可運用熒光素酶報告系統(tǒng)分析其相對活性。c.驗證特定轉(zhuǎn)錄因子同其調(diào)控序列的作用，將該序列（通常為啟動子區(qū)域）插入報告基因載體，同時在實驗細(xì)胞***轉(zhuǎn)過表達(dá)該轉(zhuǎn)錄因子，可分析轉(zhuǎn)錄因子過表達(dá)是否提高熒光素酶活性。d.可以分析信號通路是否***，將該信號通路的下游響應(yīng)原件序列構(gòu)建入報告基因載體，在不同上游信號條件下，熒光素酶活性**了通路的下游響應(yīng)。例如在GPCR研究中，將cAMPresponseelement（CRE）載入報告基因載體，構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)細(xì)胞株后，可以用于分析GPRC的***與6b7a976f-99ae-4c48-8159-4bd篩選。又如，將HIF1α的響應(yīng)原件hypoxia-responsiveelement(HRE)插入luciferase報告載體構(gòu)建穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株，可以用于低氧相關(guān)通路的研究。e.驗證microRNA的靶序列，將待測的3’UTR序列插入報告基因載體，再共轉(zhuǎn)入該microRNA，如果熒光素酶活性下降，則提示為其靶序列。Q：在[信諾金達(dá)]做熒光素酶報告基因檢測，需要提供什么？實驗結(jié)果包括哪些？您需要提供：1.基因序列或模板，需提供詳細(xì)的轉(zhuǎn)錄因子、目的基因或microRNA信息；2.實驗細(xì)胞，[信諾金達(dá)]默認(rèn)為使用293T細(xì)胞，實驗結(jié)束后，[信諾金達(dá)]會為您提供實驗流程及完整報告一份，包括實驗原始數(shù)據(jù)、圖片、分析結(jié)果等。D-熒光素鉀鹽的使用說明。無錫熒光素D-熒光素鉀鹽公司

    可用熒光素酶檢測系統(tǒng)靈敏方便地測定熒光素酶基因的表達(dá)。熒光素酶報告基因有許多優(yōu)點：①非放射性；②比CAT及其他報告基因速度快；③比CAT靈敏100倍；④熒光素酶在哺乳細(xì)胞中的半衰期為3小時，在植物中的半衰期為3．5小時。由于半衰期短，故啟動子的改變會即時導(dǎo)致熒光素酶活性的改變，而熒光素酶不會積累。相反，CAT在哺乳細(xì)胞中的半衰期為50小時。熒光素酶濃度在10—16mol/L（10pS/L）到10-8mol/L（1mg/L）范圍內(nèi)，熒光信號強(qiáng)度與酶濃度成正比。在理想條件下，可檢測到l0-20mol/L的熒光素酶。檢測步驟：1．用生物信息學(xué)方法分析并預(yù)測啟動子區(qū)可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點。2．設(shè)計引物用PCR法從基因組DNA中克隆所需的靶啟動子片段，將此片段插入到熒光素酶報告基因質(zhì)粒（pGL3-basic）中。3．篩選陽性克隆，測序。擴(kuò)增克隆并提純質(zhì)粒備用。4．?dāng)U增轉(zhuǎn)錄因子質(zhì)粒，提純備用。同時準(zhǔn)備相應(yīng)的空載質(zhì)粒對照，提純備用。5．培養(yǎng)293（或其它目的細(xì)胞），并接種于24孔板中，生長10-24小時（80%匯合度）。6．將報告基因質(zhì)粒與轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染細(xì)胞。7．提取蛋白并用于熒光素酶檢測。8．加入底物，測定熒光素酶的活性。9．計算相對熒光強(qiáng)度，并與空載對照比較。鎮(zhèn)江螢火蟲熒光素酶D-熒光素鉀鹽濃度D-熒光素鉀鹽測試比較好的公司有哪幾個？

