上海楚知生物蛋白純化試劑產品介紹:c-Myc蛋白含有bHLH結構域,該蛋白在正常機體發(fā)育和**發(fā)生過程中起著非常重要的作用,c-Myc是一個重要的轉錄因子,其異常表達能促進多種**的的發(fā)生和發(fā)展。將人p62c-Myc蛋白的410-419這段氨基酸序列(EQKLISEEDL)融合至目的蛋白的N端或者是C端,可以對目的蛋白進行準確的檢測、定位和純化。抗體來源:小鼠交叉反應:c-Myc標簽融合蛋白克隆類型:單克隆抗體亞型:IgG2A來源:293細胞表達的重組抗體純化方式:rProteinA親和純化產品純度:≥95%,SDS-PAGE檢測儲存緩沖液:1×PBS(pH7.4),0.02%疊氮鈉,50%甘油儲存條件:干冰運輸,-20℃可保存一年,避免反復凍融質粒抽提試劑盒Plasmid Purification MaxiPrep Kit。上海磁珠系列試劑代理廠家
蛋白純化試劑純化流程5)依次使用3倍柱體積的平衡液和5倍柱體積的去離子水平衡填料,***再用5倍柱體積的20%的乙醇平衡,然后保存在等體積的20%的乙醇中,置于4-30°C保存,防止填料被細菌污染。2.4SDS-PAGE檢測將使用純化產品得到的樣品(包括流出組分、洗雜組分和洗脫組分)以及原始樣品使用SDS-PAGE檢測純化效果。3.在位清洗當填料使用過程中發(fā)現反壓過高或者填料上面出現明顯的污染時,需要進行在位清洗操作(Cleaning-in-Place,CIP)。建議按照下面操作去除填料上殘留的污染物,如沉淀蛋白、疏水蛋白和脂蛋白等。去除強疏水結合的蛋白,脂蛋白和脂類通過使用30%異丙醇清洗5-10個柱體積,接觸時間為15-20分鐘可以去除此類污染物。然后,再使用10倍柱體積的去離子水清洗。也可以選擇使用含有去污劑的酸性或堿性溶液,清洗填料2倍柱體積。例如,含有0.1–0.5%非離子去污劑的0.1M醋酸溶液,接觸時間為1–2小時。去污劑處理后,需要使用70%的乙醇清洗5個柱體積,以徹底去除去污劑。***使用10倍柱體積的去離子水清洗。湖北天地人和試劑銷售價格常規(guī)陽離子交換介質推薦 SP Beads 6FF。
純化試劑篇1:分離純化某一特定蛋白質的一般程序可以分為前處理、粗分級、細分級三步。前處理分離純化某種蛋白質,首先要把蛋白質從原來的組織或細胞中以溶解的狀態(tài)釋放出來并保持原來的天然狀態(tài),不丟失生物活性。為此,動物材料應先剔除結締組織和脂肪組織,種子材料應先去殼甚至去種皮以免受單寧等物質的污染,油料種子比較好先用低沸點的有機溶劑如**等脫脂。然后根據不同的情況,選擇適當的方法,將組織和細胞破碎。動物組織和細胞可用電動搗碎機或勻漿機破碎或用超聲波處理破碎。植物組織和細胞由于具有纖維素、半纖維素和果膠等物質組成的細胞壁,一般需要用石英砂或玻璃粉和適當的提取液一起研磨的方法或用纖維素酶處理也能達到目的。細菌細胞的破碎比較麻煩,因為整個細菌細胞壁的骨架實際上是一個借共價鍵連接而成的肽聚糖囊狀大分子,非常堅韌。破碎細菌細胞壁的常用方法有超聲波破碎,與砂研磨、高壓擠壓或溶菌酶處理等。組織和細胞破碎后,選擇適當的緩沖液把所要的蛋白提取出來。
蛋白純化試劑.產品介紹,DextrinBeads是一種純化帶有麥芽糖結合蛋白(MBP)標簽蛋白的親和層析介質,具體性能見表1。MBP可促進連接蛋白的正確折疊,增加在細菌中過量表達的融合蛋白的溶解性,尤其是真**白。DextrinBeads可以一步純化MBP融合蛋白,結合的融合蛋白可以用10mM麥芽糖進行溫和洗脫,保護了標簽蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位點特異性蛋白酶切除。問題及解決方案問題原因分析:柱子反壓過高填料被堵塞按照第3部分進行樹脂清洗。裂解液中含有微小的固體顆粒,建議上柱前使用濾膜(0.22或0.45μm)過濾,或者離心去除。目的蛋白沒有吸附目的蛋白未表達確保目的蛋白表達樣品或緩沖液中存在一些干擾因素如非離子去污劑樣品透析或用結合液稀釋細胞產生大量的淀粉酶影響結合力培養(yǎng)基中添加葡萄糖,抑制淀粉酶的表達融合蛋白使麥芽糖結合位點阻塞或扭曲,影響了目的蛋白的結合力更換載體柱子結合時間太短將樣品與DextrinBeads振蕩孵育4度2小時或更長時間洗脫樣品較雜目的蛋白降解加一些蛋白酶抑制劑,如PMSF、EDTA等平衡/洗雜不充分增加平衡液體積,確保樹脂充分平衡/洗雜,如樹脂太臟按照第3部分進行樹脂清洗谷胱甘肽親和純化介質。
