強度的變化來指示能量或生命體征。注:在抗**藥物藥效評價試驗中,由于生物自發(fā)光檢測需要根據(jù)熒光素表達標定**大小,受**生長所發(fā)生的**內(nèi)部壞死影響,生物自發(fā)光并不能很***的評價**生長,在抗**藥效評價有較高要求的實驗中,建議使用小動物核磁成像系統(tǒng)檢測**生長。D-熒光素也常用于體外研究,包括熒光素酶和ATP水平分析;報告基因分析;高通量測序和各種污染檢測。目前有三種產(chǎn)品形式:D-熒光素(游離酸),D-熒光素鹽(鈉鹽和鉀鹽)。主要差別在于溶解特性:前者的水溶性以及緩沖體系的溶解性都較弱,除非溶于弱堿如低濃度NaOH和KOH溶液??扇苡诩状己虳MSO。 上海熒光素鈉鹽D-熒光素鉀鹽應用