    后者能夠易溶于水或緩沖液中，使用方便，溶劑無毒性，特別適合體內(nèi)實驗。配成溶液后的這三種產(chǎn)品，在絕大多數(shù)的應(yīng)用上都沒有實質(zhì)性的差別。產(chǎn)品性質(zhì)運輸和保存運輸條件：4℃冰袋運輸；短期保存：4℃干燥避光長期保存：-20℃干燥避光母液保存：-20℃避光有效期長期保存：有效期一年工作液：先用現(xiàn)配使用方法1.體外生物發(fā)光檢測1）用無菌蒸餾水溶解D-熒光素鉀鹽，配制成30mg/mL的儲存液(100-200×)，混勻。立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。2）用預(yù)熱好的組織培養(yǎng)基將儲存液稀釋至mg/mL的工作液濃度。3）去除細(xì)胞培養(yǎng)基。4）待圖像分析前，向細(xì)胞內(nèi)添加熒光素工作液，37℃孵育5-10min，然后進(jìn)行圖像分析。2.***成像分析1）用無菌的DPBS(w/oMg2+、Ca2+)配制15mg/mL的熒光素的儲存液，混勻。2）用μm濾膜過濾除菌。立即使用，或分裝于-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。3）腹腔注射（.），按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。

    按照150mg/kg的熒光素/體重濃度進(jìn)行注射，以小鼠為例，每只小鼠體重假定20g，每只小鼠用量3mg；4）注射入體內(nèi)10-15min（待光信號達(dá)到更強(qiáng)穩(wěn)定平臺期）后進(jìn)行成像分析。注：建議對每只動物模型都需要建立熒光素酶動力學(xué)曲線，從而確定更高信號檢測時間和信號平臺期。注意事項1）本品（fireflyluciferin）和甲蟲熒光素（beetleluciferin）、螢光素鉀鹽只是不同別名，以CAS號115144-35-9為準(zhǔn)。2）注射方式、動物類型以及體重等都會影響信號的發(fā)射，因此建議每次實驗都要做熒光素酶動力學(xué)曲線，確定更佳信號平臺期和更佳的檢測時間。3）如果要進(jìn)行ATP的檢測，盡量避免外源ATP的污染，如操作時戴手套并使用ATP-free的實驗耗材，在進(jìn)行熒光素的溶解時應(yīng)使用ATP-free無菌水。4）為避免反復(fù)凍融，本產(chǎn)品配制成溶液后建議適當(dāng)分裝后-20℃或-80℃保存。為防止氧化，如有條件，可以對儲存液充氮氣或氬氣后保存。5）對于檢測靈敏度要求特別高的實驗，建議使用新鮮配制的本產(chǎn)品。6）在進(jìn)行D-熒光素鉀鹽的溶解時，應(yīng)使用無鈣鎂離子的DPBS，因鈣鎂離子可能會抑制熒光素酶的活性，此外鎂離子可能會對熒光素的氧化造成影響，從而影響檢測。7）為了您的安全和健康。D-熒光素鉀鹽測試需要哪些必備條件？

    但是上一次底物的殘留曲線可以知道，可以控制對下一次觀察結(jié)果的影響。儲存與運輸一般放在-20℃的冰箱即可，半年以上不使用放在-80℃的冰箱，溶解配制后放在4℃冰箱，短期運輸放在4℃環(huán)境。建議現(xiàn)用現(xiàn)配，D熒光素鉀鹽在液體中容易降解。應(yīng)用領(lǐng)域腫大的瘤，干細(xì)胞，藥物開發(fā)，基因治的好，轉(zhuǎn)基因小鼠，免疫學(xué)等等。英文名字firefly.中文名稱熒光素酶，重組熒光素貨號AAT-12500規(guī)格￥1430/1mL背景資料：熒光素酶是來自北美螢火蟲（Photinuspyralis）中熒光素酶基因的克隆和重組表達(dá)，它為實驗研究或者用生物熒光試劑制備試劑盒檢測ATP或者熒光素底物提供了可信度和可靠性。這種重組酶可以克服由天然資源純化獲得熒光素酶時受季節(jié)和地方區(qū)域變化的影響。熒光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的過程中，會發(fā)出生物熒光(bioluminescence)，可通過熒光測定儀設(shè)備測定luciferin氧化過程中釋放的生物熒光，常應(yīng)用于啟動子轉(zhuǎn)錄活性調(diào)控及miRNA靶基因驗證等方向研究。產(chǎn)品形式提供的熒光素酶*重組熒光素*產(chǎn)品為溶液形式。作者：思存鏈接：zhuanlan./p/來源：知乎著作權(quán)歸作者所有。商業(yè)轉(zhuǎn)載請聯(lián)系作者獲得授權(quán)，非商業(yè)轉(zhuǎn)載請注明出處。南京靠譜的D-熒光素鉀鹽測試公司。鹽城ATPD-熒光素鉀鹽供應(yīng)商