蛋白純化試劑,抗體純化產品rProteinABeads是用于分離和純化單克隆抗體、多克隆抗體或Fc-融合蛋白的通用性親和層析介質,具體性能見表1。ProteinA是一種分離自金黃色葡萄球菌的細胞壁蛋白,主要通過Fc片段結合哺乳動物IgG,但是不與狗lgG結合,不結合人lgM、lgD和IgA。蛋白A與蛋白G與不同來源及亞類的免疫球蛋白結合能力不一樣,具體見表2。天然ProteinA有五個IgG結合區(qū)域和一些未知功能的區(qū)域,重組proteinA去除了與白蛋白及細胞表面結合位點,只含有五個IgG結合區(qū)域,減少了非特異性吸附。常州天地人和試劑經銷商。安徽天地人和試劑報價
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磁珠法口腔拭子基因組提取試劑盒可以快速地從口腔拭子中提取高質量DNA。提取出的基因組 DNA A260/A280 典型的比值達 1.7-1.9,產物可用于PCR、載體構建、核酸雜交等下游實驗。
磁珠法口腔拭子基因組提取試劑盒組成
試劑名稱 50T 200T
Buffer A 5ml 20ml
Buffer B 10ml 40ml
蛋白酶K 500μl 2ml
磁珠 10ml 40ml
Wash Buffer 125ml 100ml
Elution Buffer 5ml 20m
l2.問題及解決方案
提不到DNA或產量很低取樣量少:取樣前半小時漱口。樣品保存不當:確保樣品新鮮有效??赡軟]加入ProteinaseK,或加入量不足,導致細胞裂解不完全,或者65℃孵育時間過短。 2.DNA未完全回收:減少上樣量或增加磁珠量,確保樣品充分吸附。確保磁珠與樣品充分混勻,吸附時磁珠一直保持懸浮狀態(tài)。3洗脫液中無/很少DNA:確保Washbuffer中加入相應的乙醇,用完后要密封保存,防止揮發(fā)。確保洗脫液中的鹽濃度和pH。洗脫液用量不當:調整洗脫液體積。磁珠風干時間太長,磁珠未完全分散。4,DNA純度不高,有污染RNA污染:檢查RNase是否有問題,適當增加RNase的用量。洗雜不充分,含有雜質。若用去離子水洗脫DNA,A260/280比值會偏低,但并不表示純度低。 上海磁珠系列試劑代理廠家
上海楚知生物科技有限公司發(fā)展規(guī)模團隊不斷壯大,現有一支專業(yè)技術團隊,各種專業(yè)設備齊全。致力于創(chuàng)造***的產品與服務,以誠信、敬業(yè)、進取為宗旨,以建上海楚知生物產品為目標,努力打造成為同行業(yè)中具有影響力的企業(yè)。我公司擁有強大的技術實力,多年來一直專注于從事生物科技領域內技術開發(fā)、技術咨詢,化學試劑(除危險化學品、監(jiān)控化學品、**爆竹、民用物品、易制毒化學品),實驗室設備(除醫(yī)療器械),辦公家具,計算機、軟件及輔助設備(除計算機信息系統(tǒng)安全**產品),化工原料及產品(除危險化學品、監(jiān)控化學品、**爆竹、民用爆竹物品、易制毒化學品)銷售。 【依法須經批準的項目,經相關部門批準后方可開展經營活動】的發(fā)展和創(chuàng)新,打造高指標產品和服務。上海楚知生物始終以質量為發(fā)展,把顧客的滿意作為公司發(fā)展的動力,致力于為顧客帶來***的知楚搖床,博旅發(fā)酵罐,小動物發(fā)光成像,ATS高壓均質機。