D-熒光素鹽也算是鈉鹽和鉀鹽。無錫熒光素D-熒光素鉀鹽公司

    隨后30年里，Promega不斷在螢光素酶實驗工具領(lǐng)域推陳出新，保持技術(shù)帶跑的人的地位。這里提到的螢光素酶即熒光素酶。1991螢光素酶檢測系統(tǒng)（LAR）Promega公司推出的7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3螢光素酶檢測試劑LuciferaseAssaySystem（LAR），為靈敏、非放射性的報告基因檢測拉開了序幕。LAR與螢火蟲螢光素酶（luc）報告基因一起，為研究人員開始了解基因表達(dá)調(diào)控因子提供了首要的工具。1995Dual-Luciferase?報告基因檢測系統(tǒng)（DLR）DLR是7b0a8f9c-3a4b-41a1-a7f8-3允許在單個樣本中依次檢測兩個報告基因的試劑。通過允許螢光素酶活性的內(nèi)部歸一化，在提高報告基因檢測的可靠性方面取得了關(guān)鍵進(jìn)展。此外，pGL3報告基因載體系列具有改良后的螢火蟲螢光素酶基因，luc+。這個改造一種報告基因以實現(xiàn)性能改進(jìn)的例子后來被進(jìn)一步應(yīng)用到pGL4和luc2報告基因上，通過生物信息學(xué)和合成方法，實現(xiàn)了更大的改進(jìn)。[1]1999ENLITEN?/UltraGlo?重組螢光素酶Promega公司在早期推出的一種重組螢火蟲螢光素酶（Enliten）基礎(chǔ)上，改造出了一種稱為UltraGlo?的熱穩(wěn)定性螢光素酶。UltraGlo?的開發(fā)是在各種檢測和儲藏條件下進(jìn)行一步法“加樣-讀數(shù)”檢測的關(guān)鍵。此后。無錫熒光素D-熒光素鉀鹽公司

南京翌科生物科技有限公司是一家有著雄厚實力背景、信譽(yù)可靠、勵精圖治、展望未來、有夢想有目標(biāo)，有組織有體系的公司，堅持于帶領(lǐng)員工在未來的道路上大放光明，攜手共畫藍(lán)圖，在江蘇省等地區(qū)的商務(wù)服務(wù)行業(yè)中積累了大批忠誠的客戶粉絲源，也收獲了良好的用戶口碑，為公司的發(fā)展奠定的良好的行業(yè)基礎(chǔ)，也希望未來公司能成為*****，努力為行業(yè)領(lǐng)域的發(fā)展奉獻(xiàn)出自己的一份力量，我們相信精益求精的工作態(tài)度和不斷的完善創(chuàng)新理念以及自強(qiáng)不息，斗志昂揚的的企業(yè)精神將**南京翌科生物科技供應(yīng)和您一起攜手步入輝煌，共創(chuàng)佳績，一直以來，公司貫徹執(zhí)行科學(xué)管理、創(chuàng)新發(fā)展、誠實守信的方針，員工精誠努力，協(xié)同奮取，以品質(zhì)、服務(wù)來贏得市場，我們一直在路上！